肉及肉制品中猪、牛、羊、马、驴、鸡、鸭、鹅、兔源性成分的快速鉴定 实时pcr法 编制说明

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1、肉及肉制品中猪、牛、羊、马、驴、鸡、鸭、鹅、兔源性成分的快速鉴定实时PCR法编制说明一、任务来源本标准由中华人民共和国商务部提出并归口，由商务部流通产业促进中心实验室生物检测室研究小组完成方法的建立优化、标准的起草制定工作。二、编制依据本标准遵循GB/T1.1-2009《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写》、GB/T20001.4-2001《标准编写规则第4部分：化学分析方法》的编写规则、GB/T6379《测量方法与结果的准确度（正确度与精密度》第2部分：确定标准测量方法重复性与再现性的方法》。三、目的

2、和意义随着市场经济的不断深入发展，部分不法商贩为了谋求不正当利益，在肉（制）品中掺杂其他价格便宜的肉种，在肉（制）品市场出现了一种“以次充好、以假乱真”的现象。通过实验室前期大量的调查研究分析，我们发现肉（制）品中掺杂、掺假的现象已经十分普遍，大部分肉（制）品中掺有标称以外的其他价格便宜的动物源性成分，有的甚至全部为标称以外的其他价格便宜的动物源性成分。这极大地损害了消费者的利益，扰乱了流通市场秩序和健康发展，同时也对民族宗教信仰造成一定的潜在冲突。43但目前，相应的检测鉴定方法标准的缺失，使得检测监测机构对

3、此无标可依，无法可循，难于判断和裁决。为了规范国内市场流通秩序，保证市场的正当竞争，保护消费者的经济利益和对所购买商品的选择权、知情权及宗教信仰归属，制定本检测标准。四、编制过程《肉及肉制品中猪、牛、羊、马、驴、鸡、鸭、鹅、兔源性成分的快速鉴定实时PCR法》该方法标准由商务部流通产业促进中心起草编写。经过中国科学院微生物研究所、中国农业科学院饲料研究所、中国农业大学食品科学与营养工程学院三家单位进行了方法的复核验证实验，并提交了具体的复核验证报告。根据国家有关标准制定和修订工作的要求，商务部流通产业促进中心在

4、《肉及肉制品中猪、牛、羊、马、驴、鸡、鸭、鹅、兔源性成分的快速鉴定实时PCR法》的起草编制过程中，主要工作包括以下几个方面：1、详细查阅了国内、国外有关标准和相关专业期刊上发表过的参考文献等技术资料，如食品、化妆品和饲料中牛、羊、猪源性成分检测方法及动物源性饲料中哺乳动物源性成分定性检测方法等国内已申请的相关检验报告，并对这些资料进行了详细的对比，从方法的先进性、可靠性和实用性等几个方面考虑，选取了几个代表性的参考资料作为标准起草中的主要技术参考文本。2、及时购置相关的实验试剂、标准品和其他材料；设计了实时荧

5、光PCR方法检测动物源性成分的特异性引物和探针，并对其特异性进行了实验验证；摸索不同条件对引物对、探针及模板的浓度进行优化；对检测灵敏度和检测底限进行了确证43；对混合肉样进行了鉴别试验。最终确定了最佳的检测方法，并确保本方法可以特异、灵敏、准确地对肉及肉制品中的动物源性成分进行快速、实时地鉴别。3、在技术指标完成试验工作之后，严格按照标准编写要求的体例格式，起草编写标准文本和编制说明。4、向相关行业的30多位专家、学者、教授、技术人员、从业人员、管理人员等进行了意见征求。收到意见后尽快参考反馈意见，根据实际

6、情况，吸收正确、可行的建议或意见，并在标准征求意见稿中进行进一步修改和完善。5、向中国科学院微生物研究所、中国农业科学院饲料研究所、中国农业大学食品科学与营养工程学院三家单位提供标准方法的文稿和编制说明，提出了验证复合的要求，进行了方法的验证。三家单位都具有相应的检测设备，具备专业的生物学检测技术与丰富的检测经验。经过复核单位的独立、科学和严格的复核验证后，提供了三份复核验证报告。五、标准验证工作总结根据国标委主管部门的要求，起草小组按照标准所涉及的实验内容，制备了相应的实验材料，并编写了《肉及肉制品中猪、牛

7、、羊、马、驴、鸡、鸭、鹅、兔源性成分的快速鉴定实时PCR法（验证说明）》，邀请了中国科学院微生物研究所、中国农业科学院饲料研究所、中国农业大学食品科学与营养工程学院等三43家科研单位，对该标准的技术原理、方法路线、方法特异性及方法灵敏度等方面进行了客观地验证试验和评价。验证工作结束，起草小组将回收的大量验证数据和实验图片整理归纳，形成了《参加验证单位对标准方法的建议评价汇总表》和《验证试验结果汇总》，并本着科学认真的态度对相应的建议和意见进行处理，在标准中作相应修改。通过严谨认真的实验验证及对标准文字材料进行

8、的审核，3家单位一致认为该标准技术路线科学合理、方法灵敏度高、特异性强，标准科学、简单、实用，易于推广，建议尽早申报发布实施。六、标准技术方面说明（一）方法概述及原理在新的形势下，对肉（制）品中肉种的鉴别，传统感官方法对肉（制）品色泽、气味、组织性状等进行判断，显得可靠性、科学性不足。尤其对一些添加了色素、芳香剂的肉（制）品，及加工处理过的肉制品，感官判断更显得难度高和风险性大。本标准方法以分子生物