内皮祖细胞与噪音性耳聋耳蜗损伤的关系

内皮祖细胞与噪音性耳聋耳蜗损伤的关系

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时间:2019-05-21

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1、分类号:R651密级:学位类别:科学学位口专业学位口。博士学位论学校代码:10062学号:20094033学科门类:医学又肄酱科文垮TIANJINMEDICALUNlVERSHY文DOCTORALDISSERTATION论文题目:内皮祖细胞与噪音性耳聋耳蜗损伤的关系TITLETheresearchoftherelationshipbetweenEPCsandthedamageofcochleainnoise-inducedhearingloss一级学科:临床医学二级学科:外科学神经外科仰配少r科论文作者:杨东指导教师:张建宁教授

2、导师组成员:周慧芳教授天津医科大学研究生院二O一二年五月学位论文原创性声明本人郑重声明:所呈交的论文是我个人在导师指导下独立进行研究工作取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容和致谢的地方外,论文中不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果,与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。学位论文作者躲监日期.劲7绛瑚3铂学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解天津医科大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,并采用影印、缩印

3、或扫描等复制手段保存、汇编以供查阅和借阅。同意学校向国家有关部门或机构送交论文,并编入有关数据库。保密口,在——年解密后适用本授杈书。本论文属于不保密囹。(请在相对应的方框内打“√")学位论文作者签名:旦垒:茔:日期:≯侈年丁月歹。日导师签名:日期:劲,)年玉月如日天津医科大学博士学位论文目的:中文摘要:1、建立噪声导致的内耳损伤的动物模型,在噪声性耳聋的动物模型上观察听功能的变化、内耳毛细胞的损伤情况,建立内耳损伤修复的研究平台。2、观察外周血EPCs的变化和耳蜗血管纹中VEGF、iNOS在噪声暴露后表达变化,阐述噪声性耳聋的

4、耳蜗组织损伤与修复过程中的发病机理。3、通过干预内源性EPCs,探讨对于噪声性耳聋耳蜗损伤的预防和治疗采取的措施。方法:取健康体重约2509---3009成年SD大鼠应用118±IdBSPL白噪声持续暴露4小时建立噪声性耳聋模型,实验分组为:对照组:未进行噪声暴露;噪声暴露即刻组:噪声暴露后即刻检测;噪声暴露1天组:噪声暴露后1天检测;噪声暴露3天组:噪声暴露后3天检测;噪声暴露7天组:噪声暴露后7天检测,;噪声暴露14天组:噪声暴露后14天检测;各组均为10只;将试验分为两部分,一为单纯噪声暴露对耳蜗损伤修复的影响,二为干预内

5、源性EPCs后噪声暴露对耳蜗损伤修复的影响。SD大鼠根据噪声暴露后即刻组、1天组、3天组、7天组和14天组的分组分别检测各组大鼠的ABR听阈改变、通过Fillo密度梯度离心法获得单个核细胞流式细胞仪鉴定SD大鼠外周血中EPCs数量、通过Western印记和耳蜗冰冻切片免疫组化观察耳蜗血管纹VEGF、iNOS和CD34的表达变化,同时对噪声暴露后的耳蜗行扫描电镜观察。应用EPO皮下注射提高内源性EPCs数量、半胱氨酸饲料喂养制备内源性EPCs数量降低的模型和NS皮下注射,分别观察SD大鼠噪声暴露后即刻组、1天组、3天组、7天组、和

6、14天组ABR听阈改变。结果:天津医科大学博士学位论文1、噪声暴露后即刻组ABR阈值为最高,其听阈为86.67_+6.85dBSPL,听力损伤最为明显,属于TTS期:噪声暴露后7天和14天ABR阈值部分恢复,阚值降低,属于PTS期,其听阙分别为为56.18±5.29dBSPL和57.92±6.20dBSPL;2、对各组外周血中的EPCs进行测定,观察到EPCs于噪声暴露后1天时最高,数值为91.40+_8.13/20万个单核细胞;噪声暴露后14天时EPCs恢复接近正常水平,数值为29.00+14.56/20万个单核细胞;3、免疫

7、组化及V/estern印记表明噪声暴露后1天vEGF和iNOS出现高峰,噪声暴露后即刻组表达最低,CD34于噪声暴露后3天和7天达到高峰;4、通过干预内源性EPCs,EPCs升高组对于听力的保护作用明显高于EPCs抑制组。4、EPCs在内耳损伤后的修复过程中,有促进血管生成,改善内耳徼环境的作用,降低EPCs可以导致听力较为严重的下降,提高内源性EPCs的释放,可以保护耳蜗减轻噪声对耳蜗的损伤加快耳蜗损伤后的恢复。结论:1、噪声性耳聋最终可导致耳蜗损伤,随着时间改变外周血中EPCs的数量也发生改变;2、VEGF、iNOS参与噪声

8、性耳聋损伤与修复的各个阶段,VEGF和EPCs在噪声损伤的耳蜗血管修复的不同阶段均发挥作用;3、EPCs在噪声性耳聋耳蜗损伤与修复过程中起着关键作用。关键词:内皮祖细胞噪声性耳聋血管内皮生长因子耳蜗听性脑干反J应II天津医科大学博士学位论文Objective,A

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