资源描述：
《色谱技术在药物分析的应用反相HPLC在药物分析中的应用》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、反相HPLC在药物分析中的应用（成都●2010/09）曾伟杰leo@gzflm.comtechnic@gzflm.com广州菲罗门科学仪器有限公司GuangzhouFLMScientificInstrumentCo.,Ltd●方法开发前要确定的基本问题●色谱柱的选择●流动相的选择●样品前处理的新方法●色谱柱使用维护的建议广州菲罗门科学仪器有限公司GuangzhouFLMScientificInstrumentCo.,Ltd●方法开发前要确定的基本问题1、分析物的物理、化学性质样品基质----决定前处理方法溶解性----决定正、反相方法酸碱性----确定色谱柱类型、流动相组成pK
2、a----确定流动相的pH值化学结构、特征官能团、Etc.广州菲罗门科学仪器有限公司GuangzhouFLMScientificInstrumentCo.,Ltd●方法开发前要确定的基本问题2、混合分析物的主要差异疏水性差异----用疏水性选择性强的色谱柱极性差异----用具有极性选择性的色谱柱芳香性差异----用芳香选择性色谱柱混合差异----用多种选择型色谱柱分子量差异----GPC、GFC广州菲罗门科学仪器有限公司GuangzhouFLMScientificInstrumentCo.,Ltd●方法开发前要确定的基本问题3、选用何种分析方法HPLC-UVHPLC-IRHPL
3、C-MSHPLC-ELSDEtc.广州菲罗门科学仪器有限公司GuangzhouFLMScientificInstrumentCo.,Ltd●色谱柱的选择1、色谱柱的基本技术参数固定相----决定选择性硅胶纯度（金属含量）----影响峰形粒径----影响柱效、柱压碳载量----影响保留时间孔径----孔径大，比表面积小比表面积----影响载样量pH范围-----决定灵活性封尾基团----影响峰形、保留广州菲罗门科学仪器有限公司GuangzhouFLMScientificInstrumentCo.,Ltd硅胶纯度（金属含量）Columns:A型硅胶(=旧型号)B型硅胶(Gemini
4、™5µmC18)Mobilephase:10mM甲酸铵pH3.5:乙腈:甲醇（35:15:50）Flowrate:1.0mL/minComponents:1.Rhodamine1232.Rhodamine6G3.RhodamineBBase玫瑰精,若丹明(一种红色荧光染料)广州菲罗门科学仪器有限公司GuangzhouFLMScientificInstrumentCo.,Ltd广州菲罗门科学仪器有限公司GuangzhouFLMScientificInstrumentCo.,Ltd色谱图广州菲罗门科学仪器有限公司GuangzhouFLMScientificInstrumentCo.
5、,LtdA型硅胶C18化合物被吸收B型硅胶（GeminiC18)峰形、峰高、分离正常金属的影响（1）广州菲罗门科学仪器有限公司GuangzhouFLMScientificInstrumentCo.,Ltd金属的影响（2）广州菲罗门科学仪器有限公司GuangzhouFLMScientificInstrumentCo.,LtdPhenomenex典型B型硅胶色谱柱广州菲罗门科学仪器有限公司GuangzhouFLMScientificInstrumentCo.,Ltd2、疏水选择性色谱柱---广泛应用于各类药物分析经典C18----LunaC18GeminiC18(pH1~12)其他
6、：C12、C8、C6、C5、C4广州菲罗门科学仪器有限公司GuangzhouFLMScientificInstrumentCo.,LtdLunaC18（2）----亚甲基选择性广州菲罗门科学仪器有限公司GuangzhouFLMScientificInstrumentCo.,Ltd世界#1色谱柱（1）、反相方法开发的理想色谱柱*高纯硅胶基质，金属含量＜55.0ppm*反相键合固定相pH稳定范围1.5-10,1~12*反相键合固定相TMS封尾，自由硅醇基极低*多种固定相可以选择广州菲罗门科学仪器有限公司GuangzhouFLMScientificInstrumentCo.,Ltd广
7、州菲罗门科学仪器有限公司GuangzhouFLMScientificInstrumentCo.,Ltd（2）、GMP认证企业QC首选色谱柱*世界上首次具有MVD(MaterialValidationDocument)证明文件的色谱柱*每支色谱柱都有唯一的检测证书，每支色谱柱都可以溯源*出色的柱-柱、批-批重现性广州菲罗门科学仪器有限公司GuangzhouFLMScientificInstrumentCo.,Ltd应用实例：注射用头孢唑林钠色谱柱：GeminiC185u250x4.6mm方法：
