ITP腹腔镜术前后T淋巴细胞亚群变化与疗效分析

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1、ITP腹腔镜术前后T淋巴细胞亚群变化与疗效分析[摘要]目的：研究分析特发性免疫性血小板减少性紫癜（Immunethrombocytopenicpurpura,ITP）患者腹腔镜前后外周血中血小板相关抗体及T淋巴细胞亚群的变化情况，并探讨其与手术疗效的相关性及临床意义。方法：抽取2013年5月至2014年5月我院ITP行腹腔镜术的患者87例作为研究对象，按照手术前后分别予所有患者以治疗前组与治疗后组命名。另抽取30例健康志愿者作为对照组。检测分析各组的血小板相关抗体及T淋巴细胞亚群的变化情况。结果：治疗前组的PAIgA、PAIgG、PAIgM水平显著高于治疗后组与对照组，治疗前组CD3+、CD

2、D3+CD4+、CD3+CD4+/CD3+CD8+、CD16+56+的百分比则均低于治疗后组及对照组，而治疗前组CD3+CD8+、CD19+百分比其余两组。治疗后组与对照组的相关抗体水平、各项淋巴细胞亚群百分比相比，均有P＞0.05，无统计学意义。结论：体液免疫及细胞免疫异常为ITP发病重要因素，腹腔镜前后T淋巴细胞亚群的改变可反映该病的病例过程，T淋巴细胞亚群联合相关抗体检测对了解ITP的发病情况，判断其疗效及预后有重要意义。[关键词]特发性免疫性血小板减少性紫癜；T淋巴细胞亚群；血小板相关抗体；流式细胞术特发性免疫性血小板减少性紫癜（ITP）又名原发性血小板减少紫癜，指无明显诱因下血小板

3、减少症，为临床上常见血液病。其主要表现为血小板寿命缩短、数量减少及骨髓巨核细胞增多。研究表明，ITP与交叉反应所引起的体液免疫和细胞免疫异常有关，尤其T淋巴细胞亚群、B淋巴细胞的变化与ITP的发病、治疗效果密切相关。而脾脏则是破坏血小板的主要场所，脾切除则可减少免疫系统异常，减少抗体的产生，迅速升高血小板含量，为治疗激素无效性ITP的主要方式。为了进一步探究ITP的发生机制，向临床提供更有效的治疗方式，本研究通过对ITP患者的外周血小板抗体及T淋巴细胞亚群的变化情况进行分析，现总结报道如下：1资料与方法1.1临床资料抽取2013年5月至2014年5月我院腹腔镜脾切除术成功的ITP患者87例作

4、为研究对象，按照手术前后分别予所有患者以治疗前组与治疗后组命名。另抽取36例健康志愿者作为对照组。87例患者中男46例，女41例，年龄9-68岁，平均（30.3±12.4）岁。病程6-25天，平均（3.5±1.1）天。患者皮肤和黏膜出血情况各异，其中牙龈出血10例，肺出血2例，便血5例，鼻出血19例。所有患者诊断结构均符合血小板计数＜100×109，排除继发性血小板减少性疾病。健康志愿者中男21例，女15例，年龄12-66岁，平均（32.7±11.9）岁。1.2试剂及仪器·流式细胞仪：型号BDFACSCALIBUR，BDBioscience(U.S.A.)·低速离心机：型号TDZ6B,上海卢

5、湘仪器有限公司·螺旋振荡器：型号ZX21，TY10美国Stovall·主要试剂：GoatF(ab’)2IgG-FITC/GoatF(ab’)2Anti-HumanIgA/GoatF(ab’)2Anti-HumanIgG/GoatF(ab’)2Anti-HumanIgM;单克隆三色抗体CD4-FITC/CD8-PE/CD3-PC51.2方法：1.2.1标本采集空腹状态，无菌操作下一次性采集受试者外周静脉血4ml,以EDTA抗凝后分开各2ml置于两根试管中，迅速送至流式细胞室。1.2.2流式细胞术检测外周血血小板相关抗体①试剂配置，检查样本是否凝血；②取各受试者抗凝全血1ml,低速离心，洗涤血小

6、板后以CD41-PE进行荧光标记；③分别以GoatF(ab’)2IgG-FITC/GoatF(ab’)2Anti-HumanIgA/GoatF(ab’)2Anti-HumanIgG/GoatF(ab’)2Anti-HumanIgM进行单克隆抗体标记，洗涤后待上机检测；④调试流式细胞仪，检测样本中1000个细胞，读取记录PAIgG、PAIgA、PAIgM平均值。1.2.3流式细胞术检测T淋巴细胞亚群①取各受试者抗凝全血100μl,以CD41-PE进行荧光标记；②分别以单克隆三色抗体CD4-FITC/CD8-PE/CD3-PC5对血小板进行标记；③洗涤后上机待测；④调试流式细胞仪，以血小板设门，

7、检测细胞1000个，读取记录CD3+、CDD3+CD4+、CD16+56+、CD3+CD8+、CD19+亚群的百分数。1.3统计学处理对文中所得数据进行统计学处理，采用SPSS15.0软件进行分析，计量资料采用t检验，计数资料采用χ2检验，P＜0.05为有统计学意义。2结果：2.1各组外周血小板相关抗体水平比较检测分析三组受试者的血小板及外周血小板相关抗体如表-1，表中显示治疗前组的PLT计数明显小于治疗后组