生化试验论文

《生化试验论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、苹果渣中多酚物质的福林法测定曹建杰10级生物技术1班摘要：以没食子酸为标准品测定苹果渣中多酚物质的总量。结果表明，当福林试剂与10%Na2co3体积之比1:1反应温度25℃，反应时间120min时，多酚含量在5-30ug范围内与吸光值呈良好的线性关系。引言：以没食子酸为标准品测定苹果渣中多酚物质的总量，该方法操作简单、测定误差小、灵敏度高，并且能在更为广阔的范围内应用，为苹果多酚制品的开发利用提供有效的测试手段。关键词：苹果渣多酚福林1取材与处理方法1.1材料与仪器苹果渣自备；没食子酸标准溶液准确称取没食子酸0.1000g溶解于70%的乙醇中并定容至100m

2、L,再用70%的乙醇稀释至10倍，即得浓度为100ug/mL的标准溶液，先用现配；Folin-Ciocalteu试剂在1L磨口回流蒸馏器中加入100g钨酸钠、25g钼酸钠、700mL蒸馏水、50mL85%磷酸、100mL37%盐酸HCD冷凝回流10h，然后添加150g硫酸锂和数滴溴液，取下冷凝管，重新加热至沸，维持15min，驱去多余溴，冷却后补足蒸馏水至1000mL，用棕色试剂瓶装好，置于冰箱中备用，临拥是稀释3倍；10%Na2co3溶液取10.0gNa2co3用水溶解，定容至100mL。1.2试验方法1.2.1按下表1标准曲线的制作表11234567没食

3、酸(100ug/mL)00.050.100.150.200.250.30蒸馏水(mL)21.951.901.851.801.751.70福林试剂(mL)1.01.01.01.01.01．01.0充分震荡后静置3-4分钟Na2co3溶液（mL）1.01.01.01.01.01.01.0摇匀置于25℃温水浴中反应2小时O.D76500.1960.3470.6280.8170.9171.149以吸光含量对吸光度进行直线回归，得回归方程Y=0.0383X+0.0127，线性关系r=0.9846，标准曲线见下图1图1标准曲线1.2.2原料的处理准确称取苹果渣8.000

4、g于锥形瓶中，加入80mL70%的乙醇，在80℃的水浴中热回流提取1次，每次2h，4000r/min离心20min，收集上清液，用70%的乙醇定容至50mL待测。1.2.3测定原理与方法多酚类化合物分子上有极易氧化的羟基，在碱性条件下与Folin-Ciocalteu试剂反应后呈现蓝色，次反应在765nm处有最大吸收，一定条件下遵从朗伯比尔定律，以没食子酸为基准物质可测定苹果多酚的总量。根据该原理从上述50mL待测液中吸取溶液30uL，测定吸光度，又回归方程可求得30uL待测液中多酚的含量，再进一步计算1g样品中酚类物质的含量。1.2.4结果计算样品中多酚物质

5、含量（以没食子酸计,mg/g）=(a1·v1)/(v2·w)a1为样液中多酚的含量（ug），v1为样液的体积（mL）v2，为测定去样液的体积（uL），w为称样量（g）2结果与分析2.1数据处理经测定样品的吸光度为0.267，代入回归方程y=0.0383x+0.0127得：x=6.641ug样品中多酚物质含量（mg/g）=(0.006641mg×50mL)/(0.03mL×8000mg)=0.0014mg/g2.2结果分析该实验值与实际值之间存在一定的误差，主要是由于没有浓缩的缘故，其次还有反应显色时间和反应温度对实验有一定的影响。3结论采用福林法测定苹果渣中

6、多酚物质的含量时，以没食子酸作为标准品，多酚含量在5-30微克范围内与吸光值成良好的线性关系。并且该方法具有操作简单、灵敏度高等优点。参考文献:【1】.王文杰.高锰酸钾滴定法测定茶多酚有关用剂的特性研究[J].福建茶叶，2002（1）：15-17.【2】.郭娟，艾志录，催建涛，王育红.苹果渣中多酚物质的福林法测定，2006年第02期178-180.【3】.廖晓玲，王会玲，徐凯明等.茶多酚提取及含量的测定方法的研究[J].中国油脂,2OO2,27(1):68-69.