Bradford法蛋白定量试剂盒

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1、北京雷根生物技术有限公司Bradford法蛋白定量试剂盒产品简介：目前世界上最常用的蛋白浓度检测方法是：BCA蛋白浓度测定试剂盒(BCAProteinAssayKit)和Bradford法蛋白定量试剂盒(BradfordProteinAssayKit)。Bradford法与传统方法相比，更简单、更稳定、兼容性更好。Bradford法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响。样品中β-巯基乙醇的浓度可高达1M，DTT的浓度可高达5mM。但受高浓度的去垢剂的影响，故在用BradfordProteinAssayKit进行蛋

2、白定量的时候，需确保SDS低于0.01%，TritonX-100低于0.05%，Tween20,60,80低于0.015%。含高浓度去污剂的蛋白定量，建议采用LeageneBCAProteinAssayKit。LeageneBradfordProteinAssayKit检测速度很快，少量样品一般只需10min即可完成检测。检测浓度下限达到25μg/ml，最小检测蛋白量达到0.5μg，待测样品体积为1～20μl。在50~1000μg/ml浓度范围内有较好的线性关系。产品组成：编号PT0002PT0002Storage名称50

3、0T1000T试剂(A):G250染色液100ml200ml4℃避光试剂(B):蛋白标准(BSA5mg/ml)1ml2ml-20℃使用说明书1份主要成分：试剂(A):主要由G250、缓冲液等组成。试剂(B):主要由牛血清白蛋白(BSA)、防腐剂等组成。自备材料：1、酶标仪或分光光度计2、微量移液器3、双蒸水4、96孔板操作步骤（仅供参考）：1、完全溶解蛋白标准(BSA5mg/ml)，按蛋白标准:稀释液=1:9进行稀释，如取蛋白标准北京雷根生物技术有限公司10μl稀释溶解于稀释液90μl，使终浓度为0.5mg/ml。注意，蛋

4、白样品在什么溶液中，蛋白标准也宜用什么溶液稀释。也可以用0.9%NaCl或PBS稀释蛋白标准(BSA5mg/ml)。2、将标准品按0,1,2,4,8,12,16,20μl加到96孔板的蛋白标准孔中，加蛋白标准稀释液补足到20μl。3、加适当体积样品到96孔板的样品孔中，补加标准品稀释液到20μl。4、各孔加入200μlG250染色液，室温放置3～5min。5、用酶标仪测定A595，或560~610nm之间的其它波长的吸光度。6、根据标准曲线计算出样品中的蛋白浓度。注意事项：1、G250染色液使用前充分混匀。2、G250染色

5、液回复至室温再使用，有利于提高检测的灵敏度。3、蛋白标准在全部溶解后先混匀，再稀释成一系列不同浓度的蛋白标准。4、待测蛋白溶解于什么样的稀释液中，蛋白标准也宜溶解于什么样的稀释液中，否者待测蛋白与蛋白标准中所含非蛋白成分不一致，有可能导致测定不准确。5、需可检测560~610nm之间波长的酶标仪一台，最佳检测波长为595nm，并需96孔板。6、建议每次测定时都做标准曲线。因为测定时颜色会随着时间的延长不断加深，并且显色反应的速度和温度有关，所以除非精确控制显色反应的时间和温度，否则如需精确测定宜每次都做标准曲线。7、如果没

6、有酶标仪，也可以使用普通的分光光度计测定，但测定时，考虑根据比色皿的最小检测体积。应按比例适当加大BCA工作液的用量使总体积不小于最小检测体积，样品和标准品的用量亦相应按比例放大。使用分光光度计测定蛋白浓度时，每个试剂盒可以测定的样品数量可能会显著减少。8、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。有效期：12个月有效。相关产品：产品编号产品名称PE0025SDS-PAGE蛋白加样缓冲液(5×)PE0081Tris-HCl缓冲液(1.5mol/L,pH8.8)PE0092Tris-甘氨酸电泳缓冲液(5×SDS-PA

7、GE)PE0103丙烯酰胺:亚甲基双丙烯酰胺溶液(30%Acr-Bis,29:1)北京雷根生物技术有限公司PI0011苯甲基磺酰氟溶液(PMSF,100mmol/L)PS0008通用细胞裂解液PS0009Western及IP细胞裂解液PT0001BCA法蛋白定量试剂盒PT0004双缩脲法蛋白定量试剂盒PT0013考马斯亮蓝快速染色液PW0084丽春红S染色储存液(10×PonceauS)