布鲁氏菌病实验室诊断方法的研究进展_王秀丽

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1、2011，45(11):37～42/王秀丽，等中国兽药杂志·37·布鲁氏菌病实验室诊断方法的研究进展1111211王秀丽，蒋玉文，毛开荣，丁家波，王秋菊，何宇，彭小兵(1．中国兽医药品监察所，北京100081;2．山东农业大学，山东泰安271018)［收稿日期］2011－06－07［文献标识码］A［文章编号］1002－1280(2011)11－0037－06［中图分类号］S855．12［摘要］对布鲁氏菌病的病原学和血清学诊断技术的研究进展进行了综述，包括灵敏特异的ELISA、FPA、PCR、核酸探针技术、胶体金标记技术及新型可视化LAMP等，以期为布鲁氏菌病的研究提供参考。［关键词］布

2、鲁氏菌病;病原学;血清学;诊断ResearchProgressonLaboratoryDiagnosisTechniquesonBrucellosis1111WANGXiu－li，JIANGYu－wen，MAOKai－rong，DINGJia－bo，211WANGQiu－jiu，HEYu，PENGXiao－bing(1．ChinaInstituteofVeterinaryDrugControl，Beijing100081，China;2．ShandongAgricultureUniversity，Tai’an，Shandong271018，China)Abstract:Thispape

3、rreviewedthediagnostictechniquesfrometiologyandserologyofbrucellosis，includingELISA，FPA，PCR，nucleicacidprobetechniques，colloidgoldlabeledImmunologytechnique，newvisualLAMP，andsoon．Keywords:brucellosis;etiology;serology;diagnosis布鲁氏菌病是由布鲁氏菌引起的一种重要的氏菌来确诊。布鲁氏菌的分离主要是用固体培养人畜共患传染性变态反应疾病，其病原为革兰氏阴基如血清葡萄糖

4、琼脂、胰蛋白胨大豆琼脂培养基进性细胞内寄生菌，像其他胞内寄生菌一样，主要是行培养，通过布鲁氏菌的菌体形态、染色特征、菌落通过逃脱噬菌细胞的杀灭作用并在巨噬细胞中增形态、生长特性、生化反应特点以及布鲁氏菌多克殖，从而引起宿主动物的慢性感染。隆抗体凝集试验等方法进行鉴别。布鲁氏菌的分布鲁氏菌病的诊断是布鲁氏菌病研究的重点离培养是诊断布鲁氏菌病的金标准，但是由于布鲁和难题，对病原的分离是确诊布鲁氏菌病的金标氏菌的分离率比较低，容易污染，若加上抗生素，则准，但鉴于病原的分离率较低，并且需要一定的有分离效率更低;此外，分离所需要的时间比较长，至经验人员和生物安全防护设施，不便于普遍应用，少3～8

5、d，有时甚至达45d，不能做出及时诊断;分因而血清学诊断方法对布鲁氏菌病的筛检和确诊离布鲁氏菌对环境和工作人员存在生物安全风险，有着不可替代的优势，得到广泛的应用。本文就布因此不适合普遍应用。鲁氏菌病的病原学诊断和血清学诊断的研究进展1．2PCR技术PCR作为一种快速灵敏的基因诊进行了综述。断技术已广泛应用于科学研究和疾病的诊断。1布鲁氏菌病病原学检测1990年Feteke等首次报道了PCR技术在布鲁氏菌1．1布鲁氏菌的分离培养布鲁氏菌的病原学诊病诊断中的应用，从此应用分子生物学技术诊断布断主要是从血液或者感染的组织中分离培养布鲁鲁氏菌病的研究得到了迅速发展。根据布鲁氏菌基金项目:公益

6、性行业(农业)科研专项(200903027)作者简介:王秀丽(1987年－)，女，硕士研究生。通讯作者:蒋玉文。E－mail:jiangyuwen@ivdc．gov．cn·38·中国兽药杂志2011，45(11):37～42/王秀丽，等基因组内的特异保守序列设计引物，对病料提取为omp2位点的RFLP－PCR是一个首选的区分和鉴［8］物、血清、乳汁以及其他分泌物进行扩增，通过对扩别布鲁氏菌以及描述新种和菌株特征的序列。增产物的大小分析可作出诊断。该方法用于布鲁氏1．3核酸探针技术依据核苷酸的严格配对发展菌病病原的诊断，灵敏度高、特异性好、操作简单、一起来的核酸探针杂交技术具有灵敏度高，

7、特异性次可以检测大量的样品。根据布鲁氏菌特异的保守好，一次性可以检测大量样本的优点，该方法操作序列和存在拷贝数差异的保守序列设计引物建立的简便，不需要特殊的仪器设备，适合用于临床样本多重PCR还可以区分布鲁氏菌的不同种型。另外该的检测和流行病学调查。探针可以重复多次利用，方法还可以用于布鲁氏菌新种型的描述。大大降低了检测的成本。该方法不仅可以诊断布［1］Bricker等针对牛、羊、绵羊、猪种布鲁氏菌种鲁氏菌病还可以鉴定布鲁氏菌的不同种型，是临床