肝胆酸标准操作流程

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1、宁波美康生物科技股份有限公司美康试剂标准操作程序项目甘胆酸编号共6页方法胶乳增强免疫比浊法用途用于人血清中甘胆酸(CG)浓度的定量测定制定人审核人批准人批准日期发布日期生效日期宁波美康生物科技股份有限公司目录1实验原理和检验目的2标本采集和处理2.1标本种类和采集方法2.2标本处理方法3试剂3.1试剂组成和包装3.2试剂准备3.3试剂稳定性4校准4.1校准品4.2校准品准备4.3校准品稳定性4.4试剂校准周期5质控5.1质控品5.2可接受性判断5.3质控操作6操作7.计算方法8参考值9操作性能10结果处理11方法局限性12注意事项13参考文献14技术服务宁波美康生物科技股份有限公司1实验原理和

2、检验目的包被有甘胆酸抗体的胶乳颗粒可与血清中的甘胆酸产生凝集反应，形成抗原抗体复合物，其浊度高低在一定量抗体存在时与血清中CG成正比。通过测定特定波长的吸光度值，参照校准曲线即可计算出血清中CG的浓度。甘胆酸(Cholyglycine,CG)是胆酸与甘氨酸结合而成的结合型胆酸，是主要胆酸之一，在血清中主要以蛋白结合形式存在，分子量为465.6。甘胆酸在肝细胞合成，经胆管排入胆囊贮存，餐后胆囊收缩，随同胆汁排入小肠，参与脂肪的消化吸收。95%的胆酸在回肠末端重吸收，经门静脉输送至肝脏由肝细胞摄取后，再泌入胆汁。当肝细胞受损或胆汁郁滞时，肝细胞不能有效地摄取经肠肝循环达肝脏的甘胆酸，致使血中的CG

3、含量增高；胆汁郁滞时，肝脏排泄胆酸发生障碍而返流入血循环中，亦可使血中CG含量增高。急性肝炎、慢性活动性肝炎、肝硬化及胆石症患者CG明显升高；梗阻性肝病和药物性胆汁郁积症患者CG也会升高[1]。2标本采集和处理2.1.血清。样本采集后请尽快离心测定。2.2干扰物质：血红蛋白≤5g/L，非结合胆红素≤20mg/dL，结合胆红素≤28.8mg/dL，乳糜≤1450FTU，类风湿因子≤150IU/mL对检测结果无影响。3试剂3.1试剂组成试剂成分浓度试剂1三羟甲基氨基甲烷缓冲液12.1g/L氯化钠5.85g/L聚乙二醇600020g/L试剂2包被有鼠抗人甘胆酸抗体的胶乳颗粒4.5g/L三羟甲基氨基甲

4、烷缓冲液12.1g/L牛血清白蛋白2g/L吐温202mL/L3.2试剂准备本试剂为液体，可直接使用3.3试剂稳定性试剂盒在2～8℃避光保存，可稳定1年，试剂不得冷冻。试剂开瓶后，2～8℃可稳定1个月。宁波美康生物科技股份有限公司4校准4.1校准品准备建议使用本公司校准品。本产品使用时一般采用多点校准。4.3校准品稳定性校准品在2～8℃密封避光保存可稳定1年。4.4试剂校准周期每2周或当发生以下情况时，建议重新校准：变更试剂批号；质控值发生显著偏移；生化分析仪进行了较大的维护。5质控5.1质控品按照质控品使用说明书操作。建议每天进行一次质控实验。5.2可接受性判断质控物的检测值应在给定质控范围，

5、或可以通过参加卫生部室间质评对实验室的运作情况进行系统评估。5.3质控操作每日进行样本检测之前首先应进行质控操作，以考察系统的在控情况。如果检测结果符合质控要求则进行样本操作；如果不符合质控要求，则应重复质控操作，以排除可能发生的偶然误差；如果仍不符合质控要求，则应考虑质控品的重新准备、试剂的重新校准或更新、仪器的维护等。建议在样本的检测过程中和或结束后再次进行质控操作，以考察样本的检测全过程的在控情况。宁波美康生物科技股份有限公司6操作6.1各机型参数设定罗氏P800生化分析仪检测参数:Test项目CGAssayCode/Time分析方法2PointRateWavelength（2nd/Pr

6、imary）波长（副/主）415/340AssayPoint测光点12/25ABSLimit吸光度界限/反应方向32000/INCREASES.Vol标本量15ReagentT1试剂1200ReagentT2试剂250ReagentT3试剂3　ReagentT4试剂4　CalibrationType校准类型Logit(4P)K计算系数K　SDLimit标准差界限999DuplicateLimit离散度界限-32000～32000S1ABSLimit空白吸光度界限-32000～32000ExpectedValue参考值范围　TechnicalLimit线性范围　Unit单位mg/LSTD(1)C

7、onc校准品（1）#.##(混合血清)STD(2)Conc校准品（2）#STD(3)Conc校准品（3）#STD(4)Conc校准品（4）#STD(5)Conc校准品（5）#STD(6)Conc校准品（6）#7计算方法采用多点校准，多参数曲线方程（如logit/log）拟合。以△A可求得CG浓度。宁波美康生物科技股份有限公司8参考值小于2.7mg/L此数据来源于120个健康个体的实验数据，仅供参考