HSP70反义寡脱氧核苷酸增强宫颈癌和卵巢癌细胞的热敏感性

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1、HSP70反义寡脱氧核苷酸增强宫颈癌和卵巢癌细胞的热敏感性中华肿瘤杂志2000年第2期第22卷基础研究作者：赵霞　魏于全单位：赵霞（华西医科大学附属第二医院妇产科，成都，610041）；魏于全（华西医科大学附属第一医院肿瘤生物治疗中心肿瘤防治中心）　　关键词：宫颈肿瘤；卵巢肿瘤；反义寡脱氧核苷酸；热敏感性　　【摘要】　目的　观察HSP70反义寡脱氧核苷酸对宫颈癌细胞和卵巢癌细胞热敏感性的影响。方法　计数集落形成率，了解宫颈癌细胞和卵巢癌细胞的热敏感性。用光镜、琼脂糖凝胶电泳及流式细胞术观察凋亡细胞。结果　经HSP70反

2、义寡脱氧核苷酸预先处理的细胞增强了对热处理的敏感性，热敏感性的增加与HSP70反义寡脱氧核苷酸的处理剂量相关。用形态学、琼脂糖凝胶电泳及流式细胞术均证实经HSP70反义寡脱氧核苷酸及热处理的细胞发生了凋亡。凋亡的发生率与HSP70反义寡脱氧核苷酸的处理剂量相关。结论　HSP70反义寡脱氧核苷酸能增强宫颈癌细胞和卵巢癌细胞的热敏感性，增强这种热敏感性的可能机理是协同诱导细胞凋亡。IncreaseinthermosensitivityofcervicalcancerandovariancancercellsbyHSP70a

3、ntisenseoligodeoxynucleotidesZHAOXia,WEIYuquan.　　（DepartmentofObstetricsandGynecology,SecondAffiliatedHospital,WestChinaUniversityofMedicalSciences,Chengdu610041,China）　　【Abstract】　Objective　ToinvestigatethethermosensitizingeffectofHSP70antisenseoligodeoxynucleo

4、lides(ODN)oncervicalandovariancancercells.Methods　CervicalcancercelllineHelaandovariancancercelllineMCASwereusedtostudytheirsensitivitytoheat(42℃,1hr)treatment.Heat-inducedchangesincellviabilitywasassessedbycolonyformationassayandapoptosisbycellmorphology,agaros

5、egelelectrophoresisandflowcytometry.Results　ThermosensitivityofHelaandMCAScellspretreatedwithHSP70antisenseODNwasincreasedascomparedtocellstreatedwithheatalone.Theincreasewasantisensedosedependent.AlthoughheattreatmentorantisenseODNdidinduceapoptosisofHeLaandMCA

6、Scells,thepercentageofapoptoticcellswassignificantlyincreasedwhenbothheatandantisenseODNwereapplied.TheeffectwasdependentonthedoseofHSP70antisenseODN.Conclusion　ThethermosensitivityofovariancancercellsandcervialcancercellscanbeincreasedbyHSP70antisenseoligomer.A

7、poptosismaybeinvolvedintheincreaseinthermosensitivity.　　【Subjectwords】　Cervicalneoplasms;　Ovarianneoplasms;　Antisenseoligodeoxynucleotides;　Thermosensitivity　　温热疗法已用于许多恶性肿瘤的临床治疗，取得了较好疗效，尤其是对局部肿瘤的控制［1］。如何进一步提高温热治疗的效果，即提高肿瘤细胞对热的敏感性，仍是目前研究的重要课题。我们通过用HSP70反义寡脱氧核苷酸阻断

8、宫颈癌细胞和卵巢癌细胞HSP70基因表达，抑制HSP70蛋白的合成，以增强恶性肿瘤细胞对温热治疗的敏感性。　　材料与方法　　1.合成和纯化HSP70寡脱氧核苷酸：抗核酸酶的硫修饰的反义寡脱氧核苷酸用381DNA自动合成仪合成，用高压液相色谱及反相色谱纯化。HSP70特异的反义寡脱氧核苷酸链(5-CGCGGCTTTGG-CCAT-3