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时间:2019-05-22
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1、山东农业大学博士学位论文银杏、火炬树活性成分及其抗螨性研究姓名:李中新申请学位级别:博士专业:农业昆虫与害虫防治指导教师:孙绪艮20071210关于学位论文原创性和使用授权的声明本人所呈交的学位论文,是在导师指导下,独立进行科学研究所取得的原创性成果。对在论文研究期间给予指导、帮助和做出重要贡献的个人或集体,均在文中明确说明。本声明的法律责任由本人承担。本人完全了解山东农业大学有关保留和使用学位论文的规定,同意学校保留和按要求向国家有关部门或机构送交论文纸质本和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授
2、权山东农业大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文,但其他单位或个人不得完整摘录发表本论文内容。保密论文在解密后应遵守此规定。论文作者签名:细巧导师签名:验盛很日期:趟山东农业大学博士学位论文中文摘要银杏(GinkgobilobaL.)是起源于二叠纪时期的蕨类植物,繁茂于侏罗纪时期,第三纪和第四纪地球的巨变和随后的冰川摧毁了世界上银杏树,凭借我国优越的地理位置和气候条件得以幸免,因此素有“植物活化石"、“植物界熊猫"之美誉
3、。银杏是闻名遐迩的药用植物,特别对预防和治疗心脑血管疾病、老年性痴呆等具有显著疗效,并相继开发出药品、保健品、化妆品、饮品等,同时银杏还具有抗虫特性。鉴于植物源杀虫剂对环境友好、不易产生抗药性等优点,对银杏抗虫性研究逐渐成为热点,但目前研究的靶标害虫比较少,尤其缺乏对农业危害较为严重的害螨的研究,另外,国内外对银杏的抗虫活性成分也没有一致的观点。本文旨在明确银杏和火炬树对二斑叶螨TetranychusurticaeKoch和山楂叶螨TetranychusviennensisZacher的抗性,进而
4、筛选抗螨性成分及提取工艺。分别采用培养皿法测定叶螨对银杏叶的选择性,以及在限制性条件下银杏叶对两种叶螨生存和产卵的影响;利用固相微萃取(Solidphasemicroextraction,SPME)采集、GC.MS测定银杏叶挥发性成分,“Y’’型嗅觉仪测定它们对叶螨选择行为的影响;分别利用8种银杏单体成分、1种银杏总酸测定它们对叶螨的拒食性和触杀性;另外,比较了微波处理银杏叶水浸液联合乙醇和乙醚提取、溶剂提取与碱性溶液结合提取和乙醚萃取与大孔树脂吸附三种工艺的提取物对山楂叶螨的毒力。结果证明:l、
5、银杏叶对两种叶螨的拒食率均为100%;在限制性条件下叶螨在银杏叶上的生存时间缩短、产卵被抑制。2、初步鉴定出壬酸、十四酸、十五酸、十六酸、6,10,14---_三甲基-2-十五烷酮、二苯甲酮、丁羟甲苯、4,6一二特丁基~2一甲基苯酚、3一甲基一2一丁烯醇、5,7一二甲基一l,8一萘啶一2氨、卜甲基-9H-I耽哆[3,4.b]吲哚一7一醇和卜苯-5一(1-蒎)一4一己烯一2一炔酮等12种银杏叶挥发性成分。3、在两组气味源中(银杏叶一苹果叶、银杏叶一空气),二斑叶螨和山楂叶螨对银杏叶的选择率分别为22
6、.2%、21.3%和23.5%、24.8%,与对照气味源选择率差异显著;从银杏活性成分中筛选出对二斑叶螨拒食率较高的异鼠李素、山奈素、银杏内酯C,A,B和十三烷基银杏酸,对山楂叶螨拒食率较高的山奈素、异鼠李素、银杏内酯A,B、银杏、火炬树活体成分及冀抗螨件研究白果内酯和银杏总酸。银杏内酯A对山楂叶螨48h的校正死亡率达74.0696,其次为十三烷基银杏酸(52.36%),而其他所测成分均在2596以下。4、银杏叶粉经乙醚萃取与DMl30大孔树脂吸附后的流出液对山楂叶螨的校正死亡率达93.25%,其
7、次为80%乙醇洗脱液(76.4%),而甲醇:乙酸乙酯(80:20VⅣ)洗脱液和596NaOH洗脱液的校正死亡率均在50%以下;银杏叶粉经冷水浸提、70%7,醇处理和乙醚富集后对山楂叶螨的校正死亡率达91.38%,而微波处理银杏叶粉水浸液及有机溶剂与碱性溶液结合提取物对山楂叶螨的触杀效果较差。5、本文采用与银杏近乎相同的方法研究了火炬树叶对二斑叶螨和山楂叶螨的抗性。结果证明:两种叶螨对火炬叶的选择率在10%以下;在限制性条件下叶螨在火炬树叶上的生存时间明显缩短,产卵被抑制。6、初步鉴定出十八烯、a一
8、法昵烯、l,12一十三二烯、4一庚醇、4一甲基一卜丙烯一3一醇、3,7,11~三甲基一2,6,10一二十二三烯一卜醇、苯甲酸乙酯、水杨酸甲酯、4,6一二特丁基-2-甲基苯酚、丁基化羟基甲苯和2一甲基一2一丁烯酸等11种火炬叶挥发性成分。7、在两组气味源中(火炬叶一苹果叶、火炬叶一空气),二斑叶螨和山楂叶螨对火炬叶的选择率分别为9.3%、28.9%和5.6%、28%,与对照气味源选择率差异显著;火炬叶粉经95%乙醇回流提取、DMl30树脂柱吸附后的石油醚:乙酸乙酯(65:35VⅣ)洗
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