资源描述：
《土壤食细菌线虫的分离和富集培养方法》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、南京农业大学学报 2002,25(2):71～74JournalofNanjingAgriculturalUniversity土壤食细菌线虫的分离和富集培养方法李辉信,陈小云,胡锋(南京农业大学资源与环境科学学院,江苏南京210095)摘要:从小麦根际土中分离得到一种能取食B1和B2两种细菌的土壤食细菌线虫,并在马铃薯蔗糖培养基上富化培养成功。经鉴定该线虫为原小杆线虫属(Protorhabditissp.),B1为假单胞菌属(Pseudomonassp.),B2为醋杆菌属(Acetobactersp.)。用牛肉膏蛋白胨细菌培养基培养B1和B2两种细菌时,细菌无
2、多糖产生,线虫不能取食细菌而生长繁殖;当用马铃薯蔗糖真菌培养基培养B1和B2两种细菌时,细菌分泌丰富的多糖,线虫生长繁殖较好。多糖是线虫生长繁殖的重要外部环境。关键词:土壤食细菌线虫;富化培养;多糖中图分类号:S15411 文献标识码:A 文章编号:1000O2030(2002)02O0071O04Isolationandenrichmentculturingofasoilbacterial2feedingnematodeLIHui2xin,CHENXiao2yun,HUFeng(CollegeofResourcesandEnvironmentalSc
3、iences,NanjingAgricUniv,Nanjing210095,China)Abstract:AsoilbacterivorousnematodefeedingonbacteriaB1andB2wasisolatedfromrhizospheresoilofwheatandculturedonpotatosucroseagarmedium(PSA).ThenematodewasidentifiedasProtorhabditissp.;B1andB2wereidentifiedasPseudomonassp.andAcetobactersp.,re
4、spectively.B1andB2didn’tsecretepolysaccharoseonbeefpolypeptoneagarmedium(BPA)andthenematodedidn’tgrowonBPAmediumwithB1andB2,whileB1andB2secretedpolysaccharoseonPSAmedium.ThenematodegrewverywellonPSAmediumwithB1andB2.Polysaccharoseconstitutesanimportantexternalenvironmentfornematodeg
5、rowth.Keywords:soilbacterial2feedingnematode;enrichmentculturing;polysaccharose土壤食细菌线虫是土壤自由生活线虫(free2livingnematodes)的主要类群,往往占土壤线虫总数的[1～3]60%～80%,在根际土壤中甚至可达90%以上。国内外近年的研究结果表明,土壤食细菌线虫虽然对有机物质分解的直接作用较小,但因其个体小、世代短、代谢活性高,可通过其自身代谢周转释放出有效养分,特别是与微生物之间存在竞争、牧食等相互作用,因而对有机物质分解、养分循环和能量转[4～8]化等生态
6、学过程起着重要作用,是土壤肥力形成和保持的活跃因子。目前国内在此领域的研究还很薄弱。这些研究的基础是目标线虫的获取,但关于土壤食细菌线虫的富化培养方法未见报道。本研究的目的是获取可培养的土壤食细菌线虫及可被线虫取食的微生物,并了解微生物及其代谢与线虫生长的关系,从而建立有效的线虫富化培养方法。1 材料与方法111 土壤食细菌线虫的分离和表面消毒[9] 土壤线虫用Baermann漏斗法分离,即在漏斗中放入线虫滤纸,将新鲜小麦根际土样(黄棕壤)置于其上,用水淹没土样,24h后通过漏斗下方的乳胶管收集线虫样本。在解剖镜下根据线虫的口器特-1征挑取食细菌线虫,将其转
7、入灭菌的离心管中,用消毒液处理20min,3000r·min离心5min,除去上 收稿日期:2001O05O31 基金项目:国家自然科学基金资助(39570134;39970419) 作者简介:李辉信(1964),博士,副教授,主要从事土壤生态和土壤动物研究。E2mail:huixinli@njau.edu.cn·72· 南 京 农 业 大 学 学 报 第25卷-1清液,再用无菌水反复清洗5次。每次清洗时充分震荡,3000r·min离心5min,弃去上清液。消毒剂用011%的硫酸链霉素和01002%的放线菌酮的混合液。112
8、土壤细菌的分离、纯化-6-7-8将小麦
