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1、78湖北农业科学HUBEIAGRICULTURALSCIENCESNo11,2004文章编号:0439-8114(2004)01-0078-05百合的组织培养技术综述12蒋细旺,司怀军(11江汉大学医学与生命科学学院,湖北武汉430056;21甘肃农业大学农学院,甘肃兰州730070)摘要:对20世纪90年代以后的百合组织培养技术进行了综述,包括百合外植体的准备、百合的快速繁殖技术等。还对百合种质资源离体保存和百合的组织培养技术在百合育种中的应用作了论述。关键词:百合;组织培养;育种+中图分类号:S68211;Q94
2、311;Q813112文献标识码:A百合(Lilium.spp)是全世界著名的观赏花卉之百合诱导分化的能力依次为种子>鳞片>花丝>花一。中国是世界百合种质资源的分布中心,约有47瓣>叶片。个种、18个变种,占世界百合属总数的一半以上。112外植体灭菌[1]其中36个种、15个变种是我国特有的珍稀种类。常用的药剂有乙醇、升汞、次氯酸钠及漂白粉百合除具有观赏价值外,大多数可以食用、药用,是等。通常都是用乙醇对材料进行预灭菌,使用浓度上等的滋补佳品。但由于人类、非人类的影响,使一一般为70%～75%,灭菌时间为10～60s
3、。升汞的些分布地区窄或生态适应性弱的百合种的生存受到使用浓度为011%～012%,灭菌时间为10min左[7,8]-1严重威胁。传统的百合繁殖方法主要采用常规分右;用浓度为2010g·L的次氯酸钠溶液浸泡[9,10]球、分珠芽鳞片扦插、鳞片包埋等。但采用这些方法10min,灭菌时要不断摇动;漂白粉的使用浓度[11,12]繁殖,繁殖系数较小,特别是经多代分殖以后,常造为饱和溶液,灭菌时间为10～20min。材料灭成种性退化,甚至病毒积累,影响百合的产量和质菌后再用无菌水冲洗5次左右。另外也有将2种灭量。利用组织培养技术
4、,能够迅速去除病毒和更新菌剂同时使用的,如先用1%次氯酸钠溶液浸泡6品种,加快了百合的快速繁殖速度,缩短了百合的生min,取出后放入011%升汞溶液中浸泡8min,无菌[13]育周期。在百合杂交育种中也存在着基因库贫乏、水冲洗6～7次。种间杂交不亲和等局限性,而组织培养中的胚培养、2百合良种的快速繁殖花药培养等技术则可克服这些弊端。自1957年[2]Robb首次发表了百合的组织培养文章后,到现在211百合快速繁殖的途径与特点[3]成功的百合组织培养方法已有40多种。本文将利用植物组织培养技术进行百合快速繁殖时,20世
5、纪90年代以来百合的组织培养研究现状并结常通过5种途径诱导分化产生小植株。第一是器官合我们的一些经验进行综述。型,即通过腋芽发育和不定芽的产生、形成丛生芽块[14～16]的过程。第二是器官发生型,即外植体脱分1外植体的准备[4,17,18]化形成愈伤组织再分化出器官的方式。第111外植体的选择三是胚状体发生型,即外植体按胚胎发生方式形成百合的许多器官、组织都可作为外植体,如鳞胚状体或先形成愈伤组织、再经愈伤组织形成胚状[16,19]片、根尖、叶片、子房、种子、花梗、花瓣、珠芽、花柱、体再生植株的过程。第四是鳞茎型,即
6、鳞片近[20,21]花丝、花药、胚、腋芽、芽尖等。用百合鳞片作外植体轴面或在边缘直接形成带根的小鳞茎。第五比较多,但不同部位的鳞片对分化有差异,王刚是孢子型,即用成熟或未成熟的孢子进行培养。它[4][22～24]等认为兰州百合鳞片产生芽的能力从强到弱依包括花药培养和花粉培养(表1)。次为外层、中层、内层。外植体在培养基上的不同放212百合无病毒苗的培养置方式对百合鳞片的诱导也有影响,其诱导出芽能百合主要靠小鳞茎进行分株繁殖,但长期的营力的从强到弱依次为:鳞片内侧向上平放>鳞片竖养繁殖,使得病毒积累日趋严重,造成百合生
7、长发育[5]直插入>鳞片内侧向下平放。不同外植体诱导不良和品种退化。已报道的14种百合病毒病中,[6]分化的能力也不同,罗凤霞等研究认为,新铁炮LSV(百合潜隐病毒,Lilysymtomlessvirus)、LMV收稿日期:2003-11-12作者简介:蒋细旺(1964～),男,湖北黄陂人,博士,副教授1湖北农业科学HUBEIAGRICULTURALSCIENCESNo11,200479表1组织培养成功的百合的种类种类外植体类型继代繁殖材料文献东方百合(Liliumacapulco)鳞片、花葶、鳞茎根芽丛[25～27
8、]布朗(野)百合(L.brownii)鳞片、叶片、幼胚芽丛、愈伤组织[4,28]龙牙(万载)百合(L.browniivar,viridulum)鳞片:顶芽、茎段、叶片由愈伤组织成小鳞茎:芽丛[11,21]毛百合(L.dauricum)杂交胚[15]紫红花滇百合(L.bakerianumvar.rubrumstearn)鳞片芽丛[29]药(鹿子)
