Galectin-3、MMP-2蛋白在子宫内膜样腺癌中的表达及临床意义

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1、Galectin-3、MMP-2蛋白在子宫内膜样腺癌中的表达及临床意义作者：吕敬媛，庄国丽，卢北燕单位：佳木斯大学第一附属医院妇产科，黑龙江佳木斯154003【关键词】子宫内膜腺癌；Galectin-3；MMP-2；免疫组化Galectin-3对β-半乳糖苷具有高度亲和性，可选择性识别糖结构并与之非共价结合，具有识别、调节细胞增殖、调节细胞粘附、调节细胞凋亡等功能。目前研究表明它在多种肿瘤中表达异常［1］，包括甲状腺癌、胃癌、大肠癌、乳腺癌等，与肿瘤的发生、演进密切相关，且与肿瘤的转移相关，

2、但鲜见子宫内膜样腺癌方面的相关报道。本研究应用免疫组织化学方法，探讨子宫内膜腺癌组织中此蛋白的表达情况与临床病理参数及MMP-2蛋白在子宫内膜样腺癌中表达的关系。1材料和方法1.1实验材料收集佳木斯大学第一附属医院2006～2008年间子宫内膜样腺癌所有存档蜡块，应用随即数字法随机抽取60例，所有患者术前均未作过任何化疗、放疗或性激素类药物等治疗，其中所有标本的临床和病理资料均完整。患者平均年龄52岁；35例已绝经，25例未绝经；按照1971年国际妇产科联盟（FIGO）手术－病理分期标准：Ⅰ～Ⅱ期34

3、例，Ⅲ～Ⅳ期26例；组织学分级：高分化（G1）17例，中分化（G2）20例，低分化（G3）23例；侵及子宫壁浅肌层（＜1/2肌层）者31例，侵及深肌层（≥1/2肌层）者29发生淋巴结转移者7例，无淋巴结转移者53例。另取正常子宫内膜组织18例、非典型增生性子宫内膜组织23例作为对照。1.2主要试剂　　鼠抗人Galectin-3浓缩型单克隆抗体，购自上海长岛生物技术有限公司；鼠抗人MMP-2即用型单克隆抗体购自福州迈新生物技术有限公司。1.3实验方法Galectin-3采用免疫组织化学二步法，以乳

4、腺癌作为阳性对照，PBS代替一抗作阴性空白对照。石蜡包埋组织作4μm厚的切片，石蜡切片经二甲苯脱蜡，酒精梯度水化后在10mM，pH6.0的柠檬酸缓冲液中煮10～20min，室温下冷却20min；3%过氧化氢处理切片5min（在水中）后水洗；PBS洗三次，每次2min；加1：10Galectin-3一抗一滴，室温放置60min；再用PBS洗三次，每次2min；DAB显色5～10min后苏木素复染，脱水，封片。MMP-2采用常规S-P法，按照试剂盒说明书进行操作。　　1.4结果评定　　参考师建国［2

5、］的评估标准：每例切片选取细胞密集的区域，连续观察高倍视野，对肿瘤细胞进行细胞计数，每个视野计数50个细胞，共1000个细胞，通过计算着色细胞所占比例及评定着色强度而分级。①无着色细胞、背景同阴性对照或者阳性细胞比例不超过5％者为阴性(－)；②阳性细胞呈淡棕黄色和/或阳性细胞率<50％者为弱阳性(＋)；③阳性细胞呈深棕黄色和/或阳性细胞率≥50％者为强阳性(＋＋)；阳性细胞的判断标准：免疫组化的阳性表达均为各自染色条件下结构完整、定位明确、染色对比清晰的棕黄色细胞。为便于统计，将(＋)和(

6、＋＋)统归为阳性。Galectin-3和MMP-2均以胞质内出现棕黄色或棕褐色颗粒为阳性染色细胞。　　1.5统计学处理采用SPSS13.0统计软件中的χ2检验、Fisher′s确切概率法进行统计学处理，相关性分析采用Spearman等级相关分析，统计学意义水平界定为P＜0.05。2结果2.1Galectin-3与MMP-2蛋白的表达情况Galectin-3主要在癌细胞的胞浆表达,部分癌细出现核表达。Galectin-3蛋白在三组组织之间比较有显著统计学差异（χ2=30.10

7、19，P＜0.01），Galectin-3在子宫内膜样腺癌中的表达明显高于正常子宫内膜组和不典型增生组（P＜0.05），MMP-2蛋白的表达主要定位于子宫内膜腺上皮细胞的胞浆，呈棕黄色颗粒，弥漫性或局灶性分布。MMP-2蛋白的表达阳性率从正常子宫内膜、非典型增生性子宫内膜到子宫内膜样腺癌组织逐渐升，有统计学意义（χ2=26.2994，P＜0.01），在正常子宫内膜中表达最低而在子宫内膜样腺癌中表达最高。见表1。表1Galectin-3与MMP-2在不同子宫内膜组织中的表达（略）　　2.2子宫内

8、膜样腺癌中Galectin-3与MMP-2的表达与临床病理学参数的关系Galectin-3蛋白、MMP-2蛋白的表达与患者年龄、绝经与否及有无淋巴结转移之间无关（P＞0.05），与患者的临床分期、病理分级、肌层浸润深度有关（P＜0.05）。见表2。　　2.3Galectin-3与MMP-2蛋白在子宫内膜样腺癌中表达的相关性Galectin-3与MMP-2蛋白在子宫内膜样腺癌组织中的表达呈正相关（rs＝0.5699，P<0.01）。表3Galecti