Endostar对血管新生和肝癌诱导的血管新生的抑制作用

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1、Endostar对血管新生和肝癌诱导的血管新生的抑制作用南京八一医院全军肿瘤中心先声药物研究有限公司叶庆秦叔逵﹡殷晓进﹡李慧丰俊东吴穷曲文书新生血管形成的步骤：研究背景：血管内皮抑素是ⅩⅧ型胶原C－末端的氨基酸片段，通过体内、外研究表明其能特异性地抑制血管内皮细胞的增殖并能抑制毛细血管的生长。美国哈佛大学医学院JudahFolkman教授认为当实体瘤生长超过1mm3时,即需要新生血管来维持肿瘤的生长并促使其转移。肝癌是一种富血管肿瘤，肝癌通过诱导丰富新生血管来促进其生长、转移和复发。研究背景：实验方案：体外实验体内试验侵袭趋化和迁移粘附增殖小管形成Metrigal

2、栓Endostar对HUVEC的影响Endostar对肝癌诱导特异性血管形成的影响血管内皮抑素能否以及如何影响血管新生肝癌诱导的特异性血管新生血管内皮抑素用于治疗和预防肝癌的转移和复发提供试验及理论依据研究目的：Endostar对血管新生的抑制作用Endostar对HUVEC趋化和迁移的影响划痕试验：迁移小室：VEGF能诱导HUVEC的趋化和迁移Endostar能够抑制VEGF诱导HUVEC的趋化和迁移在浓度为50ng/ml和500ng/ml时效果最明显Endostar对HUVEC粘附的影响Endostar能够抑制HUVEC粘附作用，在浓度50ng/ml-5000

3、ng/ml间，具有浓度依赖性Endostar对HUVEC增殖的影响1)MTS法：ng/ml500,00050,00050005005050.50.050.0050.00050.0000524h0.19650.16340.22510.17350.24110.10840.0173-0.02410.10210.1592740.14518648h0.33890.21070.19770.16430.08510.07340.1375-0.0350.12780.04400.037672h0.1710-0.041-0.018-0.049-0.039-0.100-0.17-0.13

4、7-0.072-0.1880.0467Endostar作用于HUVEC24h和48h时，大多浓度有效2)CFSE荧光染色法：Endostar浓度在50ng/ml～5000ng/ml间，能够抑制HUVEC的增殖，其抑制作用具有浓度依赖性Endostar对HUVEC小管形成的影响Endostar能抑制HUVEC形成管型，在浓度为50ng/ml～5000ng/ml间，500ng/ml抑制作用最强500ng/mlEndostar＝050ng/ml5000ng/ml动物水平实验Matrigel胶栓实验小结Endostar在细胞水平能抑制HUVEC与血管形成相关的生物学行为，

5、包括HUVEC的趋化、迁移、粘附、增殖和小管形成；在动物水平能抑制血管形成，据此推断Endostar能抑制血管形成Endostar对肝癌诱导的血管新生的抑制作用肝癌细胞对HUVEC趋化和迁移的影响肿瘤条件培养基能够比正常肝细胞培养基更能诱导HUVEC的趋化和迁移运动Endostar对肝癌细胞诱导的HUVEC趋化和迁移的影响Endostar能够抑制肝癌条件培养基诱导HUVEC的趋化和迁移运动，在浓度为50ng/ml和500ng/ml时效果最明显HUVEC对肝癌细胞的粘附作用肝癌细胞较正常肝细胞容易粘附HUVECEndostar抑制肝癌细胞对HUVEC的粘附作用End

6、ostar在50ng/ml-5000ng/ml之间能抑制HepG2对HUVEC的粘附作用，并具有浓度依赖性肝癌细胞对HUVEC增殖的影响CFSE/PKH-26荧光染色：Proliferationindex0.2%BSA+SFMTCMNCMHUVEC1.531.431.38HUVEC+HepG22.682.66HUVEC+L022.542.42Proliferationindex排序：HUVEC+NCM(1.38)HUVEC+TCM(1.43)HUVEC+L02+NCM(2.42)HUVEC+HepG2+TCM(2.66)肝癌条件培养基较正常肝细胞条件培养基更能促进

7、HUVC的增殖肝癌细胞和HUVEC共培养能促进HUVC的增殖Endostar对肝癌细胞诱导HUVEC增殖的影响CFSE/PKH-26荧光染：ProliferationindexEndostar050ng/ml500ng/ml5000ng/mlHU+HEP2.75/2.442.56﹡/2.27﹡2.56﹡/2.19﹡2.52﹡/2.28﹡HU+L022.54/1.972.60/1.922.67/2.042.52/2.10ProliferationinhibitionratioEndostar对共培养中HUVEC和HepG2的抑制作用大于其对单独培养的HUVEC或He

8、pG2的抑