转录基本知识(NXPowerLite)

《转录基本知识(NXPowerLite)》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、第三章转录基本知识RNA的生物合成RNABiosynthesis,Transcription遗传信息传递的中心法则蛋白质翻译转录逆转录复制复制DNARNA生物的遗传信息以密码的形式储存在DNA分子上。细胞分裂过程中，DNA复制把亲代细胞所含的遗传信息忠实地传递给子细胞。子代细胞的生长发育过程中，这些遗传信息通过转录传递给RNA，再由RNA通过翻译转变成相应的蛋白质多肽链上的氨基酸排列顺序，由蛋白质执行各种各样的生物学功能，使后代表现出与亲代相似的遗传特征。一些RNA病毒能以自己的RNA为模板A为合成DNA，称为逆转录这是中心法则的补充。RNA生物合

2、成主要内容一，RNA基本性质1，RNA化学结构2，RNA分子结构3，RNA种类及功能二，转录的分子事件1，转录概念2，转录基本特点3，转录发生过程（原核生物真核生物差异）：（1）转录的酶与蛋白因子（2）转录启动区域：启动子（3）转录的起始，延伸及结束4，真核转录后加工三：RNA降解四：RNA转录应用1，RNA化学结构RNA/DNAStructureRNA含有四种基本碱基，即腺嘌呤、鸟嘌呤、胞嘧啶和尿嘧啶。此外还有几十种稀有碱基。2RNA的分子结构RNA的一级结构主要是由AMP、GMP、CMP和UMP四种核糖核苷酸通过3‘，5’磷酸二酯键相连而成的多

3、聚核苷酸链。天然RNA的二级结构，一般并不像DNA那样都是双螺旋结构，只有在许多区段可发生自身回折，使部分A-U、G-C碱基配对，从而形成短的不规则的螺旋区。不配对的碱基区膨出形成环，被排斥在双螺旋之外。RNA中双螺旋结构的稳定因素，也主要是碱基的堆砌力，其次才是氢键。每一段双螺旋区至少需要4～6对碱基对才能保持稳定。在不同的RNA中，双螺旋区所占比例不同。构。3,RNA种类及功能RNA按功能不同分为三类，即信使RNA(mRNA)、转运RNA(tRNA)及核蛋白体RNA(rRNA)。在大多数细胞中RNA的含量比DNA多5～8倍。RNA理化特点RNA

4、与DNA最重要的区别一是RNA只有一条链，二是它的碱基组成与DNA的不同，RNA没有碱基T（胸腺嘧啶），而有碱基U（尿嘧啶）。所以导致他们有以下性质上的不同。1.两性解离：DNA无，只有酸解离，碱基被屏蔽（在分子内部形成了H键）。RNA有，有PI。2.粘度大：DNA;RNA，粘度由分子长度/直径决定，DNA为线状分子，RNA为线团。3.碱的作用：DNA耐碱RNA易被碱水解。4.显色反应：鉴别DNA和RNA+浓HClRNA------→绿色化合物DNA------→蓝紫色化合物苔黑酚二苯胺啡啶溴红（荧光染料）和溴嘧啶都可对DNA染色，原理是卡在分

5、子中，DNA的离心和电泳显色可用它们。5.溶解性：都溶于水而不溶于乙醇，因此，常用乙醇来沉淀溶液中的DNA和RNA。DNA溶于苯酚而RNA不溶，故可用苯酚来沉淀RNA。6.紫外吸收：核酸的λm＝260nm，碱基展开程度越大，紫外吸收就越厉害。当A＝1时，DNA：50ug/ml，RNA和单链DNA：40ug/ml，寡核苷酸：20ug/ml。用A260/A280还可来表示核酸的纯度。8.电泳：核苷酸、核酸均可以进行电泳，泳动速度主要由分子大小来决定，因此，电泳是测定核酸分子量的好方法。紫外分光光度计A260/A280和A260/A230的含义A260n

6、m是核酸最高吸收峰的吸收波长，最佳测量值的范围为0.1至1.0。A280nm是蛋白和酚类物质最高吸收峰的吸收波长，比值可进行核酸样品纯度评估：纯DNA的A260/A280比值为1.8，纯RNA为2.0。如果比值低，表示受到蛋白（芳香族）或酚类物质的污染，需要纯化样品。比值=1.5相当于50％蛋白质/DNA溶液A230nm，是碳水化合物最高吸收峰的吸收波长，比值可进行核酸样品纯度评估：纯DNA和RNA的A260/A230比值为2.5。若比值小于2.0标明样品被碳水化合物（糖类）、盐类或有机溶剂污染，需要纯化样品。A260/A280和A260/A230

7、：是核酸纯度的指示值，纯度好的DNA，在pH7-8.5下其比值应该在2.0或2.5，A260/A280的比值，用于评估样品的纯度，因为蛋白的吸收峰是280nm。纯净的样品比值大于1.8（DNA）或者2.0（RNA）。如果比值低于1.8或者2.0，表示存在蛋白质或者酚类物质的影响。A230是多肽、芳香基团、苯酚和一些碳氢化合物的吸光度，A230表示样品中存在一些污染物，如碳水化合物、多肽、苯酚等，较纯净的核酸A260/A230的比值大于2.0。在RNA聚合酶的催化下，以一段DNA链为模板合成RNA，从而将DNA所携带的遗传信息传递给RNA的过程称为转

8、录（transcription）。经转录生成的RNA有多种，主要的是rRNA，tRNA，mRNA，snRNA(smalln