肺癌中循环肿瘤细胞的检测

《肺癌中循环肿瘤细胞的检测》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、国际肿瘤学杂志２０１２年７月第３９卷第７期ＪＩｎｔＯｎｃｏｌ，Ｊｕｌｙ２０１２，Ｖｏｌ３９，Ｎｏ７·５２３··综述·肺癌中循环肿瘤细胞的检测夏凡赵腾王艳【摘要】循环肿瘤细胞为肿瘤复发转移的重要原因，检测循环肿瘤细胞能早期发现肿瘤的转移及复发，同时也将有助于判断疾病预后、指导治疗。循环肿瘤细胞检测通常包含有筛选和分离技术如免疫磁性分选技术和逆转录聚合酶链反应等。随着检测技术的发展出现了将筛选和分析技术合为一体的循环肿瘤细胞检测芯片。【关键词】肿瘤循环细胞；肺肿瘤；检测技术Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎｔｅｃｈｎｉｑｕｅｏｆｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇｔｕｍｏｕｒｃｅｌｌｓｉｎｌｕｎｇｃａｎ

2、ｃｅｒＸＩＡＦａｎ，ＺＨＡＯＴｅｎｇ，ＷＡＮＧＹａｎ．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＯｎｃｏｌｏｇｙ，ＴｈｉｒｄＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＨａｒｂｉｎＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈａｒｂｉｎ１５００８１，Ｃｈｉｎａ【Ａｂｓｔｒａｃｔ】Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇｔｕｍｏｒｃｅｌｌｓ（ＣＴＣｓ）ａｒｅｅｓｓｅｎｔｉａｌｆｏｒｅｓｔａｂｌｉｓｈｉｎｇｒｅｃｕｒｒｅｎｃｅａｎｄｍｅｔａｓｔａｓｉｓｉｎｍａｌｉｇｎａｎｔｔｕｍｏｒｓ．ＤｅｔｅｃｔｉｎｇＣＴＣｓｃａｎｈｅｌｐｆｏｒｅａｒｌｙｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆｔｈｅｃａｎｃｅｒｍｅｔａｓｔａｓｅｓａｎｄｒｅｃｕｒｒｅｎｃ

3、ｅｓ，ａｎｄａｌｓｏｃａｎｈｅｌｐｆｏｒｅｖａｌｕａｔｉｎｇｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃａｎｄｇｕｉｄｉｎｇｔｒｅａｔｍｅｎｔ．ＣＴＣｓｄｅｔｅｃｔｉｏｎｔｅｃｈｎｉｑｕｅｍａｉｎｌｙｉｎｃｌｕｄｅｓｃｒｅｅｎｉｎｇａｎｄｓｅｐａｒａｔｉｏｎｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙｗｈｉｃｈｃｏｎｔａｉｎｓｉｍｍｕｎｅｍａｇｎｅｔｉｃｓｅｐａｒａｔｉｏｎｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙａｎｄｒｅｖｅｒｓｅｔｒａｎｓｃｒｉｐｔａｓｅｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎａｎｄｓｏｏｎ．Ｗｉｔｈｔｈｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆｔｅｃｈｎｉｑｕｅ，ｔｈｅｒｅｉｓａｎｅｗｔｅｃｈｎｉｑｕｅｎａｍｅｄｃｔｃｃ

4、ｈｉｐｃｏｎｔａｉｎｓｂｏｔｈｓｃｒｅｅｎｉｎｇａｎｄｓｅｐａｒａｔｉｏｎｆｕｎｃｔｉｏｎｓ．【Ｋｅｙｗｏｒｄｓ】Ｎｅｏｐｌａｓｍｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇｃｅｌｌｓ；Ｌｕｎｇｎｅｏｐｌａｓｍｓ；Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎｔｅｃｈｎｉｑｕｅ肿瘤转移是一个多阶段、多步骤的复杂过程。存性抗体与靶细胞上的抗原结合成靶细胞抗原抗体在于原发瘤和转移瘤之外的肿瘤细胞统称为游离肿瘤磁珠复合物，其在磁力作用下发生移动，进而与别的细胞，其中进入血流的又称循环肿瘤细胞（ｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇ物质分离，达到分离特异性细胞的目的。美国Ｖｅｒｉｔｕｍｏｒｃｅｌｌ，ＣＴＣ）。Ａｓｈｗｏｒｔｈ首次报道在患者外

5、周血中ｄｅｘ公司研发的ＣｅｌｌＳｅａｒｃｈ是目前美国食品和药品管发现类似肿瘤的细胞，并提出ＣＴＣ的概念。１９９１年，理局（ＦｏｏｄａｎｄＤｒｕｇＡｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ，ＦＤＡ）惟一批准Ｓｍｉｔｈ等首先应用反转录聚合酶链反应（ｒｅｖｅｒｓｅｔｒａｎ的ＣＴＣ检测方法。其基本步骤为：上皮细胞黏附因ｓｃｒｉｐｔｉｏｎｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＲＴＰＣＲ）检测实体子（ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌａｄｈｅｓｉｏｎｍｏｌｅｃｕｌｅ，ＥｐＣＡＭ）抗体磁肿瘤患者外周血中的肿瘤细胞。近年来，敏感分子技珠用于捕获ＣＴＣ，细胞角蛋白（ｃｙｔｏｋｅｒａｔｉｎ，ＣＫ）

6、荧光术的发展使得分离、计数外周血ＣＴＣ成为可能。ＣＴＣ抗体识别上皮细胞、ＣＤ４５抗体识别白细胞、４′６二脒５７在外周血中的数量稀少，大约每１０～１０个单核细胞基２苯基吲哚（ＤＡＰＩ）荧光核染料用于生成细胞图中才有一个ＣＴＣ。现有针对ＣＴＣ的检测技术大致分像。符合肿瘤细胞学形态特征并且ＣＫＰＥ＋、ＤＡＰＩ＋为细胞富集技术和分析技术两类。和ＣＤ４５细胞被定义为ＣＴＣ。该检测可自动分选从１细胞筛选富集技术上皮性肿瘤脱落后进入血液中的肿瘤细胞．只需要由于外周血中ＣＴＣ的数量非常少，对血液样本７．５ｍｌ血液样本，即可从４００多亿血细胞中检测到中的目标细胞进行富集以提高其检出

7、率，显得极为重一个ＣＴＣ。磁性细胞分选技术的策略包括阳性筛选、要。常见的细胞筛选富集技术如下。阴性筛选以及两种方法的结合。已有报道，其富集１１免疫磁性分选技术３４［１２］效率与一般的分离方法相比可提高１０～１０倍。免疫磁性分选技术（ｉｍｍｕｎｏｍａｇｎｅｔｉｃｓｅｐａｒａｔｉｏｎ，但该方法在缺乏细胞表面标志物的非上皮起源实体ＩＭＳ）采用纳米微粒制备成免疫磁珠，磁珠上的特异瘤（如肉瘤）细胞的应用受到限制，并且其在富集过程中可能存在ＣＴＣ丢失的风险。１２膜滤过法ＤＯＩ：１０．３７６０／ｃｍａ．ｊ．ｉｓｓｎ．１６７