腺苷A_1受体基因敲除小鼠戊四氮致痫后大脑皮层蛋白组学的研究_刘志广

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1、第４１卷第１期第１６页华中科技大学学报（医学版）Ｖｏｌ．４１Ｎｏ．１Ｐ．１６２０１２年２月ＡｃｔａＭｅｄＵｎｉｖＳｃｉＴｅｃｈｎｏｌＨｕａｚｈｏｎｇＦｅｂ．２０１２腺苷Ａ１受体基因敲除小鼠戊四氮致痫后大脑皮层蛋白组学的研究＊刘志广，康慧聪，王媛，李巷，刘晓燕，刘建林，曾铮，朱遂强△华中科技大学同济医学院附属同济医院神经内科，武汉４３００３０摘要：目的观察腺苷Ａ１受体基因敲除小鼠在戊四氮致痫后大脑皮层蛋白质的表达变化，探讨腺苷Ａ１受体的抗癫痫和脑保护作用机制。方法采用ＰＣＲ技术鉴定腺苷Ａ１受体基因敲除小鼠与野生型小鼠，应用戊四氮（３０ｍｇ／ｋｇ）腹腔

2、注射制作癫痫模型，利用蛋白组学双向电泳检测癫痫发作后大脑皮层蛋白质表达变化，选取部分差异点进行质谱分析。结果点燃组癫痫模型点燃成功后２４ｈ、１个月，分别与对照组小鼠相比，大脑皮层多种蛋白质表达差异具有统计学意义。腺苷Ａ１受体基因敲除小鼠与野生型小鼠相比较，对照组两者之间与点燃组两者之间多种蛋白质表达差异具有统计学意义。癫痫模型点燃成功后腺苷Ａ１受体基因敲除小鼠与野生型小鼠相比，大脑皮层内表达下调蛋白为谷氨酰胺合成酶、醛缩酶Ａ及甘氨酸受体；表达上调蛋白为蛋白激酶Ｃ及３－磷酸甘油醛脱氢酶。结论腺苷Ａ１受体可能通过改变大脑皮层内多种蛋白质表达发挥其抗癫痫

3、和脑保护作用。关键词：腺苷Ａ１受体；戊四氮；癫痫；蛋白组学；双向电泳；质谱分析中图分类号：Ｒ７４２．１ＤＯＩ：１０．３８７０／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７２－０７４１．２０１２．０１．００４ＰｒｏｔｅｏｍｉｃｓＡｎａｌｙｓｉｓｏｆＣｅｒｅｂｒａｌＣｏｒｔｅｘｉｎＰｅｎｔｙｌｅｎｅｔｅｔｒａｚｏｌ－ｉｎｄｕｃｅｄＫｉｎｄｌｉｎｇＭｏｄｅｌｓｉｎＡ１ＡｄｅｎｏｓｉｎｅＲｅｃｅｐｔｏｒＫｎｏｃｋｏｕｔＭｉｃｅＬｉｕＺｈｉｇｕａｎｇ，ＫａｎｇＨｕｉｃｏｎｇ，ＷａｎｇＹｕａｎｅｔａｌＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＮｅｕｒｏｌｏｇｙ，ＴｏｎｇｊｉＨｏｓｐｉｔａｌ，Ｔｏｎｇｊ

4、ｉＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ，ＨｕａｚｈｏｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｗｕｈａｎ４３００３０，ＣｈｉｎａＡｂｓｔｒａｃｔＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅａｎｔｉ－ｅｐｉｌｅｐｔｉｃｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆＡ１ａｄｅｎｏｓｉｎｅｒｅｃｅｐｔｏｒｂｙｏｂｓｅｒｖｉｎｇｔｈｅｖａｒｉａｔｉｏｎｏｆｐｒｏｔｅｉｎｉｎｃｅｒｅｂｒａｌｃｏｒｔｅｘｄｕｒｉｎｇｐｅｎｔｙｌｅｎｅｔｅｔｒａｚｏｌ（ＰＴＺ）－ｉｎｄｕｃｅｄｋｉｎｄｌｉｎｇｉｎＡ１ａｄｅｎｏｓｉｎｅｒｅｃｅｐｔｏｒｋｎｏｃｋｏｕｔｍｉｃｅ．

5、ＭｅｔｈｏｄｓＴｈｅＡ１ａｄｅｎｏｓｉｎｅｒｅｃｅｐｔｏｒｋｎｏｃｋｏｕｔｍｉｃｅａｎｄｔｈｅｗｉｌｄｔｙｐｅｍｉｃｅｗｅｒｅｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄｂｙＰＣＲ．ＴｈｅｍｉｃｅｗｅｒｅｇｉｖｅｎＰＴＺ（３０ｍｇ／ｋｇ）ｂｙｉｎｔｒａｐｅｒｉｔｏｎｅａｌｉｎｊｅｃｔｉｏｎ．Ｔｈｅｖａｒｉａｔｉｏｎｓｏｆｐｒｏｔｅｉｎｉｎｃｅｒｅｂｒａｌｃｏｒｔｅｘｏｆｍｉｃｅｗｅｒｅｏｂｓｅｒｖｅｄｂｙｔｗｏ－ｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅ－ｓｉｓ（２－ＤＥ）；ｔｈｅｐａｒｔｏｆｔｈｅｓｅｄｉｓｐａｒａｔｅｐｏｉｎｔｓｗａｓｔａｋｅｎｆｏｒｔｈｅｍａｓｓ

6、ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃａｎａｌｙｓｉｓ．ＲｅｓｕｌｔｓＴｈｅｒｅｗａｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｉｎｔｈｅｖａｒｉａｔｉｏｎｏｆｐｒｏｔｅｉｎｉｎｃｅｒｅｂｒａｌｃｏｒｔｅｘａｔ２４ｈａｎｄ１ｍｏｎｔｈａｆｔｅｒｔｈｅｍｉｃｅｗｅｒｅｉｎｄｕｃｅｄｉｎｔｈｅｋｉｎｄｌｅｇｒｏｕｐｓａｓｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐｓ．ＴｈｅｒｅｗａｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｉｎｔｈｅｖａｒｉａｔｉｏｎｏｆｐｒｏｔｅｉｎｉｎｃｅｒｅｂｒａｌｃｏｒｔｅｘｂｅｔｗｅｅｎｔｈｅＡ１ａｄｅｎｏｓｉｎｅｒｅｃｅ

7、ｐｔｏｒｋｎｏｃｋｏｕｔｍｉｃｅａｎｄｔｈｅｗｉｌｄｔｙｐｅｍｉｃｅｉｎｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌａｎｄｋｉｎｄｌｅｇｒｏｕｐｓ．Ｉｎｔｈｅｋｉｎｄｌｅｇｒｏｕｐｓ，ｇｌｕｔａｍｉｎｅｓｙｎ－ｔｈｅｔａｓｅ，ａｋｌｏｌａｓｅＡａｎｄｇｌｙｃｉｎｅｒｅｃｅｐｔｏｒｗｅｒｅｄｏｗｎ－ｒｅｇｕｌａｔｅｄ，ａｎｄｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅＣａｎｄｇｌｙｃｅｒａｌｄｅｈｙｄｅ－３－ｐｈｏｓｐｈａｔｅｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎ－ａｓｅｗｅｒｅｕｐ－ｒｅｇｕｌａｔｅｄｉｎｔｈｅＡ１ａｄｅｎｏｓｉｎｅｒｅｃｅｐｔｏｒｋｎｏｃｋｏｕｔｍｉｃｅａｓｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｗ

8、ｉｌｄｔｙｐｅｍｉｃｅ．ＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎＴｈｅａｎｔｉ－ｅｐｉｌｅｐｔｉｃｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆｔｈｅＡ１ａｄｅｎｏｓ