去甲二氢愈创木酸对活体血管生成作用的实验研究

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1、第23卷第3期第 三 军 医 大 学 学 报Vol.23,No.32762001年3月ACTAACADEMIAEMEDICINAEMILITARISTERTIAEMar.2001论著文章编号:100025404(2001)0320276204去甲二氢愈创木酸对活体血管生成作用的实验研究111123112孙慧勤,陈意生,史景泉,卞修武,邹仲敏,傅晓岚,章 容(第三军医大学:附属西南医院病理学研究所;预防3医学系防原医学教研室、全军复合伤研究所;高原军事医学系中心实验室;重庆400038)  提 要:目的 观察去甲二氢愈创木酸(NDGA)对在体血管生成的影响。方法 采

2、用鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)试验,检测NDGA-6-6对血管生成的影响。结果 2.5×10mmol以上量的NDGA均对血管生成有抑制作用,在实验剂量(0.5~50)×10mmol范围内,随给药量的增加,其抑制作用愈加明显。采用Bouin’s液原位固定后取膜、DAB染色、普通显微镜下观察或用图像分析方法可使结果更具可信性与可比性。结论 NDGA可抑制血管生成,对肿瘤及其它病理情况下的抗血管生成治疗可能具有重要的应用价值。  关键词:血管生成;去甲二氢愈创木酸;鸡胚绒毛尿囊膜;形态学  中图法分类号:R322.12;R977.3文献标识码:AEffectsofnordi

3、hydroguaiareticacidonangiogenesisinvivoSUNHui2qin,CHENYi2sheng,SHIJing2quan,BIANXiu2wu,ZOUZhong2min,FUXiao2lan,ZHANGRong(ResearchInstituteofPathology,South2westHospital,ThirdMilitaryMedicalUniversity,Chongqing400038,China)Abstract:ObjectiveToinvestigatetheeffectofnordihydroguaiaretica

4、cid(NDGA)onangiogenesis.MethodsThechickenchorioallantoicmembrane(CAM)assarywasusedtodetecttheeffectofNDGAonangiogenesis.ResultsNDGAinhibitedbloodvesselformationinchicken-6chorioallantoicmembrane,withthelowesteffectivedoseof2.5×10mmol.ThisinhibitoryeffectwasproportionaltothedoseofNDGA.

5、Themodi2fiedCAMassay,suchasfixingCAMsinsituwithBouin’ssolution,stainingsampleswithDAB,andbeingquantifiedbyimageanalysis,couldmaketheresultsmoreconvincible.ConclusionOurstudyfindprimarilythatNDGA,aninhibitoroftumorcellgrowth,caneffectivelyinhibittheangio2genesisofCAM,whichimpliesitsapp

6、licationinthetreatmentoftumororangiogenesisinotherpathologicalconditions.Keywords:angiogenesis;nordihydroguaiareticacid(NDGA);chorioallantoicmembrane(CAM);morphology  近年发现去甲二氢愈创木酸(Nordihydroguaiaretic1 材料与方法acid,NDGA)具有多种生物学功能,其中以抑制多种肿瘤的发生和发展作用尤为引人关注[1,2],但具体作用1.1 测试物载体的制备[4]机制不清。本室在既

7、往的研究中发现NDGA对人恶性  参照姜志钢等的方法进行。0.5%甲基纤维素(Sigama产[3]品)以无菌蒸馏水配制,9磅、10min高压灭菌后,混匀,将10μl胶质瘤不但具有显著的抑制生长和诱导分化作用,的上述液体分1、2次加入模板内烘干,无菌针头挑出备用。而且亦能减低移植瘤和实验性胶质瘤的微血管密度,1.2 种蛋孵育及观察提示该药可能对胶质瘤的血管生成有影响;我们最近  新鲜种蛋购自重庆种鸡养殖厂,以湿纱布擦干净其表面,的研究发现NDGA在体外能有效抑制内皮细胞增殖、置于37℃、60%相对湿度的孵箱内培养,每日翻动2次。孵育生长以及胶质瘤诱导的迁移、成型等抗

8、血管生成作

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