沈敏《酵母菌种群数量的变化》

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1、探究“培养液中酵母菌种群数量的变化”1实验学习内容实验原理实验设计思路实验步骤实验注意事项实验结论血球计数板计数对照实验设置实验数据记录表设计2实验原理思考：1、酵母菌的呼吸方式。2、酵母菌在液体培养基中繁殖其种群数量受哪些因素影响。3、酵母菌种群数量增长的曲线类型。3实验设计思路思考：如何设置对照实验探究“酵母菌种群数量变化”？提示：从影响实验室中培养的酵母菌的因素来考虑4实验设计思路试管编号ABC试管内液体温度条件对照实验设置28℃5℃28℃培养液无菌水酵母菌100.1100.1100.15实验步骤（1）向三支试管中加入培养液

2、或无菌水（2）向三支试管中接种酵母菌（3）将三支试管在不同的温度下培养（4）每天取样计数酵母菌（5）分析数据画出曲线6血球计数板计数7（1）计数工具——血球计数板实物图正面图侧面图计数室滴液处血球计数板是一种专门用于计算较大单细胞微生物的一种仪器。计数时，常采用样方法。血球计数板计数8（1）计数工具——血球计数板放大后的计数池每块计数板由H形凹槽分为2个同样的计数池。每个计数池分为9个大方格。血球计数板计数925个中格16个小格16个中格25个小格25X16=400小格16X25=400小格每个计数室（大方格）共有400小格，总容

3、积为0.1mm3*********抽样检测：5×16=80个小格抽样检测：4×25=100个小格10血球计数板计数思考：1、使用16×25规格时计数几个中方格中的细胞数？即个小方格中的细胞数？2、设每个中方格中的细菌数分别是：A1，A2，A3，A4，稀释倍数为：B，则样品中细胞数/ml是多少？4个中方格，100个小方格（A1+A2+A3+A4）/100×4000000×B11（2）计算：每毫升培养液中的酵母菌细胞数是多少？酵母细胞个数/mL=所数小方格中细胞总数x400x104x稀释倍数所数的小方格数12实验数据记录连续多天统计，

4、每天统计多次。请设计实验数据记录表格时间次数1234567123平均值13酵母菌培养：培养液配制灭菌接种培养配制质量分数为5％的葡萄糖溶液（葡萄糖20g，1000mL水），分装到5个烧杯中（200mL/烧杯）用高压蒸汽灭菌锅将培养液和取样、计数时所用的滴管分别灭菌。贴标签。接种时要在酒精灯附近，用灭菌干净的1mL刻度吸管每次吸取0.1mL酵母菌母液，往每个烧杯中加入。（注意：滴加量不要太多，避免初始菌数过多。）将烧杯置于28℃的恒温箱中培养无菌操作讨论：计数前还应有哪些步骤？需注意些什么？14实验注意事项1、从试管中吸取培养液进行

5、计数前，为什么需将试管轻轻震荡几次？2、若一个小方格内酵母菌数过多，难以数清，则如何处理？使培养液中酵母菌均匀分布，以保证估算的准确性，减少误差。将培养液稀释一定的倍数，再重新计数。15注意事项：进行计数前，应先将试管摇匀，目的是使酵母菌在培养液中混合均匀，以减少计数误差。显微镜计数时，对于压在小方格界线上的酵母菌，应取相邻两边及顶角计数。若一个小方格内酵母菌数量过多，难以数清时，则可将培养液稀释一定倍数后再计数。本实验无对照实验，酵母菌每天的数量变化可形成前后对照。血球计数板使用后，切勿用硬物洗刷，可采用浸泡和冲洗的方法清洗。实

6、验注意事项16试管编号培养液/mL无菌水/mL酵母菌母液/mL温度（℃）A10—0.128B10—0.15C—100.128实验结果分析17实验结果分析1、分析酵母菌种群数量变化趋势的原因2、分析影响酵母菌种群数量的因素。养料、温度、pH及有害代谢废物等数量时间18实验再探究培养空间、氧气会影响酵母菌的生长吗？（2008年江苏卷31题）为研究酵母菌种群密度的动态变化，某同学按下表所列条件进行了A、B、C和D共4组实验，用1000mL锥形瓶作为培养器皿，棉塞封口，在25℃下静置培养，其他实验条件均相同，定时用血球计数板计数。根据实验

7、结果绘出的酵母菌种群密度变化曲线图如下。19例2:酵母菌的计数通常用血球计数板进行，血球计数板每个大方格容积为0.1mm3，由400个小方格组成。现对某一样液进行检测，如果一个小方格内酵母菌过多，难以计数，应先后再计数。若多次重复计数后，算得每个小方格中平均有5个酵母菌，则10mL该培养液中酵母菌总数有个。例1:在用血球计数板（2mm×2mm方格）对某一稀释50倍样品进行计数时，发现在一个计数室内（盖玻片下的培养液厚度为0.1mm）酵母菌平均数为16，据此估算10mL培养液中有酵母菌个。2x1072×108稀释20例3检测员将1m

8、L水样稀释10倍后，用抽样检测的方法检测每毫升蓝藻的数量；将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取少许培养液使其自行渗入计数室，并用滤纸吸去多余液体。已知每个计数室由25×16＝400个小格组成，容纳液体的总体积为0．1mm3。现观察到图中该计数室所示a、