HIF_1_反义寡核苷酸体外对缺氧时视网膜_省略_管内皮细胞HIF_1_和VEG

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1、山东医药2010年第50卷第31期HIF-1α反义寡核苷酸体外对缺氧时视网膜血管内皮细胞HIF-1α和VEGF表达的影响12*22付文琴，邓爱军，杜玮，臧萍(1新疆维吾尔族自治区哈密红星医院，新疆哈密839000;2潍坊医学院附属医院)摘要:目的探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)反义寡核苷酸(ASODN)治疗视网膜新生血管性疾病的可行性及机制。方法将体外培养的牛眼视网膜微血管内皮细胞(BREC)分为转染组和未转染组，转染组体外转染HIF-1αASODN(根据GenBank提供的HIF-1αcDNA

2、序列设计)，两组均予125μmol/L的CoCl2行缺氧处理。采用免疫荧光法检测细胞HIF-1α的表达;ELISA法检测细胞培养上清液中VEGF蛋白水平。结果脂质体介导的HIF-1αASODN可成功转染BREC细胞。未转染组缺氧开始时HIF-1α有极低表达，缺氧1h时表达量显著升高，4h达到高峰，16h后下降。而转染组HIF-1α的表达始终在极低水平，两组间有显著性差异(P＜0．01)。转染组从缺氧1h开始VEGF表达明显低于未转染组(P＜0．01)。结论脂质体介导的HIF-1αASODN能有效抑制B

3、REC细胞HIF-1α的表达，从而降低细胞VEGF的表达。关键词:寡核苷酸类，反义;视网膜新生血管;血管内皮生长因子中图分类号:R774文献标志码:A文章编号:1002-266X(2010)31-0020-03EffectsofHIF-1αantisenseoligodeoxynucleotidesonHIF-1αandVEGFexpressioninhypoxicretinalendothelialcells1FUWen-qin，DENGAi-jun，DUWei，ZANGPing(TheThirte

4、enDivisionofHamiFarmRedStarHospital，XinjiangproductionandConstructionCorps，Hami839000，P．R．China)Abstract:ObjectiveToinvestigatethefeasibilityandmechanismofhypoxia-induciblefactors-1α(HIF-1α)antisenseoligodeoxynucleotides(ASODN)forthetherapyofretinalneov

5、asculation．MethodsBovinehypoxicretinalendothelialcell(BREC)wereculturedinvitroanddividedintotransfectiongroupandnon-transfectiongroup，thetransfectiongroupwastransfectedwithHIF-1αASODN，boththetwogroupsweregivenCoCl2-inducedhypoxictreatment．ExpressionofHI

6、F-1αwasmeasuredwithimmunofluorescencestaining，VEGFofBRECcellswasdetectedbyELISAassay．ResultsHIF-1αASODNwassuccessfullytransfectedintoBRECcells．TheexpressionofHIF-1αinnon-transfectiongroupwasverylowattheearlytimeofanoxia，increasedat1h，reachedpeakat4h，dec

7、reasedafter16h．TheexpressionofHIF-1αintransfectiongroupmaintainedatverylowlevelandshowedsignificantdifferencetothenon-transfectiongroup(P＜0．01)．Conclu-sionsThetransfectionofHIF-1αASODNcaneffectivelydown-regulatetheexpressionofHIF-1αandVEGF．Thethera-peut

8、icprospectofHIF-1αASODNonretinalneovasculationisworthyoffurtherinvestigation．Keywords:oligonucleotides，antisense;retinalneovasculation;vascularendothelialgrowthfactor缺氧诱导因子-1(HIF-1)是缺氧条件下广泛存重要靶点。2008～2009年，我们观察了HIF-1α反在于哺乳动物与人体内的