实时荧光定量RTPCR检测内皮细胞tPA+mRNA方法的建立

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1、中国药理学通报!/5.$)=)"5(!D(’+,+6.’(,-@,,)%.$!"%%’g7E；,,（*）：’&&L,·’&&·+实验方法学+实时荧光定量!"#$%!检测内皮细胞&#$’(!)’方法的建立赵砚婷，张莲芬，金!坚（江南大学教育部重点实验室·细胞与分子药理研究室，江苏无锡!"#$%&’）&#%中国图书分类号：(&&")#"；(&$%)&；(&$")""；(&$*)’&；(#%L#%拷贝，循环阈值与23(体系中起始模板量的对数"&+$)"；(+,&)"值之间有着良好的线性关系（!M%)++%），

2、批内变异-0#文献标识码：-!文章编号：：#%%#.#+,/（"%%’）%*0%’&&0%*&)#%N，批间变异-$)+&N。#)"*L"%)%%"5HJ·O的全摘要：目的!建立实时(1.23(检测人微血管内皮细胞组织反式维甲酸能明显上调内皮细胞4.2-5(6-的表达（"P型纤溶酶原激活物（4.2-）5(6-的表达。方法!提取人微%)%#），且呈剂量依赖性。结论!实时荧光定量(1.23(的血管内皮细胞总(6-，经(1.23(获得靶基因（4.2-）及管家方法可对4.2-5(6-的表达进行准确定量，有助于溶

3、栓药基因（!.7849:）的23(产物。纯化后，作为标准品梯度稀释，物药理学研究和新药筛选。采用;<=(>?@@:A定量23(检测，建立标准曲线。方法学关键词：实时逆转录聚合酶链反应；组织型纤溶酶原激活物；考核参数为特异性、线性范围、精密度和重复性。分析全反人微血管内皮细胞式维甲酸对内皮细胞表达4.2-5(6-的干预效果。结果!&定量方法特异性好，检测的灵敏度达#%拷贝，线性范围为!!组织型纤溶酶原激活物（4.2-）是启动纤溶系统的重要因子，对维持血管内血流的通畅起重要的作用。血浆4.2-收稿日期："%

4、%’0%#0"$，修回日期："%%’0%"0"/主要由血管内皮细胞（B:QH4G@J97J8@JJ，B3）合成、分泌。在作者简介：赵砚婷（#+/%0），女，硕士生，研究方向：抗血栓新药的开培养的内皮细胞中，4.2-的表达调控一般发生于转录水平，发和研究，B.579：49:7CDE4FE7GHHI8H5I8:；目前已经有一些报道表明多种药物对内皮细胞4.2-5(6-金!坚（#+’%0），男，教授，博士生导师，研究方向：肿瘤［#，"］的表达具有调控作用。国内血栓药物的研究中，阐明药及心血管药物药效学和药理学

5、研究，1@J：%*#%./*/’%"&’，物对纤溶系统的影响主要集中在检测4.2-的含量和活性两B.579J：K9:K97:&#FGH4579JI8H5!!8J@7??@R49:GS57:G@T74H8@JJSJ7?87?89:H578@JJJ9:@［RU］I#$%&［U］I*+,-.+,/),,，"%%#，+,（’）：#*’+I’($’)!，"%%"，**（*）：,**0’#I［#*］>?7RR5@W，Y9?R8G:@^;，(9@4G5S@JJ@?U，@47JI3V+*_3V+*J9]7:Q［#$］V

6、@R8G@:@R(>，WSH4U，X7J@?9@Y，@47JIA:ZHJZ@5@:4H[T&/9:7T.9:4@?7849H:RH:@T94G@J97J8@JJR9:GHR4Q@[@:R@4HTR@QH5H:7R7@?S]9.HT4HR9R7RRH8974@Q5@5?7:@J@\9:]7:Q:S8J@7?8H:Q@:R749H::HR［7U］I0’.)$’)，"%%%，,*-（*$+#）：*",0&%I./012&34/5/0(6275/38(49:5;0624<3=4/&765>4>&48384

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