肠道菌群失衡前后小鼠派氏结内t淋巴细胞亚群分析及功能变化的研究

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1、独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得大连医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：j照卜签字日期：乏!!之年—￡月盔日目录一、摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1(一)中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯000⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1(二)英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3二、正文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5(一)前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5(一)刖舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5(二)材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6(三)结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯12(四)讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯18(五)结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯20(六)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯21三、综述⋯⋯OOOOO⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯OOODOO⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯23(一)综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯23(二)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯28四、附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯30五、致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯32肠道菌群失衡前后小鼠派氏结内T淋巴细胞亚群分析及功能变化的研究硕士研究生：高菲指导教师：唐立教授指导小组：文姝副教授专业名称：微生物学摘要目的：通过分析小鼠肠道菌群失衡前后派氏结(Peyer’Spatches，PP)内T淋巴细胞及亚群数量以及细胞因子表达的变化，阐明菌群失衡对小鼠

4、派氏结内T淋巴细胞结构和功能的影响。方法：1．沿用抗生素头孢曲松钠灌胃的方法建立小鼠肠道菌群失衡模型。以头孢曲松钠终浓度为89／kg／d剂量，连续灌胃8天，建立小鼠重度菌群失衡模型；以头孢曲松钠终浓度为49／kg／d剂量，连续灌胃4天，建立小鼠轻度菌群失衡模型。2．利用EDTA振荡法去上皮和胶原酶Ⅳ消化法制备正常组、轻度菌群失衡组、重度菌群失衡组小鼠肠派氏结总单细胞悬液。以本管未添加抗体细胞作为阴性对照，调整细胞浓度为106个／管，三联荧光抗体标记流式细胞术检测T淋巴细胞CD3+、CD4+、CD8+和调节性T细胞CD4+CD25+的变化，并计

5、算CD4／CD8比值。3．利用RT．PCR法检测正常组、轻度菌群失衡组和重度菌群失衡组派氏结内Thl类淋巴细胞分泌的IL一2、IFN-7和Th2类淋巴细胞分泌的IL．4、IL．10mRNA表达量的变化。结果：1．与正常组比较，轻度组和重度组派氏结内总CD3+T细胞比例上升(p

6、度组和重度组中Thl类细胞分泌的IL．2和IFN．Y的表达量减少，Th2类细胞分泌的IL一4和IL一10的表达量逐渐升高。结论：1．肠道优势菌群失衡导致派氏结内T淋巴细胞构成比例发生变化，其中总T淋巴细胞比例随着失衡程度的加深不断升高，辅助性T细胞比例较失衡前升高，细胞毒性T细胞和调节性T细胞比例降低。2．肠道优势菌群失衡导致派氏结内与体液免疫相关的IL一2和IFN--／表达量升高，与细胞免疫相关的1L．4和IL．10表达量降低，促使免疫反应向体液免疫方向偏移。关键词：菌群失衡派氏结T淋巴细胞免疫偏移2EffectsofMiceDysbios

7、isTlymphocyteTinofIntestinalFloraonPeyer’SpatchesMasterdegreecandidate：FeiGaoSupervisor：ProfessorLiTangViceSupervisor：ProfessorShuWenMajor：MicrobiologyAbstractObjective：ExplorethefloraimbalanceofthemouseintestinaladvantagePeyer’Spatches(PP)numberofcellswithintheTlymphocytes

8、ubsets，thestructureandfunctionoftheimpactofprovenfloraimbalanceledtowhattypeofimmu