化学发光法在梅毒血清学检测的应用

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1、化学发光法在梅毒血清学检测的应用中山大学附属第一医院刘敏梅毒中国流行情况Infectionsgrew8timesfrom2003-2013400,000newSyphilisinfections/yearSource:SyphilisinChinafrom2000to2013epidemiologicaltrendsandcharacteristics梅毒传播途径及高危人群需加大对高危人群的筛查梅毒传播途径•高风险人群:•HIV患者(梅毒感染增高HIV传播和感染的风险)•男男性行为者(MSM)•静脉注射吸毒者•性工作者输血性接触母婴传播先天性梅毒梅毒通过胎盘由母亲传

2、播给胎儿，发生先天性梅毒。梅毒感染早期的母亲传播梅毒给胎儿的机率最高,但是整个怀孕期，甚至分娩时，母亲都能传播梅毒给胎儿。诊断《梅毒诊断标准》（2007）指出，梅毒诊断须根据病史、临床症状、体格检查及实验室检查等进行综合分析，慎重诊断梅毒实验室检查对诊断具有重要性意义梅毒血清学模式IgGIgMInfectionVRDL/RPRAntibodytiter0246Weeks6Months>1Year感染时间同时检测特异性IgM+IgG=早期诊断梅毒实验室检测策略非梅毒螺旋体抗原血清试验(测抗类脂抗体)NTrAT快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)经典策略甲苯胺红不加热血清试

3、验（TRUST）采用任何一种非梅毒螺旋体性病研究实验室试验(VDRL)抗原血清试验对样品进行初梅毒螺旋体抗原血清试验(测抗TP抗体)TrAT梅毒螺旋体颗粒凝集试验(TPPA)筛梅毒螺旋体血球凝集试验(TPHA)新策略梅毒酶联免疫吸附试验（ELISA）梅毒金标记免疫层析法-梅毒快速检测(RT)采用任何一种梅毒螺旋体抗荧光螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS）原血清试验对样品进行初筛化学发光免疫分析法（CLIA）梅毒IgM抗体检测（IgM）梅毒螺旋体蛋白印迹试验（WB）7梅毒的检测方法---病原学/血清学梅毒实验室检测抗原检测抗体检测暗视野显微镜检镀银染色梅毒螺旋体抗原试验非

4、梅毒螺旋体抗原试验核酸检测兔感染试验FTA-ABSVDRLTPHA/TPPARPR除核酸检测外，其余ELISA/CLIATRUST方法繁琐，不适合实WB/TPI/金标验室常规检测筛查实验确证实验TP-ELISATPPATP-CIATP-WB非密螺旋体抗体试验（NTrAT）所测------抗类脂抗体,也称反应素•多用牛心肌的心脂质作为抗原，测定患者血清中的反应素（抗脂质抗体）。初期梅毒病灶出现后1～2周，血清中反应素的阳性率为53％～83%，二期梅毒的阳性率可达100%，晚期梅毒的阳性率为58％～85%，胎传梅毒的阳性率为80％～100％。•这些试验在老年人、自身免疫病(

5、SLE、干燥综合征、类风湿性关节炎、抗磷脂抗体综合征等)、恶性肿瘤、麻风病、动静脉血栓形成、反复自然流产以及吸毒者中都有一定的阳性率。•不仅适用于一、二期梅毒的诊断、疗效观察以及复发或再感染的检测，也适用于大量人群的筛查、婚检、产前检查和其他健康查体等。此类试验阳性时需用密螺旋体抗原试验进行确证。密螺旋体抗体试验(TrAT)所测的为--------抗TP的IgG/IgM类抗体•即用密螺旋体抗原检测患者血清中特异性抗体，具有更高的特异性和敏感性，主要用于梅毒的确证，不适用于疗效考察。•试验中所用抗原:.或为TP的Nichols株冻干悬液(FTA-ABS);.或为Nicho

6、ls株超声处理(或SDS提取)的材料(TPHA、TPPA),.或为纯化的/基因重组的的TP特异抗原(ELISA、金标记免疫层析、免疫印迹)。梅毒检测流程---各国检测流程不同（尚无检测金标准）欧洲美国•梅毒螺旋体抗原试验可单独用•过去:用非梅毒螺旋体抗原试验进行于筛查筛查，有反应性的样本用梅毒•不建议将非梅毒螺旋体抗原试螺旋体抗原试验进行重测验用于筛查（感染晚期灵敏度•现在:大样本量的实验室已经开始使较差，存在生物学假阳性）用自动化梅毒螺旋体抗原试验进行筛查，用非梅毒螺旋体抗原试验做确认。WHO.1999;CDC.2010;Workowskietal.MMWRRecom

7、mRep2010;Frenchetal.IntJSTDAIDS2009.梅毒血清学试验流程及报告特异性梅毒螺旋体抗体血清试验（ELISA、TPPA、TP-CLIA等）阳性阴性TRUST定性/定量检测报告：TP-CLIA阴性ELISA阴性阳性阴性报告：报告：TRUST阴性推荐TPPA/WB复检TRUST阳性（及滴度）报告：TPPA阴性TPPA阳性TRUST阴性CLIA阳性发光及ELISA阳性TPPA/CLIA阳性阳性阴性ELISA阳性免疫印迹阳性免疫印迹阴性2014EuropeanGuidelineontheManagementofSyph