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《gbt13087-1991 饲料中异硫氰酸酯的测定方法》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、中华人民共和国国家标准饲料中异硫氮酸醋的测定方法GB13087一91Methodfordeterminationofisothiocyanatesinfeeds，主题内容与适用范困本标准规定了配合饲料和菜籽饼粕中异硫氰酸醋的测定方法。本标准适用于配合饲料(包括混合饲料)和菜籽取油后的饼粕中异硫氰酸醋的测定。第一篇气相色谱法2原理配合饲料中存在的硫葡萄搪昔，在芥子酶作用下生成相应的异硫氰酸酷，用二氯甲烷提取后再用气相色谱进行测定。3试剂和溶液除特殊规定外，本标准所用试剂均为分析纯，水为蒸馏水或相应纯度的水。3.1二氯甲烷或氯仿(GB
2、682).3.2丙酮(GB686),3.3pH7缓冲液:市售或按下法配制。量取35.3mLO.1mol/L柠檬酸(C6He0c"H20)溶液，置入200mL定容瓶中，用0.2mol/L磷酸氢二钠(Na2HPO,"12H20,GB1263)稀释至刻度，配制后检查pH值。3.4无水硫酸钠。15酶制剂:将白芥(SinapisalbaL.)种子(72h内发芽率必须大于85，保存期不超过两年)粉碎后，称取100g，用300mL丙酮(3.2)分10次脱脂，滤纸过滤，真空干燥脱脂白芥子粉，然后用400mL水分两次提取脱脂粉中的芥子酶，离心，取上
3、层混悬液体，合并，于合并混悬液中加入400mL丙酮(3.2)沉淀芥子酶，弃去上清液，用丙酮(3.2)洗沉淀5次，离心，真空干燥下层沉淀物，研磨成粉状，装入密闭容器中，低温保存备用，此制剂应不含异硫氰酸醋。3.6丁基异硫氰酸酷内标溶液:配制0.100mg/mL丁基异硫氰酸酷CCH,(CH2),NCS〕二氯甲烷或氯仿(3.1)溶液，贮于4'C，如试样中异硫氰酸酷含量较低，可将上述溶液稀释，使内标丁基异硫氰酸醋峰面积和试样中异硫氰酸酷峰面积相接近。4仪器、设备41气相色谱仪:具有氢焰检测器。42氮气钢瓶:其中氮气纯度为99.990004
4、.34微量注射器:5pL,分析天平:感量。.0001g.国家技术监督局1991一07门6批准1992一04一01实施.www.bzxzk.com.GB13087一914.5实验室用样品粉碎机。4.6振荡器(往复，200次/min).4.7具塞锥形瓶，25mLe4.8离心机。4.9离心试管:10ml,.5试样制备采集具有代表性的配合饲料样品，至少2kg，四分法缩分至约250g，磨碎，过1mm孔筛，混匀，装入密闭容器，防止试样变质，低温保存备用。6测定步获6.1试样的酶解称取约2.2g试样于具塞锥形瓶(4-7)中，精确到0.001g，
5、加入5mLpH7缓冲液(3.3),30mg酶制剂(3.5),10mL丁基异硫佩酸醋内标溶液(3.6)，用振荡器(4-6)振荡2h，将具塞锥形瓶(4-7)中内容物转入离心试管(4-9)中，离心机(4-8)离心，用滴管吸取少量离心试管(4-9)下层有机相溶液，通过铺有少量无水硫酸钠(3-4)层和脱脂棉的漏斗过滤，得澄清滤液备用。6.2色谱条件6.2-1色谱柱:玻璃，内径3mm，长2m,6.2.2固定液:20%FFAP(或其他效果相同的固定液).6.2.3载体:ChromosorbW,HP,80-100目(或其他效果相同的载体)。6.2
6、.4柱温:loo0C。6.2.5进样口及检测器温度:1500C,6.2.6载气(氮气)流速:65mL/min,6.3测定用微量注射器(4.3)吸取1一2pL上述澄清滤液，注入色谱仪，测量各异硫氛酸酷峰面积。7测定结果不，计算公式刀孟ex=115.19XS,X石C(4/3X99.15XS,)+(4/4X113.18XSO十(4/5X127.21XS,))X1000，月.二二一(1-15S.+0-98S、十0.88S,)X1000(1)S,Xm式中:X—试样中异硫氰酸醋的含量，mg/kg;m—试样质量，9;m,-IOmL丁基异硫氰酸醋
7、内标溶液中丁基异硫氛酸醋的质量,mg;S,—丁基异硫氛酸醋的峰面积;S,—丙烯基异硫氰酸醋的峰面积;S,—丁烯基异硫氰酸醋的峰面积;S,—戊烯基异硫氰酸酷的峰面积。7.2结果表示每个试样取2个平行样进行测定，以其算术平均值为结果。结果表示到1mg%kg..www.bzxzk.com.GB13087一91了.3重复性同一分析者对同一试样同时或快速连续地进行两次测定，所得结果之间的差值;在异硫氰酸酷含量小于或等于100mg/kg时，不超过平均值的1500在异硫氰酸酷含量大于100mg/kg时，不超过平均值的10000第二篇银t法8原理
8、菜籽饼粕中存在的硫葡萄糖昔，在芥子酶作用下可生成相应的异硫氰酸醋。用水气蒸出后再用硝酸银一氢氧化铁溶液吸收而生成相应的衍生硫脉。过量的硝酸银在酸性条件下以硫酸铁按为指示剂用硫氰酸铁回滴，再计算出异硫氰酸醋的含量。9试荆和溶液除特殊规定外，本标准所用
