高考生物一轮复习生物技术实践5dna和蛋白质技术课件新人教版选修1

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1、高考总复习（第1轮）生物生物技术实践第5讲DNA和蛋白质技术选修1高考有我，前程无忧考点明示考点1　DNA的粗提取与鉴定1．DNA提取原理：(1)不同条件对DNA和蛋白质作用对比：知识梳理试梳理0.14mol/L增大不溶解水解增大60～80℃(2)洗涤剂：能瓦解，对DNA影响。(3)DNA鉴定：条件下，DNA遇被染成色。2．实验过程：(1)材料选取：选取DNA含量相对的生物材料，如血细胞。(2)破碎细胞，获取含DNA滤液：动物细胞可用处理，使其；植物细胞需用瓦解细胞膜。(3)去除滤液中的杂质：利用DNA在不同浓度的NaCl溶液

2、中的不同，通过控制NaCl溶液的浓度去除杂质。(4)DNA析出与鉴定：将处理后的溶液过滤，加入与滤液体积相等的、冷却的体积分数为的溶液。之后进行鉴定。细胞膜无沸水浴二苯胺蓝较高鸡蒸馏水吸水涨破洗涤剂溶解度95%酒精3．实验注意事项：(1)以血液为实验材料时，需在血液中加入防止凝固。(2)用洗涤剂处理植物细胞时动作要，防止产生大量。加入酒精后用玻璃杯搅拌动作要，防止DNA分子，不能形成絮状沉淀。(3)鉴定DNA用的二苯胺试剂要，否则影响实验效果。考点2　多聚酶链式反应扩增DNA片段1．多聚酶链式反应原理：(1)多聚酶链式反应，即

3、技术，是一种迅速扩增DNA的技术。(2)DNA热变性原理，即：柠檬酸钠轻缓泡沫轻缓断裂现配现用PCR体外冷却(3)引物：由于DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，只能从端把脱氧核苷酸连到已经合成的脱氧核苷酸链上，所以需要合成的一段脱氧核苷酸链提供3′的末端，引导延伸过程。2．PCR反应过程：(1)变性：当温度上升到以上时，双链DNA解聚为单链。(2)复性：温度下降到左右时，两种通过与两条单链DNA结合。(3)延伸：温度上升到左右时，溶液中的四种脱氧核苷酸(A、T、C、G)在的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链。3．DN

4、A含量测定：DNA在的紫外线波段有一强烈的吸收峰，可根据这一特点使用进行测定。3′人工90℃50℃引物碱基互补配对72℃DNA聚合酶紫外线分光光度计260nm考点3　血红蛋白的提取和分离1．方法及原理：2.实验过程：生理盐水血浆蒸馏水甲苯3磷酸缓冲液凝胶色谱使用SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳1．判断下列有关DNA粗提取与鉴定的叙述的正误(1)调节NaCl溶液浓度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除部分杂质(2011·江苏卷T19－B)()(2)将丝状物溶解在2mol/LNaCl溶液中，加入二苯胺试剂即呈蓝色(2011·江苏卷T19－C)(

5、)(3)洗涤剂能瓦解细胞膜并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度(2012·江苏卷T18－A)()(4)鸡血细胞液中加入少许嫩肉粉有助于去除杂质(2015·江苏卷T25－D)()答案：（1）√（2）×（3）×（4）√查能力2．判断下列有关多聚酶链式反应扩增DNA片段的叙述的正误(5)用PCR方法扩增目的基因时不必知道基因的全部序列(2013·江苏卷T22－B)()(6)PCR反应中温度的周期性改变是为了DNA聚合酶催化不同的反应(2014·江苏卷T23－B)()3．判断下列有关血红蛋白的提取和分离叙述的正误(7)在凝胶色谱法分离

6、过程中，血红蛋白比分子量较少的杂蛋白移动慢(2011·广东卷T5)()答案：（5）√（6）×（7）×考点1　DNA的粗提取与鉴定例1(2015·江苏改编)图1、2分别为“DNA的粗提取与鉴定”实验中部分操作步骤示意图，下列叙述不正确的是（）考点突破A．图1、2中加入蒸馏水稀释的目的相同B．图1中完成过滤之后保留滤液C．图2中完成过滤之后弃去滤液D．在图1鸡血细胞液中加入少许嫩肉粉有助于去除杂质解析：图1中加入蒸馏水的目的是使鸡血细胞吸水涨破，释放其中的核物质，图2中加入蒸馏水的目的是降低NaCl的浓度，使DNA的溶解度降低析出

7、，A错误；由于DNA溶于水，所以图1中完成过滤后DNA存在于滤液中，需保留滤液，B正确；图2中DNA析出，则过滤后弃去滤液，保留黏稠物，C正确；在图1中鸡血细胞液中加入少许嫩肉粉，蛋白质水解形成肽和氨基酸，溶于水，有利于去除杂质，D正确。答案：A提升：DNA粗提取操作中4次过滤的比较变式1“DNA的粗提取与鉴定”实验中，操作正确的是()A．取制备好的鸡血细胞液5～10mL注入烧杯中，迅速加入物质的量浓度为0.14mol/L的NaCl溶液20mL，同时用玻璃棒沿同一方向快速搅拌5min，可使血细胞破裂，释放出DNAB．整个DNA

8、提取过程中，两次加蒸馏水的目的都是为了降低溶液中NaCl的浓度，使DNA分子的溶解度达到最低，析出DNA分子C．整个DNA提取操作中，两次加入2mol/L的NaCl溶液，目的都是使DNA尽可能多地溶解在NaCl溶液中D．DNA鉴定操作中，只要向溶有DNA的NaCl溶液中加入4