透明质酸钠在角膜保存中的作用研究

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1、重庆医科大学硕士学位论文透明质酸钠在角膜保存中的作用研究姓名：杨娟申请学位级别：硕士专业：眼科学指导教师：赵敏2003.4.1重庆医科大学硕士毕业学位论文符号SHHAHASh心ⅨM．199HEPEsSDHG-6-pNBTDMS0ECMICMPMCmRNACD44ODFRPBS1]EMs】jM符号说明英文SodiumHyaluronateHyaluronauacidHyaluronidaseModifiedMcCarey-kaufman199medium／Earle’SbalancedsaltsHydr

2、oxyethylpiperazineethanesulfonicacidSuccinatedehydrogenaseOlucose-6-phosphataseNitrobluetetrazofiumDimethysulfoxideExtracellularmatrixhtercellularmatrixPericellularmolecularcageMessengerribonucleicacidreceptorforHAOxygen=derivedfreeradicalPhosphatebuffe

3、redsalineTransmissionelectronmicroscopeScanningelectronmicroscope中文透明质酸钠透明质酸及其盐透明质酸合成酶改良M-K液199培养基但ade，s平衡盐羟乙基哌嗪磺酸琥珀酸脱氢酶葡萄糖．6-磷酸酶氯化硝基四氮唑兰二甲基亚砜细胞外基质细胞间质细胞周分子笼蔽信使核糖核酸HA受体氧衍生的自由基磷酸盐缓冲液透射电镜扫描电镜重庆医科大学硕士毕业学位论文透明质酸钠在角膜保存中的作用研究摘要目的：研究透明质酸钠(sI-D在角膜保存中的作用，探讨其在短期和

4、中期角膜保存中对角膜内皮细胞结构和功能的影响，以期改进角膜保存的方法和提高保存角膜的质量。，／方法：(1)短期保存：新西兰大白兔新鲜眼球分三组：(1)A组：抽空L房水同时前房内注入1％SH0．25ml；(2)13组：前房不作处理；(3)c组：抽空房水同时前房内注入过滤空气O．25ml。三组眼球均放入湿房容器密封4℃保存。分别于保存前，保存后24、48、72、96h对角膜行大体形态和裂隙灯显微镜观察，活体内皮显微镜检查，苔盼兰．茜素红染色检测角膜内皮细胞活性。(2)中期保存：自制改良中期保存液MMK(参

5、考M．K液配方)，在此基础上，加入SH，制成保存液I、II、Ⅲ(为实验I、Ⅱ、Ⅲ组：SH浓度分别为0．05％、O．03％、O．01％)，于4℃下保存新西兰大白兔角膜，以未加SH的MMK液作对照并作组间对照。于保存3、5、7、10d，30．34"(22h复温后，行苔盼兰．茜素红染色检测角膜内皮细胞活性，酶组织化学染色检测SDH、G．6-P酶活性，TEM和SEM观察角膜内皮细胞超微结构变化。结果：(1)短期保存：保存后243．：A组角膜表面光滑，透明度高，重庆医科大学硕士毕业学位论文无水肿增厚，后弹力层无

6、皱褶，B组角膜轻度水肿增厚，后弹力层出现皱褶48h：A组角膜仍很透明，无水肿增厚，后弹力层无皱褶，角膜内皮细胞形态好数量多，而B组眼球变软，前房变浅，角膜明显混浊水肿，后弹力层皱褶多，角膜内皮细胞明显减少并有较多黑区，与A组比较有显著性差异(P<0．01)。72、96h：A组角膜仍透明，仅轻微水肿(96h)，后弹力层无明显皱褶，角膜内皮细胞数量较多形态较好，而B组眼球明显变软甚至塌陷，角膜严重混浊水肿，前房看不清，内皮镜检查成像不清，已不能计数。C组在保存过程中，24、48h角膜外观较透明，无明显水肿

7、，但作角膜内皮镜检查时，因气泡使反光过强，多无法成像，内皮细胞不能计数。三组保存1、2、3、4d角膜内皮细胞苔盼兰．茜素红染色活性细胞百分率比较，以A组最好，C组次之，B组最差，统计学处理有显著性差异p

8、。角膜内皮细胞苔盼兰．茜素红联合染色活性细胞百分率比较，实验I组最高，未加SH的对照组最低，实验I组亦好于II、Ⅲ组，各组间比较有显著性差异(P