胸腺素α原在正常组织与肿瘤组织中的定位研究

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1、第54卷第4期厦门大学学报(自然科学版)Vo1．54NO．42015年7月JournalofXiamenUniversity(NaturalScience)Ju1．2Ol5胸腺素I】‘原在正常组织与肿瘤组织中的定位研究崔若辰，蔡报伟，苏劲红，胡鑫炎，孙雨涵，郭权，周克夫(厦门大学环境与生态学院，福建厦f136l102)摘要：检测并分析胸腺素原(prothymosin，ProT)在小鼠正常肝组织与肝肿瘤组织中表达、分布的情况．取2o只昆明雄性小鼠随机分为对照组和移植性肝癌模型组，每组1o只，模型组接种H。。肝癌组织，建立移植性肝癌模型．7d后将模型组肝癌组织和对照组正常肝的组织取出，部分组织按常

2、规石蜡包埋方法制片，免疫组织化学法分别检测肝癌组织与正常肝组织中ProTa的表达分布情况；部分组织按提取胞质蛋白的方法获得蛋白用于Western—blot分析．在Westernblot中，ProTa在肝癌组织细胞质的表达量明显低于正常肝组织；在免疫组织化学法中，正常肝组织的细胞核呈阴性，胞质呈强阳性；而在肝癌组织中胞核呈强阳性，胞质呈弱阳性．ProTa在正常组织与肿瘤组织中的表达分布有明显差异．由于在Western—blot中所提的蛋白主要为胞质蛋白，在癌变的组织中，ProTa主要集中在细胞核中，因此推测，当胞质中的ProTa大量表达时对于肝细胞稳定、抑制细胞发生癌变有重要功能，此结果为进一步

3、研究ProT在肿瘤发生和诊断中的作用提供了重要的理论依据．关键词：胸腺素a原；H细胞株；肝癌；定位中图分类号：R73文献标志码：A文章编号：0438—0479(2015)04—0474—04原发性肝癌(primaryhepaticcancer)简称肝癌，核转移到胞质和胞外，由于ProT不能在核内积聚而是肝脏的恶性肿瘤，也是世界十大恶性肿瘤之一[1]．削弱了其核内与增殖相关的功能，这种现象并不见于肝癌起病比较隐匿，早期症状不明显，中期甚至部分正常细胞；而且，胞核和胞质定位的ProT~衍生物对晚期患者症状仍不明显，一旦出现比较典型的症状，肿瘤坏死因子诱导的Hela细胞凋亡L6]均有抵抗作到医院就诊

4、已多属晚期，错过最佳治疗时期．根据最用，所以，研究ProTa在癌变过程中的定位有助于揭新统计]，全世界每年新发肝癌患者约78万，居恶性示细胞癌变的发生机理．目前国内外有关移植性肝癌肿瘤的第五位，因此，揭示肝肿瘤的癌变机理以及早和正常肝组织中ProTa水平和定位的研究还未见报期诊断是目前医学研究的热点．道．我们应用本课题组克隆表达的重组人ProTal7制胸腺素0：原(prothymosina，ProTa)是一种天然备了多克隆抗体]，采用Western—blot和免疫组织化无二级结构、强酸性小分子蛋白，其功能与细胞免疫学的方法对小鼠正常肝组织和肿瘤组织中的ProTa调节、细胞增殖l_3]、凋亡有着

5、密切关系．作为一种典型进行了分析，其结果将对研究ProTa在肿瘤发生和治的肿瘤相关蛋白，在细胞增殖和凋亡调控方面的深入疗中的作用以及肿瘤临床医学的诊断预测有重要价值．研究有助于发现细胞癌变的发生机理，曾在多种癌症中检测到了ProT~水平的升高；这种在癌细胞中高水平的ProTa蛋白产物不仅维持细胞处于高度增殖1材料与方法状态，还保护细胞避免进入凋亡途径．体外实验，在凋亡过程中，ProT~被caspase一3切割而发生断裂]，导1．1材料致核定位信号遭到破坏，进而使断裂的ProTa从细胞实验动物：SPF级昆明小鼠2O只，雄性，质量22收稿日期：201409—22录用日期：2Ol5一O211基金项目

6、：福建省自然科学基金(2013J01383)*通信作者：zhkefu@xmu．edu．cn引文格式：崔若辰，蔡报伟，苏劲红，等．胸腺素a原在正常组织与肿瘤组织中的定位研究[J]．厦门大学学报：自然科学版，2ol554(4)：474—477．Citation：CuiRuochen，CaiBaowei，SuJinhong，eta1．Studyonthelocalizationofprothymosindinnormalandtumortissues[J~JournalofXiamenUniversity：NaturalScience，2015，54(4)：474～477．(inChinese)ht

7、tp×}xleduCtl第4期崔若辰等：胸腺素“原在正常组织与肿瘤组织中的定位研究-30g，6-8周龄，购自厦门大学实验动物中心，置于化物酶)各10min并洗片后就可以进行染色；用新制温度20℃左右，湿度65左右的室内，以普通小鼠饲备好的DAB试剂进行显色，苏木精复染，梯度脱水及料喂养．透明后，用中性树脂进行封片．肝癌细胞株：小鼠H腹水型肝癌细胞株由厦门1．2．4HE染色法检测肝组织的形态结构大学