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1、中国卫生检验杂志2006年2月第16卷第2期ChineseJournalofHealthLaboratoryTechnology,Feb2006;Vol16No2251综述食品中沙门菌检测方法进展李毅(浙江省温州市疾病预防控制中心,浙江温州32500)[关键词]沙门菌;食品;PCR;引物设计;抗体+[中图分类号]R37822[文献标识码]A[文章编号]1004-8685(2006)02-0251-03沙门菌(Salmonella)是一类广泛分布于自然界,对人类和微生物生长。虽然缓冲蛋白胨水被建议常规使用(由于其可动物具有极大危害的革兰阴性
2、肠道致病菌。目前全世界已分保持溶液pH值稳定),但对培养基的选择仍存有争论。第二,[1]离出2000多个血清型,我国已发现216个。蛋、家禽和肉是选择性增菌步骤,它使沙门菌生长而使肉汤中同时存在的类产品是沙门菌病的主要传播媒介,感染主要取决于沙门菌微生物数量减少,与预增菌培养基相似,对选择性培养基的选的血清型和食用者的身体状况,受威胁最大的是小孩、老年人择,也存在许多不同的观点。目前应用的主要有如下3种类及免疫缺陷个体。根据国际惯例,要求对易受沙门菌污染的型:四硫酸钠煌绿(TTB)增菌液、亚硒酸盐胱氨酸(SC)增菌液食品进行分类管理,以使大多数食物不含沙门菌,从而有效预和氯化镁
3、孔雀绿(MM)增菌液。由于没有任何一种培养基可防控制沙门菌病。自19世纪后期,沙门菌首次被鉴定为人类以全面地保持所有食品基质中各种沙门菌血清型,所以,较适的一种病原菌以来,检测方法学都是建立在采取感染病人的当的做法就是使用两种培养基平行地进行试验。第三步是分粪便或血液作为临床病料的基础上。此后的60年间,用于从离步骤,即选择性培养物在含一种或多种抑制非沙门菌生长食品中分离沙门菌的方法实质上与那些用于临床病料的方法制剂的琼脂平板上划线培养,然后对平板上肉眼可见的特征是相同的。但至少有3个因素限制了用于临床病料的方法应性菌落进行确认,并对该菌落分离物进行一系列生化和血清用在食品分析
4、上。第一,通常,沙门菌的含量水平在污染食品学检测,以作出鉴定。传统沙门菌检测法全过程需时至少4~中比有感染病人的病料中要低很多;第二,食品本身的性质会7d,才能得出明确的诊断结果。食品中沙门菌污染量小,常受干扰病原的检测,例如,某些食品中固有菌群可能处在一个很应激损伤,不易恢复,现用检测方法得到阴性报告最少需4d,高的水平,从而影响特定细菌的选择性分离和鉴定;第三,与阳性报告还要延迟2~3d。临床病料不同的是,经过加工的食品,由于加热、干燥、高含盐量、酸和冷冻等因素的作用,其中的沙门菌受到了尚不致命的2以抗体为基础的检测方法损伤或称!致伤∀。这就形成了一个具有不同生长特性的细
5、菌利用抗原-抗体反应的特异性,来进行细菌的鉴别和血群。这种现象对那些希望从食物样品中分离出沙门菌的食品清学定型,已有半个多世纪的历史。细菌菌体或鞭毛抗原的分析家来说有很大影响,因为在选择培养基上直接培养!致特异性抗体的存在,使得人们可以建立一些快速方法来检测伤∀的沙门菌通常是以细菌死亡和试验失败而告终。为克服以食品为载体的病原。已经建立的沙门菌免疫学检测方法有这些困难,人们建立了一种简单的微生物增殖步骤,专门针对许多种,大致可分为以酶标抗体(ELISA),荧光抗体染色(免疫以食品为传播载体的病原。虽然这些方法本身证明是可靠荧光法),同位素标记抗体(放射免疫试验)为基础的方法及其
6、的,但却很费力、耗时,需要4~7d才能完成。因此,在需要及它多种以抗体为基础,利用乳胶凝集、免疫传感器、免疫扩散时、快速评价食品中微生物的安全性时,通常不被采用。随着及免疫色谱技术的方法。但常规中最广泛采用的是以双位点DNA和抗体技术的发展,特别是PCR技术以其敏感性强、特ELISA技术即夹心ELISA为基础的方法。异性高、简便、快速等优点,广泛应用于沙门菌检测,近10~15最近黎兆滚等人[3]首次在国内口岸系统应用微量板年间发展了许多改进的方法,其中有些可以在48h内检出沙ELISA法对进出口动物产品(鱼粉、肉骨粉等)进行沙门菌检门菌。长期以来,人们在探索沙门菌检测方法的过程
7、中,作出测。该法采用预先包被了沙门菌(A-E群)单克隆抗体的微了不懈的努力,现将有关检测进展总结如下。量板,加入经增菌处理的样品,反应后再加入一定的指示剂,作用毕后用酶标仪测定OD值来判定结果。食物样品经适当[2]1传统的培养方法的增菌处理,也可用此法进行沙门菌检测。ELISA法检出沙门用于沙门菌分析的传统方法是食物样品分步增菌,以增56菌的极限范围在10~10cfu/m,l因此,要得出可靠的结果,加病原菌的可检出率,这种培养方法总体可分4个不同阶段食物样品首先必需进行预增菌、选择性增菌,
