人体疟原虫镜检技术

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1、人体疟原虫镜检技术沈毓祖安徽省疾病预防控制中心一、概述疟原虫属原生动物亚界的单细胞真核生物。在生物界的位置:疟原虫为原生动物门、孢子纲、血孢子目、疟原虫科、疟原虫属。疟原虫有149种,自然界感染人体的疟原虫只有四种:即间日疟(Pv)、恶性疟(Pf)、三日疟(Pm)、蛋形疟(Po)四种。二、疟原虫生活史1、红细胞外期2、红细胞内期3、子孢子增殖期周围血液中各种血细胞的形态薄血膜疟原虫形态特征1、间日疟:环状体、滋养体、裂殖体、配子体2、恶性疟:环状体、配子体小滋养体(环状体)间日疟恶性疟约为红细胞直径的1/3,环较粗大;

2、核1个,2个核和一个红细胞寄生2个环状体不如恶性疟原虫多见。约为红细胞的1/6;环纤细,核1-2个,一个红细胞寄生2个环状体的常见。薄血膜间日疟环状体服药后形态改变的间日疟原虫薄血膜间日疟环状体恶性疟薄血膜环状体薄血膜恶性疟环状体薄血膜恶性疟环状体三日疟原虫环状体卵形疟原虫环状体大滋养体间日疟恶性疟虫体不规则,较大;阿米巴样,空泡明显;疟色素细小,黄褐色。较小,圆形;空泡小;早期疟色素细小,金黄色,晚期结成块状,黄褐色。间日疟滋养体薄血膜间日疟滋养体薄血膜间日疟滋养体间日疟环状体、滋养体、三日疟滋养体(呈带状)裂殖体前

3、期间日疟恶性疟圆形或不规则,核分裂为2个以上,空泡消失;疟色素分布不匀。圆形,核分裂为2个以上;疟色素集成团块。薄血膜间日疟未成熟裂殖体裂殖体间日疟恶性疟大于正常红细胞;裂殖子12-24个,通常16个,排列不规则,疟色素常集于一侧,黄褐色。小于正常红细胞;裂殖子较小,8-26个,通常8-18个,排列不规则,疟色素成团块状,黑褐色。薄血膜间日疟成熟裂殖体薄血膜间日疟成熟裂殖体薄血膜间日疟成熟裂殖体卵形疟雌配子体间日疟恶性疟大于正常红细胞,圆形;核小,致密,深红色,偏于一侧,胞浆深蓝色;疟色素散在。新月形,两端较尖;核小,

4、致密,深红色,位于中央;胞浆深蓝色;疟色素围于核周。雄配子体间日疟恶性疟大于正常红细胞,圆形;核大,疏松,浅红色,多位于中央;胞浆浅蓝色或淡红色;疟色素散在。腊肠形,两端钝圆,核大,疏松,淡红色,位于中央;胞浆浅蓝色或浅红色;疟色素位于核周。薄血膜配子体薄血膜配子体恶性疟配子体恶性疟配子体恶性疟配子体大配子体与大滋养体的形态区别间日疟2、厚血膜上疟原虫形态特征2.1环状体(R)2.1.1间日疟环状体2.1.2恶性疟环状体2.2滋养体(T)2.2.1间日疟滋养体2.2.2恶性疟滋养体2.3早期裂殖体(早S)2.3.1间日

5、疟裂殖体2.3.2恶性疟裂殖体2.4晚期裂殖体2.4.1间日疟晚期裂殖体2.4.2恶性疟晚期裂殖体厚血膜间日疟原虫形态厚血膜间日疟原虫形态厚血膜间日疟原虫形态厚血膜间日疟原虫形态厚血膜间日疟滋养体间 日 疟 环 状 体图注:本片上、下、左、右各有一个疟原虫。上、右、左均为大小不同的环状体;下为大滋养体,虫体已断裂成数块,但可见有薛氏点的红细胞残骸间日疟本片中部有两个白细胞,在其左上方、左下方各有一个大滋养体;其右上方有两个大滋养体,胞浆皆已绉缩成数块,但皆有红细胞残骸可见间日疟虫体位于本片中部,胞浆皱缩为多块,色素聚集

6、于虫体右上方;本虫上方为一个大滋养体滋养体裂殖体间日疟厚血膜恶性疟环状体厚血膜间日疟原虫形态7个环状体散在于5个白细胞之间,每个虫体可见一个红色的核和蓝色断裂的或皱缩的原浆恶性疟2.5配子体(G)2.5.1间日疟配子体2.5.1.1完整的配子体2.5.1.2浆裂断收缩,核与色素如常2.5.1.3浆已腐蚀消失,仅有核与色素2.5.1.4核消失,仅有浆与色素2.5.l.5核浆均已消失。仅有色素颗粒,以其沿边分布   的特点即可确认2.5.2恶性疟配子体2.5.2.1正常配子体2.5.2.2圆形配子体2.5.2.3梭形(枪形

7、)配子体2.5.2.4腐蚀的配子体厚血膜恶性疟配子体四、疟原虫与其它物体的鉴别1.血小板2.染液残渣3.幼红细胞残骸4.白细胞的破碎残骸5.疑似原虫胞浆6.疑似疟色素7.疑似疟原虫核五、镜检工作所需注意的事项1、在镜检中显微镜的使用:油镜、凹镜、视野需按一宝顺序逐个检查。2、疟原虫镜检工作中,凡是发热病人。疟疾、疑似疟疾、及不明原因的发热病人均需进行疟原虫镜检。3、做好镜检登记:凡是镜检疟原虫的均需如实登记,阴、阳性片保存待考核。4、每一个月上报一次镜检数。包括镜检人数、阳性、阴性。5、如发现恶性疟以嘴快的通信方法,在

8、24小时内报县、市、省疾病预防控制机构,阳性血片留待上级复核。六、血片制作与染色1、血片的清洁新的载皮片必须洗洁净后才可直接浸于95%的酒精中,然后一一取出,用软而洁净并没有棉花毛的细布擦干,擦亮,妥善放置,勿使灰尘沾污。用过的载玻片可用5%之煮沸肥皂水洗涤,将玻片一张一张的放入其中待肥皂水稍冷后,用毛刷或纱布细心拭擦。再用清水漂

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