大鼠三叉神经节神经元膜P2X嘌呤受体的特征

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1、华中科技大学硕士学位论文大鼠三叉神经节神经元膜P2X嘌呤受体的特征姓名：谷远征申请学位级别：硕士专业：神经生物学指导教师：李之望;李超英2003.4.1犯j、≥狮分、中文摘要第一部分：。大鼠三叉神经节神经元膜P2X嘌呤受体的特征大鼠三叉神经节(trigeminalganglionTG)神经元根据直径大小可分为三类：小细胞(<30J．tm)，中等细胞(30～40ptm)，大细胞(>40p．m)。结果发现，大部分受检细胞(78．9％，142／180)对ATP敏，感，ATP一激活电流有明显的浓度flo’。1．10。mol／L)依赖性关系。(少数细胞、、无反应(21．1％，38／180)。在

2、对ATP敏感的142个细胞中，绝大部分引起一内向电流(95．1％，135／142)，少数为外向电流(2．1％，3／142)，另有部分细胞出现双相电流(2．8％，4／142)。引起的内向电流在小直径细胞上多表现为快去敏感电流，且多数细胞对capsaicin高度敏感：在中等大小的细胞上多表现为慢去敏感电流，且多数细胞对capsaicin不敏感；而绝大多数大细胞对ATP和capsaicin均不敏感。电流的波形与细胞的赢径密切相关。无论小细胞还是中等大小细胞其I．v曲线均表现出明显地内向整流趋势。而且也对ATP．激活电流的动力学特征以及P2嘌、呤受体激动剂、拮抗剂对其影响也做了研究。以出结果

3、提示：不同类型／的ATP受体一离子通道在不同类型的TG神经元上的表达具有不同的特点。而在另一部分实验中，用HRP和荧光染料逆行追踪支配牙泡之痛敏神经元，并结合原位杂交对其P2X3R进行了研究。结果发现：支配牙泡之TG神经元中有P2X3RmRNA的表达。关键词：三叉神经节神经元，ATP-激活电流；P2受体j全细胞膜片钳逆行追踪第二部分：大鼠三叉神经节神经元sP受体介导的电流本实验在大鼠新鲜分离的三叉神经节神经元标本上应用全细胞膜片筘，观察了SP．激活电流及其现象。，(大鼠三叉神经节(trigeminalganglionTG)神经元根据直径大小可分为三类：小细胞(<301Jm)，中等细胞

4、(30—40I_tm)，大细胞(>40pm)。在本实验中共检测了110个细胞，外加SP(10一～10-5mol／L)于急性分离之三叉神经节神经元，共有57个受检细胞对SP有反应(51．8％，57／110)，其闽浓度为10-8mol／L，但无明显的浓度依赖性关系。小直径细胞对SP有反应的占总数的47．9％(34／71)，中等直径细胞为67．4％(23／34)，而大直径细胞(5例)均对SP无反应。在对sP有反应的57个细胞中大多数是内向电流(98．2％，56／57)，只有一例细胞记录到外向电流(1．8％，U57)。引起的内向电流多表现为去敏感电流(desensitivingcurrent

5、)，与细胞直径大小似无关系。从其电流．电压关系来看：正常SP．激活电流的I．V曲线并未出现逆转现象，用Cs+阻断K+通道后发现其逆转电位大约为+20mV，Na+和ca2+的平衡电位。用总的电流减去Na+和ca”电流成分后的I．v曲线的趋势显示：工F常、sP一激活电流可能有K+电导减小之改变。以出结果提示：在TG神经元，SP·激活电流可能是由于Na+电导的增加，K+电导的减小所致。关键词：大畋SP受体j三叉神经节神经元，全细胞膜片钳、sP激活电流第三部分：支配牙泡的三叉神经节痛觉传入神经元的急性分离和逆行追踪标记方法由于支配牙泡之神经元为纯痛感觉细胞，因此该细胞是可视为研究痛觉信息传递

6、的良好模型。本文介绍了一种支配牙泡的三叉神经节(TG)痛觉传入神经元的逆行追踪标记和急性分离方法。用辣根过氧化物酶(HRP)和核黄(nuclearyellow)注入牙泡内，通过逆向轴浆运输可以分别追踪到支配牙泡之TG痛觉传入神经元胞体。并且对其特点进行了分析：用HRP追踪到的神经元因用组织化学方法处理后失去活性不能进行膜片钳实验，而用核黄追踪到的细胞却具有生理活性，所以可以用来进行全细胞膜片钳实验，能方便地对其细胞膜上的受体及离子通道进行研究。关键词：牙泡核黄HRP逆行追踪、TG神经元+／‘AbstractParthCharacteristicsofP2Xpurinoceptorsi

7、nthemembraneofrattrigeminalganglionneuronsRattrigeminalganglion(TG)neuronscarlbedistinguishedintothreegroupsaccordingtotheirbodydiameter．Smallsizedcell(<309m)，mediumsizedcell(30～409m)，largesizedcell(>40“m)．Themajorityoftheneuronse