《不同浓度臭氧水对苹果轮纹菌的杀灭效果》

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1、不同浓度臭氧水对苹果轮纹菌的杀灭效果乔彩云，梁俊，李建科，张雅丽，于振，赵彦华，马丽红1(陕西师范大学食品212程与营养科学学院，陕西西安，710062)2(陕西华圣企业(集团)股份有限公司果业公司，陕西西安，710021)摘要以致使贮藏苹果腐败的主要真菌苹果轮纹菌为研究对象，通过离体和载体试验研究了不同浓度臭氧水处理对苹果轮纹病菌的杀灭效果。研究结果表明，离体试验中，不同浓度臭氧水对苹果轮纹病菌均有一定杀灭效果，其中浓度为1．2mg／L的臭氧水对苹果轮纹菌作用5min后的杀菌率可达80．96％；

2、载体试验中，浓度为1．2mg／L臭氧水处理可显著抑制该病菌在苹果果实上的发病率和病斑直径的扩展。关键词臭氧水，苹果轮纹菌，杀菌率，发病率苹果产业是我国的优势和特色农业产业，在国际采用向水中通入臭氧气体的方法获取臭氧水，为上具有明显优势⋯。为了全面与国际市场接轨并提提高其溶解性，在通气时臭氧气体需经砂芯漏斗来扩高出口效益，各果蔬加工企业不断以标准体系为支大气体与水问的比表面积。采用碘量法对臭氧水撑，构建新型技术性贸易壁垒。同时，对于新鲜果蔬的浓度进行测定，执行《中华人民共和国城镇建设行或其加工产品，

3、能否有效杀灭和控制致病菌是目前食业标准——臭氧发生器臭氧浓度、产量、电耗的测品安全的关注热点。臭氧具有广谱、高效的杀菌量》CJ／T3028．2—1994。作用，自身极易分解为氧气，因而作为一种理想的绿1．2．2菌悬液定量杀菌试验色强氧化剂被越来越多地应用于食品工业中。1．2．2．1试验菌种的活化及菌悬液的制备本实验以苹果贮藏期间致使其腐败的主要真菌(1)在无菌操作台中，取米粒大、带培养基的斜之一——苹果轮纹菌为研究对象，研究了不同浓度臭面培养物，放置于含马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养氧水对苹果轮纹

4、菌的离体杀灭效果。基的一次性培养皿中部，28~C恒温培养。待菌落布满1材料与方法整个平皿时，用接种环轻轻挑去菌丝，随后将平皿置于28℃恒温培养，同时进行12h黑光灯、12h黑暗的1．1主要材料与仪器交替照射。待平皿菌落上有白色黏稠物产生时，取该臭氧发生器：JG9060，陕西金阳电子科技有限公培养物备用。司，理论产量3．0g／h。(2)用30mL无菌生理盐水(浓度为0．8％)轻轻苹果轮纹菌：Botryosphaeriaberengriana，由西北推刮下白色黏稠物，并用无菌镊子将联带的凸起农林科技大

5、学植物保护学院提供。物挤压破碎，将刮洗液集中至含小玻璃珠的无菌三角中和剂：含0．5％硫代硫酸钠的磷酸盐缓冲液烧瓶中，漩涡混合仪上振荡30min，分散培养物，使其(PBS，0．03mol／L，pH7．2)。自溶断链，成为均匀的悬液。用无菌镜头纸4层，过牛血清白蛋白：纯度>98％，Amresco公司。滤除去菌丝，滤液即为孢子悬液，随后进行10倍稀马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)：马铃薯200释。g，葡萄糖20g，琼脂15～20g，自来水1000mL，自然1．2．2．2中和剂的考察试验pH。(1)依照卫

6、生部所颁发的2002年版《消毒技术1．2试验方法规范》中相关规定设计试验分组和操作程序进行，1．2．1臭氧水的制备及其浓度测定如表1所示。第一作者：硕士研究生(李建科为通讯作者)。(2)含有机干扰物质菌悬液的制备：吸取2．0mL陕西省农业科技攻关项目；校企横向合作课题。一定浓度试验菌悬液于无菌试管中，加入2．0mL收稿日期：2011—09—22，改回日期：2011—11—1013％的牛血清白蛋白溶液，置于20℃±1℃水浴环境中备用。中和剂为含0．5％硫代硫酸钠的磷酸盐缓2012年第38卷第3期(总

7、第291期185FOODANDFERMENFATlUDU5FKIE5冲液(PBS，0．03mol／L，pH7．2)。晾干后，用移液枪吸取适宜浓度的孢子菌悬液15L注入每孔。2h后将接种后的红富士苹果分别浸泡表1中和剂考察试验的试验分组及操作程序到浓度为1．2mg／L的臭氧水溶液中，并适当搅拌清组序操作程序洗5rain。取出果实晾干后，置于无菌陶瓷盘中，盘底第1组1．0mL菌悬液+4．0mL臭氧水溶液第2组(1．0mL菌悬液+4．0mL臭氧水溶液)+4．5mL中和剂垫一层湿纱布以保证水分的供给。将盛

8、有接种苹果第3组0．1mL菌悬液+4．5mL中和剂的搪瓷盘及时放人培养箱中，28℃恒温培养。阳性对第4组4．9mL(臭氧水溶液+中和剂)+0．1mL菌悬液照为300mg／L的次氯酸钠溶液，阴性对照为无菌蒸第5组0．1mL菌悬液+4．5mL生理盐水第6组1．0mL中和剂+1．0mL生理盐水+25mL培养基馏水。每个处理用果15个，试验重复3次。1．2．3．2发病率和病斑直径的统计1．2．2．3不同浓度臭氧水对苹果轮纹菌的杀灭效果当伤口周边出现0．1cm以上病斑时即可认为发取新鲜制备的