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1、诊断病理学杂志2000年12月第7卷第4期·303·HE染色封固时出现的问题及解决方法支喜兰1 谭德银212(西安解放军323医院病理科 710054陕西省高级人民法院司法技术室病理组)【中图分类号】 R361.2 【文献标识码】 B 【文章编号】1007-8096(2000)04-0303-01 要获得一张满意的HE切片,除与取材、切片、染色关系2.1.1 切片厚薄不均,主要是组织纤维成分多,切片困难,密切外,封固也是很重要的一个步骤。我们在观察切片中,或切片刀不锋利,切片形成搓板样结构,切片不平整所致。发现有许多与封固有直接关系的质量问题,影响病理诊断。
2、2.1.2 捞片水温低,切片未完全展开,或在捞片过程中,水作者根据多年的制片经验,就封固中出现的问题进行总结:底产生气泡漂浮于组织片上而形成。2.1.3 树胶封固剂过稀或过于粘稠均可引起。1 类似色素样颗粒(俗称空气色素)2.1.4 封固方法不当,在封固时,有些操作者习惯于用手拿即在封固干燥后,切片中出现类似色素样颗粒,散在或着盖玻片,平放于滴了树胶的组织切片上所致。呈片状,圆形或不规则形,易被误认为黑色素或甲醛色素沉2.2 解决方法着。但这种类似色素样的物质分布无规律,可在任何组织切2.2.1 封固时用镊子夹起盖玻片,先一侧放置于滴有树胶片中出现。其产生的原因是切
3、片染色后,封固时切片中的二的组织切片上,然后缓慢放下将空气完全排除。甲苯已完全挥发,中性树胶封固剂不能完全封固而形成的组2.2.2 调整树胶封固剂的浓度及水的温度。织片干燥的空气气泡或腔隙。2.2.3 根据组织的取材适当缩短或延长组织脱水时间。1.1 导致气泡或腔隙产生的诱因1.1.1 操作者为了减少二甲苯的吸收,习惯于将切片从二3 切片中出现云雾现象甲苯中取出,待二甲苯挥发后再封固。或切片很多,封固开有时在切片中出现模糊一片的云雾,组织结构不清,严始并未出现此情况,待二甲苯基本挥发或完全挥发,组织干重影响观察。其产生原因是染色封固时,切片内有水分所燥后封固可出现。
4、致。1.1.2 树胶封固剂过稀,封固当时并不出现,当封固干燥或3.1 形成的原因待二甲苯挥发后可出现上述情况。3.1.1 组织取材太厚,脱水不净,导致切片厚薄不均,影响1.1.3 树胶封固剂粘稠时,滴加的封固剂不能完全覆盖切封固质量。片所致。3.1.2 组织固定液及脱水剂时间过长,未及时更换,影响组1.2 解决方法织脱水。1.2.1 封固时,当切片中二甲苯挥发后,应重新放入到二甲3.1.3 切片染色时,封固前脱水不净,致使切片不能透明,苯中透明。封固后出现云雾现象。1.2.2 调整树胶封固剂的浓度,不能过于粘稠或过稀。以3.2 解决方法 组织取材厚度适中,及时更换脱
5、水机的各细玻璃棒蘸树胶,拿起成滴状,滴速2~3滴/sec适中。种试剂和各种染色试剂。尤其是染色过程中,切片进入二甲苯透明前一定要脱水彻底,即可避免产生切片的质量问题。2 形成气泡以上方法适用于所有需要封固的组织。气泡是封固切片中最常见的问题,直接影响病理观察。2.1 形成气泡的原因(收稿1999-10-28 修回1999-12-13)常规石蜡切片中浸蜡包埋方法的改进弯雪燕 景春果 张晓辉 (山西省闻喜县东镇541医院 043801)【中图分类号】 R361.2 【文献标识码】 B 【文章编号】1007-8096(2000)04-0303-02 病理技术的常规
6、工作是制片。其程序一般是对取材组制片质量,提高效率,避免差错,我们对多年沿用的浸蜡、包织进行脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、染色、封固。每一操作埋方法和步骤进行了改进,取得了满意的效果,现介绍如下。环节的好坏,都会影响制片质量。其中,浸蜡、包埋则是制片1 材料与方法过程中手工操作较复杂而又重要的一个环节。目前大部分1.1 材料 单孔或多孔恒温水浴箱1台,自制浸蜡包埋框、医院在病理制片过程中,尚未能完全取代手工操作。为确保小镊子和其他常用包埋用具。·304·JDiagPathol,December2000,Vol.7,No.41.2 方法 卸掉恒温水浴箱顶盖,放置自制浸
7、蜡包埋框。于浸蜡、包埋时温度差所带来的缺点,不会因温度过高使组此框用白铁皮或铜铁皮制成一凹形方盘,其外形尺寸依恒温织烫坏或使碎小组织变脆、变硬,不会因温度过低使组织与水浴箱大小而定,以能顺利地放入、取出为宜。框上沿向外石蜡脱离;组织中不会出现因包埋而形成的气泡、裂隙、松浮折015~1cm,深约213~215cm,底面应平整光洁,其内放置的斑点(蜡花);包埋组织同石蜡连接坚实可靠,易于切片。用铁皮制作上下嵌合的活动性“井”字形方格,边长2cm,高2.3 包埋中较困难的是对碎小组织的包埋。如各种内窥镜2cm,此格即石蜡包蜡模型。包埋框内注入熔蜡,液面同框面钳取组织、