Smad5基因在小鼠耳蜗胚胎发育中的作用

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1、Smad5基因在小鼠耳蜗胚胎发育中的作用【摘要】目的 检测Smad5基因在小鼠耳蜗胚胎发育中的作用。方法 选用耳廓反应灵敏、健康的C57BL/6小鼠作为种鼠交配,用观察阴栓方法获得胚胎9天到20天的胎鼠,≤17天取胚胎头,≥18天在显微镜下取耳蜗,胚胎头水平冰冻切片,耳蜗平行于蜗轴冰冻切片,HE染色方法观察小鼠内耳发育形态演变过程,免疫组织化学方法检测Smad5蛋白在小鼠胚胎10~20天的表达情况。结果 胚胎10天,听泡发育,胚胎12天听泡下部有蜗管始基形成并开始发育。胚胎18天,蜗管发育了2圈,形成了可以辨认的内、外毛细胞,血管纹开始

2、分化。Smad5在小鼠内耳胚胎发育全程均有阳性表达,且表达比较广泛,尤其早期在整个听囊均有表达。在胚胎15~17天,主要集中在即将发育成基底膜听觉感受器的部分。在胚胎发育中后期在内外毛细胞、螺旋神经节细胞、支持细胞、血管纹、基底膜、前庭膜等也有表达。结论 Smad5参与小鼠耳蜗胚胎发育全过程,它可能为听觉的发生所必需的基因。【关键词】Smad5基因; 内耳; 发育; 耳蜗; C57小鼠; 免疫组化RoleofSmad5intheembryonicdevelopmentofthemousecochleaYUYa-ping,YANGShi-

3、ming,HUYin-yan,GUOWei,SUNJian-he,YUNingHANDong-yi,YANGWei-yanDepartmentofOtolaryngologyandHead&NeckSurgery,InstituteofOtolaryngology,ChinesePLAGeneralHospital,Beijing100853,China【Abstract】 ToexploretheroleofSmad5inthedevelopmentprocessoftheembryonicmousecochlea.Methods E

4、mbryoswereisolatedfromtimed-pregnantC57BL/6mice(1dpc=Vaginalplug).FrozensectionsfromembryoswereprocessedforHEstainingtoobservethemorphologicalchangeofembryonicmousecochleaandforimmunohistochemistrytodeterminetheexpressionofSmad5.Results Atthetenthdayofgestationtheotocyst

5、wasaclosedovoidsac.Thecochlearductstartedtodevelopatthetwelfthdayofgestationasanextensionoftheventralpartoftheotocyst.Attheeighteenthdaytheinnerandouterhaircellswereidentified.Smad5genewasexpressedextensivelyinthecochleathroughoutthewholegestation.Fromthefifteenthtoseven

6、teenthdaySmad5expressionwasconcentratedintheparttobegoingtodevelopintoauditoryreceptororganonthebasalmembrane.Later,Smad5wasexpressedinthesupportingcells,haircells,spiralganglion,Reissner’smembraneandepitheliumofstriavascularis.Conclusion TheSmad5existsinthemouseco

7、chleathroughoutthewholegastationandmightplayanimportantroleinthedevelopmentofmouseinnerear.【Keyword】 Smad5; Innerear; Development; Cochlea; C57mouse; ImmunohistochemistrySmad5是新近发现的参与转化生长因子-β(transforminggrowthfactor-β,TGF-β)信号下游的细胞质内信号转导分子,属于受体激活型Smads,它主

8、要介导BMP的信号。先前的研究发现,TGF-β超家族中的骨形态形成蛋白(bonemorphogeneticproteins,BMPs)在脊椎动物的内耳形成中起着至关重要的作用[1-2]。Smad5

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