资源描述：
《博落回生物碱的提取及分离工艺》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、第30卷第5期南昌大学学报(理科版)Vo.l30No.52006年10月JournalofNanchangUniversity(NaturalScience)Oct.2006文章编号:1006-0464(2006)05-0481-03博落回生物碱的提取及分离工艺ab*b范伏田,温辉梁,王远兴(南昌大学a.化学系;b.食品科学教育部重点实验室,江西南昌330031)摘要:采用正交实验方法研究博落回生物碱的盐酸提取工艺。结果表明:盐酸法提取的最佳工艺条件为:1.5%盐酸,固液比1z18,85e提取3次,每次2h,提取率达到80.1%,与文献报道的醇提法相
2、比其提取率提高20%左右。然后采用柱层析方法分离得到高纯度的血根碱和白屈菜红碱,并建立了一种HPLC法测定博落回中生物碱含量的方法。关键词:博落回;提取;分离;高效液相色谱中图分类号:Q94618文献标识码:A博落回[MacleayaCordata(Willd)R.Br]系罂试剂和样品:盐酸、氨水、三乙胺、冰乙酸、乙醇、[1]粟科博落回属植物。据报道其主要有效成分为硫酸、乙醚、乙酸乙酯(以上试剂均为分析纯),甲醇血根碱和白屈菜红碱等多种生物碱,其中血根碱具为色谱纯;博落回叶(江西医药工业研究所);层析有很好的抗真菌和消炎活性,可用作广谱抗生素和硅胶(
3、青岛海洋化工厂)粒度为100~200目;博落[2-3]抗肿瘤、抗艾滋病的药物,还有抵制微生物和草回总碱、血根碱、白屈菜红碱标准品(均为Sigma产食动物的生物化学活性,对昆虫和脊椎动物也有灭品)。[4-6]杀作用,能够抑制绳卵孵化,用作生物农药,全112博落回总生物碱的提取面开发研究博落回中的生物碱意义深远。1.2.1博落回生物碱的提取方法将自然风干的提取博落回生物碱的方法较多,有乙醇提取博落回叶粉碎成末并过40目筛。称取20g该粉末[7][8]法、大孔树脂分离法等,但这些方法提取率较用一定量的盐酸,在一定温度的水浴中提取若干次小,提取物中生物碱含量
4、较低,纯化操作过程烦琐。(每次约2h),搅拌冷凝回流。合并多次盐酸提取本实验以盐酸提取,乙醇纯化,然后采用硅胶柱层析液,加浓氨水至pH值为9~10,静置24h充分沉方法分离得到血根碱和白屈菜红碱单体,同时以高降,滤集沉淀,在50e下真空干燥,即得博落回粗效液相色谱方法检测提取分离产物中的生物碱含碱。[9]量。对比文献,该色谱条件分离度高,稳定性、重1.2.2提取条件的正交试验设计选取盐酸浓度、现性好,适合于博落回生物碱工业化生产中的含量固液比、提取温度、提取次数等4个因素,每个因素4监控。取3个水平,按L9(3)正交表对提取工艺进行研究,确定博落回生
5、物碱盐酸提取法的最佳工艺参数。1实验部分[1]1.2.3博落回总生物碱的含量测定采用文献111仪器和材料的方法测得所采购的博落回叶中血根碱、白屈菜红仪器:高效液相色谱仪系统(Waters515泵,C18碱的含量分别为0.41%和0.19%,总碱含量为色谱柱,2487紫外检测器,Millennium色谱工作站);0.6%。FA1104电子天平(上海精天电子仪器厂);电子恒113博落回生物碱的纯化与分离温不锈钢水浴锅(上海宏兴机械仪器实业制造公称取100g博落回粗碱,用95%乙醇回流提取司);中药高速粉碎机(上海国药仪器厂);聚乙烯薄两次,合并两次提取液
6、并向其中加入适量浓硫酸至膜柱(南昌大学化学实验仪器厂)500mm@40mm;pH值为2~3,静置过夜,出现大量红色絮状沉淀。X-4数字显示显微熔点测定仪(北京泰克仪器有限滤集沉淀并在40e下真空干燥,得到博落回生物碱公司)。硫酸盐10g。用HPLC方法鉴定其组分并测定纯化收稿日期:2006-03-20作者简介:范伏田(1976-),男,硕士生;*通讯作者:温辉梁(1963-),男,教授.E-mai:lhlwen@sohu.com1#482#南昌大学学报(理科版)2006年后的总碱含量。品溶液浓度为横坐标,计算得回归方程:y=72719x称取上述博落回
7、生物碱硫酸盐5g,加入适量氨+1998,r=0.9997水碱研磨,并用乙醚回流十次左右,浓缩乙醚提取液1.4.3样品溶液的配制精密称取各次提取实验得类白色粉末2.5g。用少量氯仿溶解白色粉末待所得的粗碱4~5mg,用15mL无水甲醇超声溶解柱层析分离。另称取100~200目硅胶200g,用乙定容至25mL容量瓶中,待HPLC检测。酸乙酯摇匀,浸泡12h,装入内径约为40mm、长2结果与讨论500mm的聚乙烯薄膜柱内静置数小时,加入样品溶液,用乙酸乙酯展开至柱底。柱子呈现红、黄两条色211HPLC测定条件的选择带,切取红色和黄色两部分,分别用无水乙醇洗
8、脱,流动相的pH是影响HPLC分离生物碱效果的减压浓缩洗脱液,析出固体物,将固体粉末用氨性无重要因素。实验表
