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1、陕西医学杂志2010年2月第39卷第2期169survivin在结直肠癌中表达及与临床病理特征的关系河北北方学院附属第二医院普外科(张家口075100)3△3333▲鲁蓓武欣王琳冬王淑强范婕左东升白美玲张林西摘要目的:检测survivin在结直肠癌及正常结肠黏膜中的表达,为研究结直肠癌浸润转移及可能的预后因素提供理论依据。方法:应用流式细胞术和S2P免疫组织化学检测100例结直肠癌及11例癌旁正常黏膜中survivin的表达情况,并结合临床病理相关因素进行分析。结果:FCM检测发现,高、中、低分化及粘液癌组survivin表达平均FI值分别为3.16±1.39、3.20±1.04、3.32±0
2、.48和3.31±1.06,均显著高于正常结直肠黏膜(P<0.01)。结直肠癌淋巴结转移组平均FI值为3.11±1.19,显著高于无淋巴结转移组(2.26±1.38,P<0.05)。survivin的表达与结直肠癌患者的年龄、性别、肿瘤的发生部位以及分化程度无明显相关(P>0.05)。免疫组化染色结果显示,结直肠癌中survivin的阳性表达率为68.00%,而结直肠正常黏膜无survivin阳性表达(P<0.05);有淋巴结转移的结直肠癌组织survivin阳性表达率显著高于无淋巴结转移组(87.50%vs50.00%,P<0.05)。结论:survivin在结直肠癌中表达异常增高,显著高于
3、正常结直肠黏膜。survivin在结直肠癌中的表达与淋巴结转移密切相关。主题词直肠肿瘤结肠肿瘤流式细胞技术免疫组织化学@survivin【中图分类号】R735.3【文献标识码】A【文章编号】100027377(2010)0220169204结直肠癌是我国常见的恶性肿瘤之一。近年来,例,低分化腺癌11例,粘液腺癌11例;有淋巴结转其发病率有明显升高、发病年龄提前的趋势。凋亡是正移组48例,无淋巴结转移组52例。连续切片,厚常体细胞维持自稳的重要保护机制之一。近年来发现,4Lm,取2～3张切片,其中1张做常规HE染色,由凋亡蛋白家族抑制因子重要成员之一survivin,在成人两位资深病理医师进行病
4、理诊断复查。另一张用组织中无表达,而在人类多数恶性肿瘤组织如食管癌、于免疫组化S2P法检测survivin蛋白表达。同时切[1～4]乳腺癌、肺癌、膀胱癌等中高表达,并能强烈抑制40Lm厚的组织片5片,放入10ml的试管中,用于细胞死亡。本研究采用流式细胞术及免疫组织化学方进行流式细胞术检测。法检测结直肠癌(Colorectalcarcinoma,CRC)及结直2主要试剂兔抗人survivin多克隆抗体肠正常黏膜中survivin的表达情况,并分析其表达与(SantaCrus)、羊抗兔IgG2FITC(Labvision结直肠癌各种病理参数之间的关系,探讨其在结直肠Neomarkers公司产品)
5、、SP29000试剂盒及DAB显示癌进展和转移中的作用,为结直肠癌浸润和转移的预剂等均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。测、预后判断提供理论依据。3流式细胞术检测首先制备合格的单细胞悬[5]材料和方法液,按方法进行。然后进行细胞survivin表达的间接61临床资料收集河北北方学院医学院病理学免疫荧光标记:取单细胞悬液1×10öml,加入兔抗人教研室以及河北北方学院附属第一医院2005年3月至COX22单克隆抗体工作液0.lml,室温孵育30min,加2006年5月间手术切除的结直肠癌标本100例,同时入PBS10ml洗涤一次,弃上清,加入羊抗兔FITC2IgG选取结直肠癌远端病理证实组织学正
6、常的黏膜11例。二抗工作液100Ll,避光室温孵育30min,加入PBS患者术前均未经过放、化疗,且术后病理均确诊为腺10ml离心同上,弃上清以除去未结合的荧光二抗,上癌。其中,男性41例,女性59例,年龄30～78岁,平均机检测前加入PBS0.1ml经500目铜网过滤后上机检年龄58.3岁。发生部位:结肠癌46例,直肠癌54例;组测。同时设一抗或二抗的本底对照和阴性对照。采用织分化程度:高分化腺癌52例,中分化腺癌26美国BeckmanCoulter公司生产的Epics2XLII流式细胞仪进行检测,应用Expo32ADC软件进行免疫荧光3河北北方学院医学院病理学教研室数据分析。检测前调整仪器
7、CV值在2%以内。△河北北方学院附属第二医院病理科4survivin蛋白免疫组化S2P法染色石蜡切▲通讯作者片,常规脱蜡至水。按常规S2P法进行染色,survivin一170陕西医学杂志2010年2月第39卷第2期抗进行1∶100稀释。DAB显色,镜下观察显色结果,表2免疫组化检测survivin表达待阳性部位出现特异性显色时,自来水充分冲洗,终止与临床病理特征的关系[n(%)]显色。苏木素复染,
