产低温碱性脂肪酶菌株Acinetobacter johnsonii LP28的鉴定及发酵条件优化

《产低温碱性脂肪酶菌株Acinetobacter johnsonii LP28的鉴定及发酵条件优化》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、第24卷第6期天津科技大学学报Vbl_24NO．62009年l2月JournalofTianjinUniversityofScience＆TechnologyDec．2009产低温碱性脂肪酶菌株AcinetobacterjohnsoniiLP28的鉴定及发酵条件优化戚薇，邵静，王晨，王海宽(工业微生物教育部重点实验室，天津科技大学生物工程学院，天津300457)摘要：从实验室保藏的49株碱性脂肪酶产生菌中筛选出产低温碱性脂肪酶菌株LP28，初步酶学性质研究表明，该脂肪酶的最适作用温度为3O℃，最适作用pH为9．0，粗酶液在

2、室温条件下处理48h仍具有93．78％的残余酶活．该菌经16SrDNA鉴定为约氏不动杆菌cinetobacter]ohnsonii)，同源性为99％．摇瓶实验表明，该菌株最适产酶培养基为(g／L)：淀粉1O，牛肉膏20，K2HPO4l，PvA一大豆油20．最高酶活为3．06U／mL．关键词：约氏不动杆菌；低温碱性脂肪酶；优化中图分类号：Q933文献标志码：A文章编号：1672．6510(2009)06．0009—04IdentificationandOptimizationofFermentationConditionso

3、fAcinetobacterjohnsoniiLP28ProducingCold—AdaptedandAlkalineLipaseQIWei，SHAOJing，WANGChen，WANGHai—kuan(KeyLaboratoryofIndustrialMicrobiology，MinistryofEducation，CollegeofBiotechnology，TianjinUniversityofScience&Technology，Tianjin300457，China)Abstract：StrainLP28wass

4、electedfromthe49alkalinelipaseproducingstrainspreservedinlaboratory．Thecharacteriza-tionofthecrudeenzymeexhibitedmaximumactivityat30℃andpH9．0andretained93．78％ofitsmaximumactivityafterremaining48hattheroomtemperature．ThestrainwasidentifiedasAcinetobacterjohnsoniiby

5、16SrDNAassayandshowed99％homology．Theoptimalmediumforlipaseproductionwasdeterminedasfollow(g／L)：starch10，beefextract20，K2HPO41，PVA．beanoil20．Thealkalinelipaseactivityreachedmaximallevelof3．06U／mL．Keywords：Acinetobacterjohnsonii；cold—adaptedandalkalinelipase；optimiz

6、ation肪酶是能够催化长链脂肪酸甘油酯水解和合研究们，但是性质稳定的较少，且对约氏不动杆菌产戌的羧酸酯酶IJJ，是当代酶工业最受瞩目的酶种之脂肪酶的研究并未报道．本文从实验室保藏的49株【2J一．脂肪酶广泛存在于许多动植物及微生物中，已碱性脂肪酶产生菌中筛选获得1株稳定性良好的低有多种微生物脂肪酶实现商业化生产，主要应用于洗温碱性脂肪酶产生菌．此外，对该菌所产生的碱性脂涤、油脂水解、废水处理、食品加工及化妆品等工业．肪酶进行了初步酶学性质研究和发酵条件的优化．不动杆菌产生的脂肪酶具有对酯类的转酯性、水解性、对应选择性J和

7、对溶剂的耐受性等特点，且有1材料与方法低温活性报道【q曲J，因此在洗涤、制药、食品、脂类加工、毛纺和低温环境修复等工业上有着巨大的应用潜1．1菌种来源力．近年来，不动杆菌产碱性脂肪酶在国内外虽已有本实验室从渤海湾盐碱地被油污染的土样中收稿臼期：2009—06—10；修回日期：2009—09—18基金项目：天津市自然科学基金资助项目(09JCZDJC17800)作者简介：戚薇(1963一)，女，天津人，教授；通信作者：王海宽，副教授，haikuanwangcn@yahoo．com．cn．·l0·天津科技大学学报第24卷第。6

8、期筛选产碱性脂肪酶的菌株，由天津科技大学微生物菌交由上海桑尼生物技术有限公司进行测序种保藏管理中心保藏．1．2试剂与培养基2结果与讨论1．2．1试剂聚乙烯醇一油脂乳化液：取20g聚乙烯醇，加蒸2．1菌株筛选馏水约800mL，加热至溶，冷却后定容至1000mL将保藏的49株碱性脂肪酶产生菌进行活化，在配成