糖尿病慢性难愈合创面大鼠模型的制备

糖尿病慢性难愈合创面大鼠模型的制备

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1、上海实验动物科学17(4):217~219,1997*糖尿病慢性难愈合创面大鼠模型的制备付小兵王亚平孙同柱杨银辉(中国人民解放军第304医院,北京100037)摘要为建立糖尿病状态下慢性难愈合创面动物模型,在实验性糖尿病大鼠背部人工造成2圆形无菌创面(2.54cm),并观察创面愈合过程。结果,伤后第7天糖尿病大鼠创面仅愈合40%,而对照组动物已愈合70%。伤后第14天后者已完全愈合,而糖尿病大鼠仍有约20.4cm的残余创面,直到伤后第30天仍有少数动物的创面未完全愈合。病理学切片证实糖尿病大鼠的创面呈典型的糖尿病皮

2、肤溃疡的组织学表现。关键词糖尿病慢性溃疡大鼠愈合为研究慢性难愈合创面发生机制,作者在巴比妥钠(25mg/kg)腹腔推注麻醉后,背部剃糖尿病大鼠体表复制了“糖尿病慢性难愈合创毛,常规消毒。在无菌条件下用特制打孔器在鼠面”,其愈合过程和组织病理学改变与临床糖尿背中部脊柱两侧各打一圆孔,深至皮下,直径病溃疡相似,可用于慢性难愈合创面发生机制1.8cm,创面面积为2.54cm2。止血后以无菌纱[1,2]与治疗的研究布包扎,单笼喂养,定量饮水与喂食。所有实验均在清洁级动物实验室完成。材料和方法3.观测指标每日测定2组动物的食

3、量、[3]饮水量、体重以及尿糖变化,每周测血糖1次1.糖尿病模型复制3月龄雄性普通级(对照组大鼠伤后尿糖始终为阴性,不再监测血Wistar大鼠,体重200~250g,购自军事医学科学院实验动物中心。实验前12h禁食,定量糖)。采用补充注射四氧嘧啶或胰岛素(2u/只)饮水。实验当日称体重,尾静脉采血和收集尿方式维持糖尿病动物血糖在11~16.5mmol/L液,用血糖仪和试纸法分别测定基础血糖与尿之间。糖,然后,给实验组(24只)按150mg/kg体重隔天观察创面变化,并用透明膜描记和照腹腔注射3%四氧嘧啶,对照组(1

4、1只)不注射像法记录创面大小,部分动物创面采用计算机四氧嘧啶。1周后当动物血糖浓度大于11图象分析系统进行处理、校定,以计算创面愈合mmol/L以及尿糖为++++(>20g/L)时,可速度与质量。待创面细菌采样并用酒精消毒后,认为糖尿病模型复制成功。用无菌纱布包扎。创伤后7、14与30d每组处2.创面模型制作取上述人工复制的糖死3只动物,取创面组织进行病理学检查。尿病大鼠17只和对照组大鼠11只,以3%戊4.统计学处理用SDAS统计软件,以t*国家杰出青年基金资助项目(39525024)检验分析组间数据的差异。—2

5、17—表1糖尿病大鼠背部创伤后的血糖变化结果时间/d血糖/mmol·L-1正常2.17±0.21(17)伤前10.93±2.03(17)1.大鼠糖尿病的维持状况实验组24只伤后513.26±4.05(17)大鼠中有6只因高血糖死于伤后第3天,另有811.29±5.89(14)1只在实验期间血糖始终低于11mmol/L被1211.18±6.07(14)剔除。其余17只出现食量增加、饮水与尿量增1415.57±6.34(11)多以及体重下降等典型的糖尿病体征,平均血2.创面变化糖尿病大鼠创面潮湿,呈暗糖值维持在11mm

6、ol/L以上(表1),尿糖为红色,有少许分泌物;形状多为椭圆形,创缘凹++++,已形成糖尿病,模型成功率为71%。非陷,皮肤收缩不明显。随着伤后时间延长,糖尿糖尿病动物伤后体重有所增加,饮食饮水量与病大鼠创面面积略有缩小,但其愈合50%创面伤前相比无明显变化,尿糖阴性。根据预试验中时间约在伤后第9天,至伤后第30天,仍有3血糖测定结果及尿糖与血糖的关系可推知其血只动物有约0.3cm2的残余创面(表2)。糖正常。表2糖尿病大鼠创面愈合情况糖尿病组对照组伤后时间/d动物数/只创面面积/cm2动物数/只创面面积/cm20

7、172.54±0.00112.54±0.003172.44±0.48*111.96±0.525172.17±0.45*111.75±0.527171.47±0.50**110.77±0.329141.11±0.52**80.54±0.2311140.91±0.8980.35±0.1913140.55±0.5280.17±0.0515110.37±0.41--3030.30±0.10--***P<0.05,P<0.01,与对照组相比对照组动物创面干燥、红润,分泌物少;创细胞变性、肿胀,但未见小动脉壁增厚及玻璃样缘形状

8、不规则,收缩明显;创面细菌种类和菌量变等变化(第228页,图1)。对照组大鼠创面有与糖尿病大鼠创面比较,无显著性差异(表3,P轻微炎症反应,肉芽组织中成纤维细胞和胶原>0.05)。愈合50%创面的时间为5d,较糖尿丰富。病组明显缩短(P<0.05)。至伤后第14天,该组创面已完全愈合,无残余创面。讨论表3两组大鼠伤后不同时间创面细菌学检查组别伤后3d伤后7d

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