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1、第25卷第4期新乡学院学报(自然科学版)2008年12月Vol.25No.4JournalofXinxiangUniversity(NaturalScienceEdition)Dec.2008*拟南芥的室内培养技术进展*高英杰,张玮,赵军锋,刘玉良,赵立群(河北师范大学生命科学学院,石家庄050016)摘要:综述了拟南芥培养过程中常见的问题及解决方法,并介绍了一些实践经验。关键词:拟南芥;种植;室内培养中图分类号:S852.613文献标志码:A文章编号:167423326(2008)0420045204IndoorCultureTechniquesofArabidopsisThaliana*G
2、AOYing2jie,ZHANGWei,ZHAOJun2feng,LIUYu2liang,ZHAOLi2qun(SchoolofLifeSciences,HebeiNormalUniversity,Shijiazhuang050016,China)Abstract:ItisexpectedthatthispapermightbeanavailablereferencefortheresearchesonArabidopsisthaliana.Keywords:Arabidopsisthaliana;plant;indoorculture0引言直播水培法是实验室中常用的一种方法,它适拟南芥(Ar
3、abidopsisthaliana)虽然没有经济价合于高通量的拟南芥突变体的筛选。做法是自制一值,但是作为高等植物中具有最少基因组的物种,在套水培装置,取大小不同的两个一次性塑料杯,大杯[1]科学研究中的地位是极为重要的。目前,作为植物容积500ml,小杯容积300ml。先将小杯口上缝一分子生物学研究必不可少的模式植物,在实验室中层尼龙筛网,筛网上放一张剪有15个均匀分布着小[2]被广泛地种植。孔的滤纸,并剪去杯底,将其置于大杯中;种子点播室内培养不仅可以得到试验所需的材料,也可在15个小孔内;将营养液倒入大杯中,液面与小杯以打破自然条件的限制对拟南芥进行各种诱导,为内的滤纸齐平;在大杯的外面
4、粘一层深色避光纸,可拟南芥新品种的培养和种性的改良提供便利条件,有效防止绿藻的产生。播种后的第一周要及时添加掌握拟南芥室内培养技术对顺利开展植物发育生物营养液以保持种子湿润;种子发芽后,移去滤纸,每学的研究具有重要的意义。周更换一次营养液,营养液液面离筛网0.5cm为拟南芥属于较难培养的植物,许多因素制约着宜,这样可防止霉菌生长。它的正常生长和发育。从尝试进行拟南芥室内培养无菌直播水培法作为直播水培法的改进也较为到现在已有20多年的历史,拟南芥室内培养方法已常用,即采用一种耐高温材料作培养盒,用80目的经得到长足发展,各种技术也已日臻成熟。筛网做成盒子,放入培养盒中,底部与培养盒中的[3]1拟
5、南芥室内培养方法研究1/4MS无机盐营养液面紧贴。种植方法是用毛拟南芥室内培养一般从种子春化开始,经历消笔将处理后的种子轻轻均匀地涂抹在筛网上,然后毒、育苗、移栽、后期管理、种子收集及保存等阶段。放入培养箱中。种子在播种后2d即可萌发,5d后通常采用水培和土培两种方法。根长约1cm。这种方法的优点是所用材料全部可1.1水培法以灭菌,在超净工作台中进行播种能有效地防止杂*收稿日期:2008210218基金项目:人事部及河北省留学回国人员择优科研启动经费资助项目(项目编号:200712)作者简介:高英杰(1978-),男,河北饶阳人,河北师范大学生命科学学院实验师,硕士,研究方向:植物组织培养。通
6、讯作者:赵立群(1970-),博士,河北师范大学生命科学学院副教授,硕士生导师,研究方向:植物细胞信号转导。E2mail:zhaolq70@yahoo.cn.#45#菌污染,保证后续实验顺利进行。培养盘由盖子、种植穴盘、底等三部分组成,尺寸为除此之外,采用尼龙筛网和海绵缝在一起作为宽0.5m@0.25m。其中种植穴盘的规格有8、32、种子生长界面培养拟南芥的方法也较常见。刘峰等50穴等,可根据实际需要选用。我们改变了以往由则采用离心管培养拟南芥幼苗,即先将1.5ml离心上向下的传统浇水方法,浇水时,把水倒入培养盘即管去掉底部,将配置好的MS培养基(琼脂5.5g/L,可,水可由穴盘的小孔直接倒吸
7、入种植穴盘的培养pH5.7)放入离心管内,离心管固定在营养液上,种基质中,这样就不会因为浇水而伤害到弱小的拟南子均匀播于培养基表面,每个离心管内少于5粒种芥幼苗。移栽法是这一方法的改进,培养基质仍为子,移入光照培养箱中光照培养,约5天幼苗的根可营养土与蛭石的混合物。具体做法是:首先对种子[4]穿过离心管,并根据情况适当间苗。消毒,拟南芥种子经表面(75%乙醇,30s;无菌水洗1.2土培法3次)和深
