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1、透明质酸测定方法及其临床意义南昌铁路中心医院陆迪生综述,,透明质酸经加热分子内的糖醛酸与咔哩反应生,,,是一种线性分子的聚糖这种胺基多糖是结成红色复合物这一反应产生的颜色稳定,缔组织基质的主要成份由纤维母细胞合但测定的纷性范围为么一盯玩灵敏度,,,,成被特异的透明质酸酶降解最近的研究低不能用于测定血清内微量同时样,证明循环血液中的被肝脏迅速有效地品中的单糖寡糖及其它糖胺多糖,,,移去主要是由肝窦上皮细胞将其摄取并降也可产生颜色反应故特异性也不高只能。。用于定量纯品和关节液内的含量解,虽早在六十年代前就已发现由于为提高特异性等人从链霉菌中分离
2、,缺乏足够敏感特异的测定方法而限制了它的出一种对特异的降解酶使降解,,临床应用研究近十年左右随着各种测定方为不饱和的或一寡糖叮等利用,,法的不断涌现使含量测定达到精确的该酶特异地水解所形成的寡糖经过碘,、,程度并清楚地反映出类风湿性关节炎肝酸氧化再与硫巴比妥酸反应显色最后以正、,,病某些肿瘤和硬皮病患者样品内均明丁醇抽提在测定其吸光值建立了,。显增高尤其测定在肝硬化诊断上优于所特异性高的化学测定法但其灵敏度只,。有常规肝功试验肝硬化患者血清较正达林‘水平,。常人升高一倍曲等认为由于的低浓度存在和分子量差异的。,侧定可作为肝病严重程度的指标特
3、点一般生化方法难以准确定量而分、国内张世兰等报告在巨性肝病肝硬化子量大小的变化又被认为可能是某些肿瘤的皿。组增高幅度大于型前胶原肤和板层素标志因此采用测定既可了解分皿,在慢活肝组中增高大于子量的变化和分布又可进行定量随着,。,型前胶原肤在迁肝中则与对照组无差别仪器的普及和提高相信这一方法将会,。由此可见测定是一项极有价值的肝病成为常规实验室的一个项目,、诊断指标为此对其测定方法和临床意义作免疫分析方法。一简要综述沙等从牛鼻软骨中提取到一,种能被集聚的蛋白多糖此后又、一测定方法在此种蛋白多糖中分离出能特异识别的、。生化方法片段。孟最早测定的方
4、法是等介绍的至年利用一,,咔哇显色比色法在硼离子和浓硫酸介质中亲和层析从牛鼻软骨中分离出与高度特异结合的透明质酸结合蛋白年介绍用牛鼻软骨中提取,,一证明其含结合部份和连接的蛋白多糖为结合剂同时以一,、蛋白两部份后者的单休免疫家兔获得主要对单体硫酸,,二的。具有加强与结合蛋白间结合的软骨素和结合片段起反应的抗体建立。,,作用年等从人脑提取到一种了一种固相免疫方法反应系统中先以鱼精,以增加的,结合糖蛋白命名为连接素蛋白处理微板吸附包·,,。被再加抗反应一也有人从鼠脑中提取了类似于微板后加孵育,,,。小时洗涤后加抗兔酶结合物孵育物质,。尽管这些结
5、合蛋白以不同方法从不后洗涤加底物显色这一方法具较高特异,、、,,,同种属动物组织中提出其结构差异尚未完性操作简便快速作者还用单抗,,。全明了但它们的被发现以及它们与免疫学体代替多抗进行对比发现特异性相同,,方法的结合建立了许多特异敏感的检等以包被固相载体,。,测方法其检测限达以至水平加入样品与之结合洗涤后再加入生物素,,国外资料中免疫学检测方法较多标记的最后加亲和素酶结合物反应,,,,具实用的有放免和酶免疫方法二类尤以酶后与底物显色这种夹心法试剂制备简单,。可在六小时内完成测定操作批内为免疫方法为多,国内的年张鲁榕等在分子上偶联一易于推广但
6、不能结合小于,’艺‘,,一特定基因使能标记建立了个寡糖的故其测得正常人的含,,竟争性放免分析法目前按此方法由上海医量仅为一用此法测得的类风湿,,学研究所生产商品药盒使测定血清内关节炎患者血清中明显增高一,一,等用包被酶标板样品然后加成为可能是国内目前唯的一种测定,。入生物素化的人软骨再加入亲和素药盒其反应体系是先将样品和限,‘“一,,,量结合再加入竟争剩余一复合物最后加酶底物显色进行,,,,且省再加入第一抗休抗最后定量分析检测灵敏度可达水平,,,加入相应第二抗体以使复合物沉淀测定沉去了制备抗体的麻烦由于其检测灵。、,,,敏度高样品用量仅在高
7、度稀释后避淀的药盒可用二个月检测灵敏度达。‘测得的正常人血清含量为一免了样品中一些血清蛋白及天然抗体的,。,操作时间为小时可出结果原药盒可能干扰尽管国外报告的许多酶免疫方法,,,的不足之处是最大结合率在以内各标尚未商品化但从简便易行的优点看今后,。准管间落差小有时标准序列的斜率不够礴定会得到迅速开发和发展,意据陈金国等介绍药盒的非特异结合率偏、,,二临床应用高近年经海军医学研究所改进最大结合率,,血可达非特异结合率在左右液中的主要靠肝窦上皮摄取后降,,但受同位素半衰期和标记物脱碘的影响使解清除而糖胺类聚糖又与肝纤维化有联,,。用期较短且受检
8、测仪器限制不可能普遍系。,,测定反应了肝脏内皮细胞的功能,开展这一侧定因此开发酶免疫药盒是。已被许多研究证实对慢性肝病的诊断是优于进一步推广这一项测定使之常规化的关键、。酶免疫试
