高三生物复习 生物技术在组织培养、dna和蛋白质分离

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1、第十一单元生物技术实践第43课时生物技术在组织培养、DNA和蛋白质分离及有效成分提取中的应用突破考点·提炼方法考点1生物技术实践应用——植物组织培养1．植物组织培养的过程(1)菊花组织培养过程(2)月季的花药培养2.植物组织培养技术和花药离体培养技术的异同植物组织培养技术花药离体培养技术相同点理论依据植物细胞的全能性基本过程外植体愈伤组织丛芽生根―→移栽；无菌技术及接种操作基本相同影响因素选材、营养、激素、pH、温度、光照等不同点选材体细胞生殖细胞(精子)生殖方式无性生殖有性生殖提醒同一株绿色植物不同

2、部分的细胞经培养获得的愈伤组织的基因相同。3．植物激素与组织培养(1)生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素，其作用及特点：①在生长素存在的情况下，细胞分裂素的作用呈现加强的趋势。②使用顺序不同，结果不同，具体如下：使用顺序实验结果先使用生长素，后使用细胞分裂素有利于细胞分裂，但细胞不分化先使用细胞分裂素，后使用生长素细胞既分裂又分化同时使用分化频率提高③用量比例不同，结果也不同4．影响植物组织培养的因素(1)材料：植物的种类、材料的年龄和保存时间的长短等都会影响实验结果。一般来

3、说，容易进行无性繁殖的植物容易进行组织培养。嫩枝生理状态好，容易诱导脱分化和再分化。(2)营养：常用的培养基是MS培养基，其中含有的大量元素是N、P、S、K、Ca、Mg，微量元素是Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、I、Co，有机物有甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等。提醒培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压。(3)环境条件：pH、温度、光照等环境条件。如菊花组织培养所需pH为5.8，温度为18～22℃，光照条件为每日用日光灯照射12小时。1．(2011·江苏卷，16)下列有关植物组织培养的叙述

4、，正确的是()A．愈伤组织是一团有特定结构和功能的薄壁细胞B．二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到稳定遗传的植株C．用人工薄膜将胚状体、愈伤组织等分别包装可制成人工种子D．植物耐盐突变体可通过添加适量NaCl的培养基培养筛选而获得对位训练答案D解析在普通培养基中添加适量的NaCl，制成选择培养基，可用来筛选植物耐盐突变体，故选项D正确。愈伤组织的细胞排列疏松而无规则，是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞；二倍体植株的花粉经离体培养后得到单倍体植株，该单倍体高度不育，不能稳定遗传；用人工薄膜将胚

5、状体等进行包装可制成人工种子，愈伤组织不能作为制作人工种子的材料，故选项A、B、C错误。排雷(1)菊花的组织培养实验中，应选择未开花植物的茎上部新萌生的侧枝；月季花药的离体培养实验中，应选择花粉发育过程中的单核靠边期的花粉进行培养。(2)植物组织培养过程应该在无菌的条件下进行，外植体消毒所用消毒剂为体积分数为70%的酒精和质量分数为0.1%的氯化汞溶液，所使用的清洗液是无菌水。(3)组织培养时不用天然激素而是用人工合成的激素，是因为植物中存在相应的分解天然激素的酶而没有分解相应的人工合成激素的酶，所以

6、天然激素在植物体内作用和存在的时间短，人工合成激素的作用和存在的时间长，作用效果明显。(4)在初期，菊花的组织培养需光照，月季花药的离体培养不需光照，而在后期均需光照。考点2生物技术实践应用——DNA的粗提取与鉴定1．原理、方法和目的基本原理方法目的DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，在0.14mol/L的NaCl溶液中的溶解度最低溶于NaCl溶液中并稀释①NaCl溶液为2mol/L时，DNA溶解，而部分蛋白质发生盐析生成沉淀，通过过滤可除去部分蛋白质及不溶于NaCl溶液的杂质②当NaCl溶

7、液稀释至0.14mol/L时，DNA析出，过滤可除去溶于NaCl溶液的部分蛋白质和其他杂质DNA不被蛋白酶所水解加入嫩肉粉嫩肉粉中含木瓜蛋白酶，水解蛋白质DNA不溶于酒精溶液加入冷却酒精(95%)DNA析出，除去溶于酒精的蛋白质DNA可被二苯胺染成蓝色加入二苯胺，并沸水浴鉴定DNA2.实验步骤及注意事项(1)步骤：提取血细胞核物质(蒸馏水涨破)→溶解(2mol/L的NaCl溶液)→过滤(除杂质)→析出(滴蒸馏水，降NaCl溶液浓度至0.14mol/L)→过滤→再溶解(2mol/L的NaCl溶液)→过滤

8、→进一步提纯(体积分数为95%的冷却酒精)→鉴定。(2)鉴定不变蓝——对照组溶液逐渐变蓝丝状物(DNA)均加入：①4mL二苯胺试剂②2mol/LNaCl溶液5mL实验组图示结果加入物质比较(3)注意事项①制备鸡血细胞液时，要在取鸡血的同时加入柠檬酸钠，静置后上层是血清，下层为所需要的血细胞。②两次加蒸馏水的目的不同，一是涨破细胞，二是稀释溶液。③鉴定DNA时需沸水浴加热。④二苯胺试剂要现配现用，否则会影响鉴定的效果。对位训练2．(2010·江苏卷