动物细胞融合和单克隆抗体

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1、2.2动物细胞工程动物细胞工程常用的技术手段有：动物细胞培养动物细胞核移植动物细胞融合生产单克隆抗体2.2.2（1）动物细胞融合动物细胞融合荧光标记的鼠细胞和人细胞融合示意图杂种植株融合的原生质体AB再生出细胞壁脱分化愈伤组织再分化植物细胞的融合植物组织培养植物细胞A原生质体B原生质体A杂种细胞AB去壁去壁人工诱导方法？促进融合的方法？融合完成的标志植物细胞B植物体细胞杂交动物细胞融合动物融合的过程请同学们阅读课本P52动物融合用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程细胞核病毒颗粒细胞核不同DNA的两个细胞灭活病毒诱导细胞融合融合后的细胞进行有丝分裂1、动物细胞

2、融合过程1、植物体细胞杂交时首先应用什么方法去掉细胞壁？酶解法，如纤维素酶或果胶酶2、动物细胞融合时需要进行去壁处理吗？为什么？无需，因为动物细胞无细胞壁3、植物体细胞杂交诱导原生质体融合常用的方法有哪些？离心、电激等物理方法；PEG等化学方法问题讨论动物细胞融合4、动物细胞融合能利用上述两类方法吗？还有其他方法吗？能还可以利用灭活的病毒进行诱导5、植物体细胞杂交过程应先进行原生质体融合再进行组织培养形成完整的个体，动物细胞融合后能形成杂种动物个体吗？不能问题讨论动物细胞融合问题讨论动物细胞融合7、你能归纳出什么叫做动物细胞融合吗？6、为什么要用灭活的病

3、毒？病毒一般对生物体是有伤害的。仙台病毒紫外线丧失感染活性保留融合活性动物细胞融合的概念动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞形成一个细胞的过程动物细胞融合融合后形成的单核细胞称为杂交细胞有何同？不同？动物细胞融合动物细胞融合主要用于制备单克隆抗体获得杂种植株物理、化学方法（同左）灭活的病毒物理（离心、振荡、电刺激）化学（聚乙二醇）使细胞分散后诱导细胞融合去除细胞壁后诱导原生质体融合细胞膜的流动性细胞膜的流动性、植物细胞全能性用途诱导方法细胞融合的方法细胞融合的原理动物细胞融合植物体细胞杂交比较项目植物、动物细胞融合的比较动物细胞融合8、你推测

4、一下动物细胞融合有哪些方面的应用吗？利用动物细胞融合技术诱导形成杂交瘤细胞9、在生产实际中杂交瘤细胞有怎样的应用？生产单克隆抗体动物细胞融合问题讨论2.2.2（2）单克隆抗体单克隆抗体什么是单克隆抗体单：克隆：抗体：单个细胞？无性繁殖抗原————抗体特异性结合抗体是由何种细胞产生的？2.抗体是如何产生的？？单克隆抗体抗原动物体内刺激浆细胞抗体抗体不纯筛选单一浆细胞不能增殖产生大量抗体产量少、纯度低、特异性差单克隆抗体3、传统制备抗体的缺点是？3、传统制备抗体的方法是？如何获得化学性质单一、特异性强的抗体？单克隆抗体问题讨论提示：1.什么样的细胞可以产生抗

5、体？2.什么样的细胞可以无限增殖？瘤细胞和癌细胞有何区别？共同点：两者都有无限增殖的能力不同点：瘤细胞不能转移设计方案：一个B淋巴细胞－－只分泌一种特异性抗体小鼠骨髓瘤细胞－－能无限增殖杂种细胞单克隆抗体单克隆抗体制备过程注射抗原B淋巴细胞骨髓瘤细胞细胞融合、筛选杂交瘤细胞细胞培养筛选，继续培养足够数量的、能产生特定抗体的细胞群体外培养注射到小鼠腹腔单克隆抗体（选择性培养基）选择性培养基：使亲本细胞不能存活而杂种细胞可存活单克隆抗体诱导其融合的方法有哪些？单克隆抗体制备过程单克隆抗体BBBB瘤瘤瘤瘤细胞融合后培养液中有几种细胞？筛选杂种细胞单克隆抗体思考

6、：（选择性培养基）单克隆抗体思考：1.小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合？2.制备过程中应用哪些细胞工程技术手段？细胞的同源性越近，融合形成的杂种细胞越易成活细胞融合技术、细胞培养技术单克隆抗体①在基础理论研究中具有重要意义②在疾病诊断、治疗和预防方面，具有特异性高、灵敏度高等优越性。③生物导弹（作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹”治疗肿瘤）单克隆抗体的应用小结两个过程动物细胞培养过程单克隆抗体制备过程三个“一”一个诱导细胞融合的新方法——灭活病毒一个新细胞——杂交瘤细胞一个优势——单克隆抗体特异性强、灵敏度高的优势单克隆抗体下图为某同学根据杂交瘤技术的

7、方法，设计的生产破伤风杆菌的实验方案2、该方案能达到预期效果吗？为什么？4、图中B为________过程，常用_________作为诱导剂，该细胞继承___________的遗传特性，既能__________,又能___________。1、该实验方案的目的是__________3、A是从小鼠的脾脏中取得_______,该细胞能够产生______5、C过程指细胞培养，该过程包括_____培养和_____培养两个阶段。制备单克隆抗体B细胞抗体细胞融合灭活病毒双亲细胞分泌抗体无限增殖原代传代B体外培养骨髓瘤细胞杂交瘤细胞足够数量的细胞群注射到小鼠腹腔AC1.

8、动物细胞工程技术的基础是：（　　　　）A．动物细胞融合B．胚胎移植C．动物细胞培