硫酸多糖类药物911微量分析方法的研究

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1、中国海洋大学硕士学位论文硫酸多糖类药物911微量分析方法的研究姓名：郑瑞津申请学位级别：硕士专业：生药学指导教师：吕志华;徐家敏2003.6.1硫酸多糖类药物911微量分析方法的研究摘要911是一种海洋硫酸多糖类药物，是以海藻提取物一褐藻酸经降解、分级、纯化得到聚甘古糖醛酸，在经硫酸化而制得的聚甘古酯，具有良好的抗癌滋病活性。论文首先对91l的基本理化性质进行了系统的分析，以电导滴定法和高效凝胶渗透色谱法分别测定了分子中硫酸根羧酸根的比值和911的分子量，并探讨了两种分析方法的精密度。911分子没有紫外吸收，为提高检测灵敏度，本文采用荧光

2、标记法，通过对三种荧光试剂与几种寡糖和多糖衍生效果的综合比较，最终确定了盐酸胍为最佳衍生试剂，并以91l为代表详细探讨了衍生化反应的最优条件。911糖链结构与褐藻胶主链结构类似，以甘露糖醛酸和古罗糖醛酸的嵌段形式存在，分子中M／G比值与91l的物理化学性质和生物活性有直接关系。本文应用柱后荧光衍生法对911的M／G比值进行了快速准确测定，方法的精密度达到0．4％，优于以紫外检测的高效液相法。由于已有的定量检测方法灵敏度限制，一直没有合适的9ll微量分析方法。文章首次利用柱后衍生的高效液相色谱法对91l进行微量定量分析，检测限达到ng级水平

3、，确定了标准曲线及线性范围，建立了911的微量定量分析方法。该研究结果可应用于质量标准的控制，柱后衍生法的建立为色谱法研究药代动力学参数奠定了基础。关键词：硫酸多糖9l1，荧光衍生，盐酸胍，高效液相色谱．柱后衍生法，微量分析ResearchOilMicroanalysisMethodofSulfatedPolysaccharideDrug91Abstract911isamarinesulfatedpolysaccharidedrugwithgoodanti—HIVactivity．whichisderivedfrombrownalgae．

4、Thephysicalandchemicalcharacteristicsof91lareanalyzedsystematically．Themolarrmioofsulfateionstocarboxylateionsisdeterminedbyconductometrictitrationmethodandthemolecularweightistestedbyhighperformancegelpermeationchromatography(HPGPC)．Theprecisionofthesetwomethodsisalsostu

5、died．Toimprovethedetectionsensitivity．guanidinehvdrochlorideisusedasthebestderivationreagentof9l1．Asystematicresearchisdoneontheoptimumderivatizationconditionof91landGuanidinehydrochloride．TheM／Gratioof91lhasdirectrelationtoitsbiologicalactivity．Post-columnfluorescenceder

6、ivatizationissuccessfullyappliedtodeterminetheM／Gratioof911．Themethodissimple．sensitiveandtheprecisionis0．4％．beaerthanUVdetectionofHPLC．Thereisnoappropriatemicroanalysismethodfor91lbecauseofthesensibility1imitationoftheknownquantitativedetecfionmethods．InthisPaDer，post．co

7、lumnfluorescentdefivationHPLCiSfirstlyusedtoanalyze911．thedetectionlimitCanreachnglevel．standardcurveandlinearityrangearedetermined．ThismicroanalysismethodiSalsoroughlyusedtoanalysis911intheserum．Theresearchresultsof911Canbeappliedtoitsqualitycontr01．Post．columnderivatiza

8、tionmethodprovidesthebasisofpharmacokineticstudyingbychromatography．Keywords：PoIysaccharideDrug9