定向迁移细胞前沿α4整合素对Rac局部化活活的分子调控机制

《定向迁移细胞前沿α4整合素对Rac局部化活活的分子调控机制》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、分类号密级学校代码一_1旦542学号201202141189定向迁移细胞前沿a4整合素对Rac局部化激活的分子调控机制Regulationofa4IntegrinonLocalizedRacActivationinLeadingEdgeofDirectedMigratingCells研究生姓名李思锐指导教师姓名、职称郭向荣学科专业遗传学研究方向细胞信号转导湖南师范大学学位评定委员会办公室二零一五年四月万方数据摘要本研究项目根据己发表的，激活的整合素α4在细胞尾部、两侧，负调控Rac活性的倍号转导通路的研究结果，结合相关倍号分子的结构、功

2、能，提出在细胞前沿，整合素正调控Rac活性的倍号转导通路，即当α4胞内区域磷酸化进而抑制其与paxillin结合时，paxi1lin、GITl，与PIX、PAK形成倍号分子复合物。由于PAK为Rac的效应分子，PIX为Rac的转换分子，构成了paxillin-GITI-PIX刷PAK信号转导浦路，从而促使Racl在细胞前沿持续的局部化激活，导致片状足的形成，产生细胞向前迁移推动力的全新构想。首先我们将验证hFN对Rac蛋白的激活，然后我们将采用免疫印迹实验，初步证明这蜡蛋白在细胞前沿存在两两相互作用，即该处存在这样的信号分子复合物，进而

3、通过荧光双定位验证这些分子问的相互作用可以发生在细胞前泪，最府通过FRET单分子探针，实时、定最高分辨率的监测Rac的激活时空变化图像。关键词:激光共聚焦显微镜技术;Rac蛋白激活;免疫印迹;FRE丁探针;荧光双边位万方数据ABSTRACTRacactivationisstronglyregulatedspaciallyandtemporallyinmigratingcells,leadingtotheformationofspecificcellprotrusion-l田nellipodiainleadingedgeofthecell

4、sandgeneratingthepushingforcetoputthecellsforward,butthemolecularmechanismofpositiveregulationoflocalizedRacactivationremainsunclear.Thisprojectproposesthatthephosphorylationoftheintracellularα4integrininhibitstheinteractionofa4withpaxillin，由usthesignalingpa伽waypaxillin嗣

5、GITI-PIX-PAKwouldbeformed,leadingtolocalizedRacactivationinleadingedgeofthemigratingcells.First,weverifiedtheactivationofhFNonRacprotein.Second,WeprovedtheeXÎstenceoftheSignalmoleculecomplexesPreviouslybywestemblotwhichshowed也就theinteractionsaccuratelyexistbetweenthecyto

6、skeletonproteinsGITlandpaxillinorPIXrespectively.ηlird，weconfirmed也attheseinteractionsbetweenGITlandpaxi11inorPIXemergedinleadingedgeofcells.Forth,weusedFR卫TsinglemoleculeprobetodetecttheactivationofRac.KeyWords:Confocallaserscanningmicroscopy;ActivationofRacprotein;West

7、emblot;FRETsingle-moleculeprobe;DoublefluorescencelocalizationII万方数据万方数据目录摘要.........................................................................................................1ABSτRACT....................……..，......…………·…".......……………………...........II缩略词我.....………………

8、…………………………………·….......…......................1111号

9、育句文献综述..""'......"'......"'.."'.....…..…………………………………