动物克隆中的端粒和端粒酶

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1、《生命的化学》2011年31卷5期·760·●CurrentTopicCHEMISTRYOFLIFE2011，31(5)文章编号:1000-1336(2011)05-0760-04动物克隆中的端粒和端粒酶征月良临沂大学生命科学学院，临沂276000摘要：端粒是染色体上的一种重要结构，对维持染色体的稳定性起重要作用。核移植后，端粒长度和端粒酶活性的变化是重要的核重编程事件。不同种类的动物和供体细胞核移植后，在端粒长度的变化上存在一些差异，反映了重编程程度的不同。核移植后，在克隆囊胚中存在高水平的端粒酶活性，克隆动物的端粒长度延长，可能是由于克隆过程中端粒酶基因的重编程的缘故。关键词：

2、克隆；端粒；端粒酶中图分类号：Q813将供体细胞的核移入去核卵母细胞中，产生克致，但与自然交配产生的相同年龄绵羊相比，克隆[1][4]隆胚胎，胚胎移植后，获得克隆动物(图1)。核移植绵羊的TRF长度减少。Shiels等认为，核移植过程可后，在卵母细胞胞质的作用下，供体核被重编程，能不能恢复克隆绵羊的端粒长度。尽管克隆绵羊的发生一系列变化，重新回到合子核的状态。基因组TRF长度较短，但它交配后能正常怀孕，并成功地分重编程机制与复杂的表观遗传修饰有关，如DNA的娩出健康后代，而且后代绵羊的TRF长度与自然交配[5]甲基化修饰、组蛋白的甲基化和乙酰化修饰、X染色产生的绵羊一致。Betts

3、等用颗粒细胞进行核移植，体失活等。端粒长度的变化是一种重要的核重编程获得克隆山羊。在克隆山羊的皮肤中，端粒比年龄事件，核移植后，端粒长度和端粒酶活性变化如相当的非克隆山羊短。山羊成纤维细胞核移植后，何，成为核移植研究的热点之一。在克隆山羊的皮肤和白细胞中，TRF长度比年龄相当[5]1.动物克隆中的端粒长度变化的非克隆山羊短。在哺乳动物中，端粒是染色体上由(TTAGGG)n猪成纤维细胞核移植后，获得克隆猪。在克隆重复序列组成的结构，它能防止染色体末端融合、重猪的皮肤中，端粒长度与年龄相当的自然繁殖猪无[6][7]组和降解，将染色体附着到核膜上，促进染色体末端差异。Kurome等用猪成

4、纤维细胞作为核供体，生的完全复制，从而维持染色体结构的稳定性。随着体产第一代克隆猪，从克隆猪中收集唾液腺祖细胞作细胞每次分裂，端粒重复序列不断丢失，当端粒缩短为核供体，进行连续核移植，生产第二代和第三代到一个临界长度时，导致细胞周期停顿或细胞程序性克隆猪。从第一代到第三代克隆猪，克隆胚胎的完凋亡。在绵羊成纤维细胞中，随着细胞分裂的进行，全发育率分别为1.4%、3.3%和2.3%。连续克隆不会端粒逐渐缩短，每次细胞分裂丢失50~200bp。在经导致克隆猪的端粒缩短，在第一代到第三代克隆猪历100个群体倍增(populationdoubling,PD)后，细胞分中，端粒长度分别是16.

5、3kb、18.1kb和20.5kb，与年裂率下降[2]。Wilmut等[3]用绵羊乳腺上皮细胞进行核龄相当的自然繁殖猪相似。[8]Lanza等从45日龄的牛中获取成纤维细胞，进移植，得到克隆绵羊，引起世界关注。对克隆绵羊行长期体外培养，产生衰老细胞。与年轻成纤维细胞的末端限制片段(terminalrestrictionfragment,TRF)进相比，衰老细胞中胞质微丝量多，溶酶体大，β-半乳行分析，发现克隆绵羊的TRF长度与核供体细胞一糖苷酶的活性增强，早期群体倍增水平互补DNA-1(earlypopulationdoublinglevelcomplementaryDNA-1,收

6、稿日期：2011-03-02EPC-1)的表达水平下降。用衰老的成纤维细胞进行作者简介：征月良(1971-)，男，博士，副教授，通讯作者，E-mail：zhengyueliang@lyu.edu.cn核移植，获得克隆牛，克隆牛的端粒比核供体细胞《生命的化学》2011年31卷5期●知识介绍·761·CHEMISTRYOFLIFE2011，31(5)[1]图1体细胞克隆过程简图长。他们认为，核移植过程能延长核供体细胞的寿不同有关。在输卵管上皮细胞和乳腺上皮细胞中，命，克隆牛的细胞年龄并不反映核供体细胞在核移端粒损耗快，导致端粒较短，核移植后，克隆牛的植前的体外倍增数目。克隆牛的端粒比年

7、龄相当的端粒比人工授精牛短。而在肌肉细胞中，端粒长度体外受精(invitrofertilization,IVF)牛长，EPC-1能被保持，核移植后，克隆牛的端粒与人工授精牛相[8][9]mRNA的表达比年龄相当的IVF牛高。Tian等从一似。输卵管上皮细胞核移植后，产生克隆母牛。尽管个13岁龄的牛中获得成纤维细胞，进行体外培养。在克隆牛的端粒比年龄相当的人工授精牛短，但克隆牛培养过程中，牛成纤维细胞的端粒缩短，平均每代缩的繁殖性能正常。对克隆母牛进行人工授精，母牛能短