动物细胞融合和单克隆抗体课件

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1、人细胞小鼠细胞红色荧光燃料标记的膜蛋白绿色荧光燃料标记的膜蛋白杂交细胞细胞融合动物细胞融合实验证明：细胞膜具有流动性若A、B为植物细胞，在细胞融合之前用处理，除去了；由A、B到细胞C的过程中，常用的物理方法是，化学方法是，融合完成的标志是。还要应用.技术把D培养成植株，此过程常添加的植物激素有.纤维素酶和果胶酶细胞壁离心、电激、振动产生新的细胞壁植物组织培养用聚乙二醇诱导生长素、细胞分裂素1、概念：两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。原理：结果：细胞膜的流动性获得杂交细胞诱导方式物理法：化学法：生物法：灭

2、活的病毒(与植物细胞杂交不同点)离心、振动、电激；聚乙二醇；2、诱导融合的方法：一、动物细胞融合为什么灭活的病毒能作诱导剂？灭活丧失感染性保留融合活性【配对练习1】(2012年佛山联考)动植物细胞融合过程的最重要的区别是()A．细胞融合过程B．人工诱导细胞融合的方法C．植物细胞必须先用酶除去细胞壁D．电融合技术【答案】C２、在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是（　　）A．结果是相同的B．杂种细胞的形成过程基本相同C．操作过程中酶的作用相同D．诱导融合的手段相同Ｂ动物细胞融合有什么意义和应用？总结：比

3、较植物体细胞杂交和动物细胞融合比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合原理融合前处理诱导方法用途细胞膜的流动性、植物细胞的全能性细胞膜的流动性用纤维素酶、果胶酶去壁用胰蛋白酶使细胞分散物理、化学方法物理、化学、生物方法获得部分或完整植株主要用于制备单克隆抗体3．如图为人体体液免疫过程的示意图，关于此图的叙述正确的是A．能产生抗体的是细胞③B．通过过程V产生的“某物质”是淋巴因子C．细胞①③分别为吞噬细胞和T细胞，均能特异性识别抗原D．当同一种抗原再次进入机体时，细胞⑤会迅速增殖、分化D吞噬细胞T细胞B细胞记忆细胞浆细

4、胞抗体1.抗体由什么细胞产生？其化学本质是什么？主要分布在哪里？抗体２.一个Ｂ淋巴细胞(浆细胞)能分泌多种抗体吗？３.简述获得抗体的传统途径？４.这种方法获得的抗体有什么缺陷？长期以来，为了获得抗体，采用的是把某种抗原反复注射到动物体内，然后从动物血清中分离出所需抗体的方法。用这种方法获得的抗体，不仅产量低，而且抗体的特异性差，反应不够灵敏，纯度低。人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的B细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每个B细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体，

5、必须用单个B细胞进行无性繁殖，即克隆。提示1：仅用细胞培养技术可行吗？提示2：我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的？提示3：有什么方法能使B细胞产生抗体的能力和肿瘤细胞无限增殖能力同时具备呢？问题：如何大量生产同一种抗体？一个B淋巴细胞——只分泌一种特异性抗体小鼠骨髓瘤细胞——能无限增殖杂交瘤细胞既能分泌一种特异性抗体又能无限增殖1975年英国科学家米尔斯坦和柯勒设想：二、单克隆抗体的制备自学与思考：1）在从小鼠体内取B淋巴细胞前应对小鼠作何种处理？为什么要这样处理？2）从小鼠何处获取B淋巴细胞？3）如只考虑两两

6、融合，会出现哪些融合类型细胞？4）是否所有杂交瘤细胞都能产生某一特定抗体？5）由特定的B淋巴细胞和小鼠骨髓瘤细胞融合成的杂交瘤细胞具有什么特点？6）最后可以通过哪些途径大量获取抗体？注射抗原效应B细胞骨髓瘤细胞融合多种杂交细胞选择性培养基筛选1单克隆抗体继续培养筛选2（筛选出杂交瘤细胞）足够数量的、能产生特定抗体的杂交瘤细胞克隆化注射抗原效应B细胞骨髓瘤细胞融合3种杂交细胞选择性培养基筛选1单克隆抗体继续培养筛选2（筛选出杂交瘤细胞）足够数量的、能产生特定抗体的杂交瘤细胞克隆化用单个B细胞进行克隆，得到的细胞群

7、能够分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体，这种抗体就叫做单克隆抗体。单克隆抗体：1、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交瘤细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（）A、经过免疫的B淋巴细胞B、不经过免疫的T淋巴细胞C、经过免疫的T淋巴细胞D、不经过免疫的B淋巴细胞A2、通过细胞工程生产单克隆抗体时，要涉及到以下三个筛选过程：①在特定培养基中筛选出杂交瘤细胞②选出能产生抗体的效应B细胞③选出能产生特定抗体并能大量增殖的细胞群。这三个过程的先后次序是（）A.②③①　　B.③①②　C.②①

8、③　　D.①③②C3、【巩固2】1975年科学家首次利用B淋巴细胞杂交瘤技术制备出单克隆抗体。请根据图回答问题。(1)病原体注入小鼠体内后，通常需要经过_______细胞的处理后，才能被免疫细胞识别。(2)制备单克隆抗体所用的B淋巴细胞一般从脾中采集，然后以_______作介导，使B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，通过筛选和克隆培养，获得的杂交瘤细胞具有_____特点。(3)单克隆抗体的特点