氨基酸螯合铁的制备

氨基酸螯合铁的制备

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时间:2019-05-28

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1、氨基酸螯合铁的制备及分析一、实验原理:通过氨基酸与硫酸亚铁在一定的比例、温度、PH的条件下制备氨基酸螯合铁,并对合成物利用分光光度法测定螯合率。二、实验药品:复合氨基酸、七水合硫酸亚铁、乙酸钠、邻二氮菲、盐酸羟胺、无水乙醇、氢氧化钠、D-异抗坏血酸钠三、实验步骤1.1氨基酸螯合铁的制备1.称取5.00g氨基酸放于锥形瓶内,加入约0.667g的D-异抗坏血酸钠作为抗氧化剂,并加入1.26g(0.00828947mol)的硫酸亚铁,加入6.67ml蒸馏水溶解并用保鲜膜封紧瓶口反应10min左右。2..氨基酸螯合

2、铁的螯合率测定2.1铁标准曲线的绘制以0.1242g七水合硫酸亚铁(分析纯0.000446762mol)配置0.1000mg/mL的Fe标准溶液,从中用移液管取10.00mL溶液移至100mL容量瓶中,再加入2.00mL2mol/LHCl,用水稀释至刻度,得到10μg/mL的Fe标准溶液。在5个50mL容量瓶中分别加入0.00mL,2.00mL,4.00mL,6.00mL,8.00mL浓度为10μg/mL的Fe标准溶液,再分别加入1.00mL盐酸羟胺(10%),2.00mL邻二氮菲(0.15%),5mL乙酸

3、钠溶液(1mol/L),每加一种试剂后摇匀。最后用溶剂(蒸馏水和乙醇按一定比例(9:1?)配置)稀释至刻度,摇匀,放置10min。以空白试剂(未加铁的溶液)为参比,在510nm的波长下,测量各溶液的吸光度,以铁量为横坐标,吸光度(A)为纵坐标,绘制标准曲线如下:线性方程为A=0.0044+0.213c(2)测定游离铁离子的吸光度用移液管取10mL步骤一中的滤液,加入90mL无水乙醇,于超声仪中超声萃取15min,然后离心分离,取清液转移至250mL容量瓶中,定容摇匀。分别从中取10mL加入两个50mL容量瓶

4、中,编号1,2,1中加入1.00mL盐酸羟胺(10%),2.00mL邻二氮菲(0.15%),5mL乙酸钠溶液(1mol/L);2中加入1.00mL盐酸羟胺(10%),5mL乙酸钠溶液(1mol/L),作为空白对照,设定吸光度为510nm,测定溶液吸光度。(3)计算螯合率由线性方程及吸光度可计算得稀释后的溶液浓度c1=(A-0.0044)/0.213然后可计算出稀释前反应后溶液浓度c2=c1×125然后计算出反应后溶液中游离铁离子质量m1=c2×V又反应体系中铁离子总量m2=(铁的摩尔质量/七水合硫酸亚铁的摩

5、尔质量)×称取的七水合硫酸亚铁盐的质量=(56/278.02)×1.8020最后计算出螯合率w=1-m1/m2

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