对虾体内氯霉素含量测定方法的研究

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1、




,
第卷第期青岛海洋大学学报








年
月
















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对虾体内氯霉素含量测定方法的研究李兰生王勇强
青岛海洋大学
山东省海水养殖研究所

。
摘要应用



技术建立常用药物氯霉素的虾体动力学研究方法该方法的特点是与微生物法、比色法、气相色谱法、荧光法及免疫法比较
测试准确、快速且灵敏度高。应用该方法、、、,。可以从虾体内的血液肌肉肝胰脏肠胃中分离出被虾吸收的氯霉素并定量测定在
一。
叩



范围内线性关系相关系数为










关键词对虾体内氯霉素测定

2、方法药物动力学高效液相色谱仪中图法分类号


,研究对虾防病药物在虾体内的药物动力学是指导正确使用药物提高合理与有效用。

、药的一门应用性基础学科药物动力学研究有助于解决以下问题提供用药有效或无效、、、的依据

预测治疗计划的效果

确定药物剂量与用药周期

药物动力学基本概念适用于所有药物
了解一种药物的动力学资料有助于了解其它药物的动力学。,,药物动力学在临床医学中深受重视在水产养殖领域上国外学者曾在许多鱼类体内作过研究。由于对虾养殖与虾病防治工作起步较晚,有关虾体内的药物动力学方面的研究尚未见报道。近年来随着对虾养殖业的发展,虾病用药也日益增多,难

3、免还存在些盲目性,尚欠合理。因而进行虾体内的药物动力学研究具有重要的理论意义和现实意义。当前的,研究方法一般是定量给药后按不同时间分别对每个实验对象在体内多次取样鉴于对虾
,。的特殊性一是不易定量给药二是容易死亡而不能在一只虾上多次取样在定量给药方,,,面我们曾根据设想探讨过灌注法与注射法都因某种原因而告失败最后决定采取大剂,,。量投喂方法分析测定时再将各组织部位单独计算而合成体内药物总剂量将实验虾群·。〔,三〔“〕〔
〕体看作一个整体使用这种方法顺利完成了氯霉素动力学研究样本的获取

分析仪器与条件
,

仪器使用仪器为日本

!
公司产的


型高效

4、液相色谱仪包括由


,,,梯度自动控制的
台


型高压泵


型自动进样器


型紫外检测器


型,。记录仪使用外标法软件进行积分计算



拜


。固定相日本
公司产一



一

色谱性,,


流动相甲醉
重蒸馏水





甲醇系浙江黄岩产色谱洗脱剂经

拜
微孔滤,。膜过滤超声波脱气


后使用



一

一〔







一

一
收稿日期修订日期一

期李兰生等对虾体内氯霉素含量测定方法的研究
检测波长






标准
制备及标准曲线使用东北制药总厂生产的医用氯霉素粉剂
批号



,


,



,

5、

,
。,
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经提纯后作为标准品配制成

林



,个浓度标准,、。经进样测定线性关系如表
图
所示表
氯霉素线性关系测定结果





一



















































,。。,。
。
。
。浓度尸
。


…
、
‘…丁





准





一

下

八一一
蜂面积

示





























回归方程为
峰面积








浓度
一




相关系数










样品制备生

6、物样品中化学成份复杂,为提高实验可靠性及保证仪器正常进行,,,应在样品处理时尽可能不损失待分析成份而除去蛋白质等大分子物质通过实验使用甲,
醇作为提取溶媒同时又作为蛋白质沉淀剂具有较好的效果具体操作方法如下川
’圈,,,将对虾组织样品加等量蒸馏水在玻璃匀浆器中匀浆然后加甲醇使甲醇量为前二一,,,,者总量的
倍不断振摇研磨

使氯霉素充分溶出蛋白质变性沉淀再转入



,
,。,离心管以





离心


取上清液进样分析经以上方法处理过的样品蛋白质可,。。去除
以上满足仪器的分析要求进样量
拼
,、氯霉素标准品及对虾样品中氯霉素色谱图如图

7、
。



图
氯霉素标准品色谱图图
对虾样品中氯霉素色谱图















































一
































青岛海洋大学学报



年,上几%&S∋图
氯霉素标准品标准曲线
















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#∃01Xl确O0.-。~一不才一晶一一40u50g/ml..,.,14回收率的测定将空白肌肉组织加氯霉素标准液使含量分别为2510025,,,。O拜g/g按样品制备方法操作每个样品进样测

8、定2次结果见表2表2回收率测定结果Table2Res