果蝇饲料玉米粉培养基配方的改进

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1、第27卷第5期唐山师范学院学报2005年9月Vol.27No.5JournalofTangshanTeachersCollegeSep.2005果蝇饲料玉米粉培养基配方的改进张会宜（河北理工大学化工与生物技术实验中心，河北唐山063000）摘要：在玉米粉培养基的基础上，适当改变其组成成分，使培养基增强了防霉能力，并可以得到肥大的果蝇三龄幼虫，适合唾液腺染色体观察。关键词：果蝇；培养基；发霉中图分类号：Q963文献标识码：A文章编号：1009-9115（2005）05-0046-03果蝇（fruitfly）是双翅目昆虫,在遗传学中广泛采用的是黑腹果蝇(Dr

2、osophilamelanogaster)。果蝇具有容易饲养、生活史短、繁殖率高、突变性状多且容易观察、唾液腺染色体大等特点，是遗传学实验的好材料。在普通高校的遗传学实验教学中，用果蝇来验证三大遗传规律，观察它的唾液腺染色体等。果蝇是以酵母菌为食的，凡是能发酵的基质，都可以用于饲养果蝇。果蝇很容易饲养，但培养过程中培养基易发霉。在实验过程中，选择合适的培养基很关键。在以往的遗传学实验教学中，采用的是按照刘祖洞、江绍慧编纂的《遗传学实验》中的配方配制的玉米粉培养基。我们发现，这种培养基容易发霉，给实验带来许多麻烦。由于实验时间长，一般要持续30d左右，在实

3、验过程中需要时常打开棉塞，倒取果蝇，受霉菌污染的机会是很多的。在整个实验过程中，所有的学生实验组都有不同程度的发霉现象，不严重的可用灼烧过的解剖针挑出霉菌斑，继续进行实验，其中有30%的实验组发霉严重，不得不更换培养基。经过摸索，我们在原来实验指导书中玉米粉培养基的基础上，增加和调整了部分成分，改变后的培养基有着明显的优点。1两种培养基成分比较和配制方法1.1普通玉米粉培养基——配方一蔗糖6.2g，玉米粉8.25g，酵母粉0.7g，琼脂0.62g，水76ml，丙酸0.5ml。1.2改进后的培养基——配方二蔗糖3g，红糖3g，玉米粉8g，酵母粉0.8g，琼

4、脂0.62g，脂肪1g，苯甲酸钠0.1g，水76ml，丙酸0.5ml。1.3配制方法（1）取38ml水，加入琼脂和糖，煮沸使充分溶解；（2）另取38ml水，加入玉米粉搅匀，加热调成糊状，如果是配方二，还要加入苯甲酸钠和脂肪；（3）将上述两者混合，煮沸；（4）待稍冷后加入酵母粉和丙酸，充分调匀，趁热将培养基装入培养瓶中，加盖纱布棉塞；（5）培养瓶和纱布棉塞要事先高压灭菌。1.4培养方法分成10个组，1~5组用配方一配制培养基，6~10组用配方二配制培养基，每组做正交和反交，正反交各用一个培养瓶,在每一个培养瓶中放6对果蝇。所用果蝇亲本是纯合体野生型和纯合体

5、残翅。正交：♀长翅×♂残翅反交：♀残翅×♂长翅F1代统计100只，F2统计从第一只成蝇出现后10d内孵化出的成蝇的表型。1.5配方二防霉性试验取10个培养瓶，编号，1~5号倒入配方一培养基，6~10倒入配方二培养基，培养瓶只是用自来水冲洗干净，没有做灭菌处理，在实验室暴露7d。2结果2.1F1和F2代正反交结果各组F1的表型全部是野生型的，即长翅，F2的情况如下表：──────────收稿日期：2005-03-22作者简介：张会宜（1969-），男，河北滦南人，河北理工大学化工与生物技术实验中心主管药师。-46-张会宜：果蝇饲料玉米粉培养基配方的改进表1

6、F2代正交结果组12345678910别表长残长残长残长残长残长残长残长残长残长残型翅翅翅翅翅翅翅翅翅翅翅翅翅翅翅翅翅翅翅翅数20163220712508324478264851807222381230852217124891量表2F2代反交结果组12345678910别表长残长残长残长残长残长残长残长残长残长残型翅翅翅翅翅翅翅翅翅翅翅翅翅翅翅翅翅翅翅翅数21169223712618624779254822037522982239862267123781量由实验结果看，配方二实验组对果蝇遗传的影响是不明显的，看不出和配方一的区别。2.2配方二防霉性试验结

7、果在实验过程中，用配方一的实验组都不同程度地出现过发霉现象，有三个培养瓶中的培养基发霉严重，不得不重新更换培养基，而用配方二的实验组都没有出现发霉现象。从实验结果来看，配方二和配方一相比防霉能力增强了。配方二防霉性试验结果见表3。表3配方二防霉性试验结果编号12345678910霉变++++++++++-----注：“+”表示发霉现象，+多表示发霉严重,表示没有发霉现象。以上实验结果说明配方二具有防发霉作用。在实验过程中，发现用配方二培养的果蝇幼虫，明显比配方一所培养的幼虫肥大，用肉眼判断，体积增大30%以上。选择配方二培养的三龄幼虫做唾液腺染色体观察，

8、和配方一培养的三龄幼虫相比，具有唾液腺容易剥离、脂肪容易剔除、染色体分散好等优点