RNA 干扰技术在医学遗传学中的应用

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1、北京大学学报（医学版）·%2K·].I!"#^.UP_‘B"/I"Ba_!ABQ?（-_#^Q-ARB_"R_A）$a8F14L$"81%$U)(1022O·综述·!"#干扰技术在医学遗传学中的应用%%%%，0!吴$丹，吴白燕，梁红业，"&’()*+,-."/（%1北京大学医学部基础医学院医学遗传系，北京$%22234；015)6&*+7)’+89-:7&’/)’)+;<=，")>?8*@A+&+)B’=+;+:+)98*C&=;

2、+&+)’B=F&’G，"?%24%H，IA#）［关键词］!"#干扰；疾病模型，动物；遗传性疾病［中图分类号］!4JH$$［文献标识码］#$$［文章编号］%KL%M%KLN（022O）2%M2%2KM2K$$某些小的双链!"#可以高效特异地阻断体内特定基因包括起始阶段和效应阶段。（%）起始阶段：G=!"#进入细胞表达，促使7!"#降解，诱使细胞表现出特定基因缺失的表被核酸酶!’&=)!家族中的5;<)*酶特异识别，以一种#QP型，称为!"#干扰（!"#;）。!"#;同时也是体内抵御外在依赖的方式逐步切割成

3、长约0%Y04(6的双链小分子干扰感染的一种重要保护机制。作为一种简单有效的代替基因!"#（=;!"#），且每条单链的4Z端都带有0个突出的非配对敲除的遗传工具，!"#;将大大加速功能基因组学的研究进碱基（多数是II），=;!"#的生成启动了!"#;反应。（0）效展，被!"#$%"$评为0220年最重要的科研成果之一。!"#;导应阶段：=;!"#结合一个核酶复合物，形成所谓的!"#诱导致的基因沉默发生在转录后，所以被称为转录后基因沉默的沉默复合物（!"#M;’G:<)=;F)’<;’S<876F)[，!B

4、AR），激活该（PQ/A）。复合物需要一个#QP依赖的将=;!"#解链的过程，活化以后的!BAR定位到与=;!"#中的反义链互补的靶7!"#转录!"#$%&的研究历史本上，并在距离=;!"#4Z端%0个碱基的位置切割7!"#。%JJ2年，美国和荷兰的两个转基因植物实验组将紫色色’1’"!"#;的放大效应机制素基因导入矮牵牛植物，想通过增加紫色色素基因拷贝来获在!"#;途径中可能存在某个信号扩增的步骤。这种扩得具有更多红花的矮牵牛，结果出乎意料：有些转基因的牵增可能是复制外源注入的G=!"#从而产生更多的=

5、;!"#，也牛花却开出部分或全部的白花，表明色素合成不是增加而是可能是直接扩增=;!"#本身。这种现象的产生至少包含4减少了。事实上，不但转入的基因没有表达而且植物本身的种扩增放大机制：（%）长的G=!"#被5;<)*酶裂解成的每个色素合成基因也被抑制了，这种现象当时被称为共抑制（<8M=;!"#（又叫初级=;!"#），都具有结合一个同源7!"#的能［%］［0］=:66*)==;8’）。%JJH年，R8S’;等在真菌中发现!"#;现力，故放大水平取决于G=!"#的长度，此步放大效应约%2Y象，他将外源类胡

6、萝卜素基因导入链孢酶，使转化细胞中的02倍。（0）在细胞内还存在有一种!"#依赖的!"#聚合酶内源性类胡萝卜素基因受到抑制，当时称这种现象为消除作（!"#MG;*)<+)G!"#68FV7)*&=)，!G!P）。在其作用下，可以［4］用（T:)FF;’S）。%JJO年，美国康奈尔大学的/:8等试图利使靶7!"#也形成G=!"#，随后G=!"#再被5;<)*酶裂解成用反义!"#技术阻断6&*M%基因以阻断线虫卵裂的不对称新的=;!"#（又叫次级=;!"#）。通过这种聚合酶链式反应，性，但对照组注射正义!"#

7、不但不增加该基因表达，反而像细胞内的=;!"#数量大大增加，显著增强了对基因表达的抑反义!"#一样特异性阻断该基因的表达。直到%JJ3年，制作用。（4）以上生成的=;!"#可多次重复应用，进一步提［H］U;*)等通过大量实验发现，双链!"#（G8:(F)=+*&’G!"#，高了其放大作用。G=!"#）能够比反义!"#或正义!"#更有效地关闭基因的("#$%&的应用方向表达，他们称这种现象为!"#;，并且认为正义!"#引起的基因抑制是因为其中混入了极少量的G=!"#。(1!"全基因组的!"#;筛选迄今!"#

8、;现象不但在线虫（&’$($)*%+）、果蝇（G*8=86D;M利用!"#;筛选对研究寿命相关疾病很有利。利用系统F&）、布氏锥虫（+*V6&’8=87&(*:<);）、涡虫（6F&’&*;&’）和水螅性全基因组!"#;筛选出线虫失活的长寿基因，确定寿命与［%%］（DVG*&）等无脊椎动物中存在，而且也存在于脊椎动物中，如线粒体功能、胰岛素信号有关，包括几个平行途径。利用［OX%2］斑马鱼（W)(*&9;=D）和小鼠的早期胚胎