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时间:2019-05-21
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1、电化学发光免疫分析技术简介演讲人:赵志德演讲时间:2010-3-18内容标记免疫的发展简介电化学发光技术原理电化学发光技术特点内容标记免疫的发展简介电化学发光技术原理电化学发光技术特点免疫测定的发展和应用免疫测定标记免疫测定(ng-pg)免疫浊度测定(µg-ng)放射免疫测定法酶免疫测定法荧光免疫测定法化学发光免疫测定法电化学发光免疫测定法免疫速率散射浊度测定法免疫透射浊度测定法免疫胶乳浊度测定法标记免疫技术的发展酶免电化学发光荧光免疫化学发光放射免疫1960’S1970~80’S2000’S内容标记免疫的发展简介电化学发光技术原理电化学发光技术
2、特点电化学发光免疫分析(ECLIA)-Eletro-chemiluminescenceimmunoassay什么是电化学发光免疫分析(ECLIA)?∑ECL是一种在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应,是电化学和化学发光两个过程的完美结合∑电化学发光免疫测定是电化学发光(ECL)和免疫测定相结合的产物,是目前非常先进的标记免疫测定技术。ELECTROCHEMILUMINESCENCEIMMUNOASSAY专利的电化学发光检测技术免疫复合物钌标记物亲和链霉素生物素磁性微粒子•Paramagneticmicroparticle-SB-AgAbco
3、mplexlabelledwith[Ru(bpy)]2+3+•反应时间:18分钟电化学发光技术主要技术•三联吡啶钌标记技术•链霉亲和素-生物素技术•磁性微粒子技术•电启动的化学发光反应专利的电化学发光检测技术钌复合物标记•三联吡叮钌复合物[Ru(bp)]2+3+标记;•水溶性小分子,免疫损伤小;•结构稳定,受干扰影响小;•与三丙胺(发光电子供体)共同参与氧化还原反应;•应用广泛(激素,核酸等)三联吡啶钌N羟基琥珀酰胺(NHS)酯电化学发光具有广泛的检测空间夹心法捕获法竞争法核酸检测磁性微粒子抗原抗体探针钌标记物亲和素-生物素电化学发光技术主要技术
4、•三联吡啶钌标记技术•链霉亲和素-生物素技术•磁性微粒子技术•电启动的化学发光反应专利的电化学发光检测技术共价配合物•生物素-链霉亲和素耦联体系•1分子亲和素+4分子生物素•结合力强,特异性高•提高检测灵敏度电化学发光技术主要技术•三联吡啶钌标记技术•链霉亲和素-生物素技术•磁性微粒子技术•电启动的化学发光反应专利的电化学发光检测技术磁性颗粒载体•直径仅2.8um,体积小,悬浮于液体中,构成均一,稳定的类均相试剂•凹凸不平,增强包被效率•磁性吸引,易于AgAb复合物的结合分离•反应前仪器自动混匀电化学发光技术主要技术•三联吡啶钌标记技术•链霉亲和
5、素-生物素技术•磁性微粒子技术•电启动的化学发光反应电极表面的电化学发光反应电化学发光信号的检测-稳定的检测窗口电化学发光免疫反应全过程电化学发光免疫反应过程-1.反应杯的标记免疫反应钌标记物亲和链霉素生物素磁性微粒子ElecsysHIVCombi图解第四代抗原抗体联合检测单克隆HIV抗体检测使用大量的重组抗原P24抗原gp41/gp36和RT来检测IgGandIgM抗体电化学发光免疫反应过程-2.测量池中的ECL反应光电倍增管电极电极清洗液工作电极磁铁电化学发光免疫反应过程-2.测量池中的ECL反应光电倍增管电极电极TPATPATPATPA工作
6、电极磁铁电化学发光免疫反应过程-3.电极表面的电化学发光反应内容标记免疫的发展简介电化学发光技术原理电化学发光技术特点电化学发光技术特点•试剂稳定•测量范围宽,灵敏度高•特异性优异•检测菜单丰富•准确性好,精密度高•操作简便•试剂稳定性-货架期18个月,开封后3个月电化学发光技术特点•试剂稳定•测量范围宽,灵敏度高•特异性优异•检测菜单丰富•准确性好,精密度高•操作简便检测范围宽,减少稀释高灵敏度可用于感染的早期检测ElecsysHBsAg第四代HIV同时检测HIVP24抗原和抗HIV抗体的试剂缩短窗口期,提高检测安全性电化学发光技术特点•试剂稳
7、定•测量范围宽,灵敏度高•特异性优异•检测菜单丰富•准确性好,精密度高•操作简便Elecsys®Anti-HCV献血员中的特异性:99.71%Elecsys®HIVcombi献血员中的特异性:99.74%COIElecsys®HIVcombi临床特异性优异(常规标本)特异性达到99.63%Elecsys®Anti-HCV对于各种基因型的检出Elecsys®HIVcombi检测HIV变异识别所有基因型和变异株电化学发光技术特点•试剂稳定•测量范围宽,灵敏度高•特异性优异•检测菜单丰富•准确性好,精密度高•操作简便丰富的检测菜单甲状腺功能激素肿瘤标志
8、物心肌标志物传染性疾病自身免疫Anti-TGACTHAFPCK-MBAnti-HAVAnti-CCPAnti-TPOCA125IIDig
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